Drug-induced hepatotoxicity is an i

Drug-induced hepatotoxicity is an important cause for disapproval, limitations of use, or withdrawal of drugs, and there is a high need for reproducible in vitro systems that can predict such toxicity. In this study, we show that confluent growth of the human hepatoma cell line Huh7 up to 5 weeks results in increased gene expression of several cytochromes P450 (P450s), UDP-glucuronosyltransferases, transporters, transcription factors, and several liver-specific genes, as measured by low-density array. The most striking effect was seen for CYP3A4 expression. Western blot analysis revealed increased amounts of CYP3A4 together with increased levels of NADPH-P450 reductase, cytochrome b(5), and albumin with prolonged time of confluence. By using the CYP3A4-specific substrates luciferin 6' benzyl ether, testosterone, and midazolam, we could confirm that the increased CYP3A4 gene expression also was accompanied by a similar increase in catalytic activity, inhibitable by the CYP3A4-selective inhibitor ketoconazole. The CYP3A4 activity in confluent cells was also inducible by rifampicin. Finally, the cell system could support the CYP3A4-dependent hepatotoxic activation of aflatoxin B(1), which was effectively inhibited by ketoconazole. Our results show that Huh7 cells grown confluent differentiate into a more metabolically competent cell line, especially with regard to CYP3A4.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ยาเกิด hepatotoxicity เป็นสาเหตุสำคัญสำหรับความผิดหวัง จำกัดการใช้งาน หรือถอนยาเสพติด และอยู่สูงจำเป็นสำหรับระบบการเพาะเลี้ยงจำลองที่สามารถทำนายความเป็นพิษดังกล่าว ในการศึกษานี้ เราแสดงที่ confluent เจริญเติบโตของรายการเซลล์มนุษย์ hepatoma Huh7 ถึง 5 สัปดาห์ผลเพิ่มยีนของหลาย cytochromes P450 (P450s), UDP glucuronosyltransferases ผู้ ปัจจัย transcription และตับเฉพาะ ยีนหลาย วัดโดยเรย์นความหนาแน่นต่ำ ลักษณะโดดเด่นที่สุดที่เห็นสำหรับนิพจน์ CYP3A4 คืนในตะวันตกตาวิเคราะห์เปิดเผยจำนวนเงินเพิ่มของ CYP3A4 ร่วมเพิ่มขึ้น และระดับ ของ NADPH P450 reductase, cytochrome b(5), albumin มีเวลานานบรรจบ โดยใช้ CYP3A4 เฉพาะพื้นผิว luciferin 6 benzyl อีเทอร์ ฮอร์โมนเพศชาย และ midazolam เราไม่สามารถยืนยันได้ว่า ยีน CYP3A4 เพิ่มได้มา โดยเพิ่มขึ้นคล้ายในกิจกรรมตัวเร่งปฏิกิริยา inhibitable โดย ketoconazole สารยับยั้ง CYP3A4 เลือก กิจกรรม CYP3A4 ในเซลล์ confluent inducible ด้วย rifampicin ยังได้ ในที่สุด ระบบเซลล์สามารถสนับสนุนการเรียกใช้ hepatotoxic CYP3A4 ขึ้นอยู่กับของ aflatoxin B(1) ซึ่งถูกห้ามอย่างมีประสิทธิภาพ โดย ketoconazole ผลของเราแสดงว่า เซลล์ Huh7 โต confluent แบ่งแยกบรรทัดเซลล์ขึ้น metabolically อำนาจ โดยเฉพาะอย่างยิ่งเกี่ยวกับ CYP3A4

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เกิดพิษต่อตับยาเสพติดที่เกิดขึ้นเป็นสาเหตุสำคัญสำหรับความไม่พอใจข้อ จำกัด ในการใช้งานหรือการถอนตัวของยาเสพติดและมีความต้องการสูงสำหรับการทำซ้ำในระบบการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อที่สามารถคาดการณ์ความเป็นพิษดังกล่าว ในการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าเราเจริญเติบโตไหลมารวมกันของเซลล์ตับของมนุษย์สาย Huh7 ถึง 5 สัปดาห์ที่ผ่านมาส่งผลให้เกิดการแสดงออกของยีนที่เพิ่มขึ้นของหลาย P450 cytochromes (P450s), UDP-glucuronosyltransferases, ขนส่ง, ถอดความปัจจัยและยีนตับเฉพาะหลายเช่น วัดจากอาร์เรย์ความหนาแน่นต่ำ ผลที่โดดเด่นที่สุดก็เห็นการแสดงออก CYP3A4 การวิเคราะห์ดวงตะวันเปิดเผยเพิ่มขึ้นปริมาณของ CYP3A4 ร่วมกับระดับที่เพิ่มขึ้นของ reductase NADPH-P450, cytochrome ข (5) และอัลบูมิที่มีเวลานานบรรจบกัน โดยการใช้พื้นผิว CYP3A4 เฉพาะ luciferin 6 'อีเธอร์เบนซิล, ฮอร์โมนเพศชายและ midazolam เราสามารถยืนยันได้ว่าการแสดงออกของยีน CYP3A4 ที่เพิ่มขึ้นนอกจากนี้ยังมาพร้อมกับการเพิ่มขึ้นของที่คล้ายกันในการเร่งปฏิกิริยา, inhibitable โดยยับยั้ง CYP3A4-เลือก ketoconazole กิจกรรม CYP3A4 ในเซลล์ไหลมารวมกันก็ยังถูกกระตุ้นโดย rifampicin ในที่สุดระบบเซลล์สามารถสนับสนุน CYP3A4 ยืนยันการใช้งานขึ้นอยู่กับตับของอะฟลาท็อกซินบี (1) ซึ่งถูกยับยั้งอย่างมีประสิทธิภาพโดย ketoconazole ผลของเราแสดงให้เห็นว่าเซลล์ Huh7 เติบโตไหลมารวมกันความแตกต่างในสายพันธุ์ของเซลล์ที่มีความสามารถมากขึ้นเมตาบอลิโดยเฉพาะอย่างยิ่งในเรื่องเกี่ยวกับ CYP3A4

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เกิดจากยาพิษเป็นสาเหตุสำคัญที่ก่อให้เกิดความไม่พอใจ ข้อจำกัดของการใช้ หรือถอนยา และมีความต้องการสูง ซึ่งในระบบหลอดทดลองที่สามารถคาดเดาความเป็นพิษดังกล่าว ในการศึกษาครั้งนี้ได้แสดงให้เห็นว่าการเติบโตของเซลล์ตับมนุษย์กระจู๋กระจี๋ huh7 ถึง 5 สัปดาห์ ผลในการเพิ่มการแสดงออกของยีนไซโตโครมพี 450 ( หลาย p450s )glucuronosyltransferases UDP , ขนส่ง , ปัจจัยการถอดความและยีนเฉพาะตับหลายวัดโดยความหนาแน่นเรย์ ผลที่โดดเด่นที่สุดที่เห็นในการแสดงออก ( . การวิเคราะห์ Western blot พบเพิ่มขึ้นจํานวน ( พร้อมกับการเพิ่มขึ้นของระดับเอนไซม์ไซโตโครม nadph-p450 , B ( 5 ) , และอัลบูมินด้วยเวลานานของการบรรจบกันโดยเฉพาะการสร้างพื้นผิว ลูซิเฟอรีน 6 ' เบนซิลอีเทอร์ , testosterone และมิดาโซแลม เราสามารถยืนยันได้ว่าเพิ่มขึ้น ( ยีน ก็พร้อม โดยเพิ่มกิจกรรมคล้ายกันใน catalytic inhibitable โดยเลือกใช้ ( คีโตโคนาโซล การสร้างกิจกรรมในแบบรวมกลุ่มเซลล์ยัง inducible โดย rifampicin . ในที่สุดระบบเซลล์สามารถสนับสนุนการสร้างขึ้นอยู่กับโรคเอดส์ อะฟลาทอกซิน บี ( 1 ) ซึ่งสามารถยับยั้งโดยคีโตโคนาโซล ผลของเราแสดงให้เห็นว่าเซลล์โต huh7 กระจู๋กระจี๋แยกเป็นอีก metabolically เชี่ยวชาญไพรที โดยเฉพาะที่เกี่ยวกับ
( .