2.5. Microbiological analysis
For each treatment ten olives were aseptically removed from fermentation
brine, drained and placed into a flask containing 100 ml of
sterile saline water. Flasks were shaken in a rotary shaker incubator at
25 °C (Lab Line Orbit-Environ Shaker, Lab-Line Instr., Melrose Park, IL,
USA) at 100 rpm for 1 min to remove “loosely attached” microorgan-
isms to olive skin. Then the olives of each sample were removed,
drained in Laminar air flow cabinet, pitted under sterile conditions
and 20 g of the pulp transferred to a sterile bag containing 180 ml of
sterile diluent containing NaCl (8.5 g/l) and Tween 80 (1 ml/l). The mixture
was homogenized for 60 s using a Stomacher Lab-Blender 400
(Seward Medical, London, UK). Microorganisms remaining after rinsing
were considered to be “strongly attached” microorganisms in olives and
enumerated as CFU/g.
Appropriate dilutions of the above samples were prepared in sterile
peptone water (1 g/l) and inoculated in duplicate in growth media to
estimate microbial counts.
Lactic acid bacteria (LAB) were counted by cultivating the suitable
dilutions of the sample on MRSA supplemented with 200 ppm cyclo-
heximide and 0.02% w/v NaN
grown anaerobically (GasPak, BBL,
Cockeysville, MD) at 30 °C for 72 h. Yeasts and molds were counted
on potato dextrose agar (PDA, Merck, Darmstadt, Germany) adjusted
to pH 3.5 with tartaric acid incubated at 25 °C for 48 h (for yeast enumeration)
and for 3 additional days for mold enumeration. Enterobacteriaceae
counts were enumerated on violet red bile dextrose agar
3
(Merck, Darmstadt, Germany) at 37 °C for 18 h. Detection of E. coliO157 and L. monocytogenes after enrichment was carried out as described
by Kotzekidou (2013).
2.5 การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาสำหรับการรักษาแต่ละสิบมะกอกปลอดเชื้อที่ถูกถอดออกจากการหมักดอง, เนื้อและวางลงในชั้นขอให้มี 100 มิลลิลิตรน้ำเกลือปลอดเชื้อ ขวดถูกเขย่าในศูนย์บ่มเพาะปั่นหมุนที่25 ° C (Lab เส้นโคจร-Environ Shaker, แล็บ-Line Instr. Melrose Park, IL, USA) ที่ 100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 1 นาทีเพื่อขจัด "ที่แนบมาคับ" microorgan- ISMS มะกอก ผิว จากนั้นมะกอกของแต่ละตัวอย่างถูกถอดออกระบายน้ำในอากาศ Laminar ชั้นโอ๊ยตู้หลุมภายใต้เงื่อนไขที่ผ่านการฆ่าเชื้อและ20 กรัมของเยื่อกระดาษถ่ายโอนไปยังถุงปลอดเชื้อที่มี 180 มิลลิลิตรเจือจางผ่านการฆ่าเชื้อที่มีโซเดียมคลอไรด์(8.5 g / l) และ Tween 80 (1 มล. / ลิตร) ส่วนผสมที่ถูกปั่น 60 s ใช้ Stomacher แล็บปั่น 400 (เอิร์ดแพทย์ลอนดอนสหราชอาณาจักร) จุลินทรีย์ที่เหลืออยู่หลังจากล้างได้รับการพิจารณาจะได้รับการ "ที่แนบมาอย่างยิ่ง" จุลินทรีย์ในมะกอกและนับเป็นโคโลนี/ กรัม. เจือจางที่เหมาะสมของกลุ่มตัวอย่างดังกล่าวข้างต้นได้จัดทำขึ้นผ่านการฆ่าเชื้อน้ำเปปโตน (1 กรัม / ลิตร) และเชื้อในที่ซ้ำกันในสื่อการเจริญเติบโตประมาณจุลินทรีย์นับ. แบคทีเรียกรดแลคติก (LAB) นับโดยการปลูกที่เหมาะสมเจือจางของกลุ่มตัวอย่างในMRSA เสริมด้วย 200 ppm cyclo- heximide และ 0.02% w / v น่านปลูกแบบไม่ใช้อากาศ(GasPak, BBL, ค็อก, MD) วันที่ 30 องศาเซลเซียส 72 ชั่วโมง ยีสต์และรานับบนอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่ง (PDA, เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) ปรับค่าพีเอช3.5 ด้วยกรดทาร์ทาริกบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง (สำหรับการแจงนับยีสต์) และเป็นเวลา 3 วันนับเพิ่มเติมสำหรับแม่พิมพ์ Enterobacteriaceae นับถูกระบุในน้ำดีสีแดงสีม่วง dextrose agar 3 (เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) ที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18 ชั่วโมง การตรวจหาเชื้อ E. coliO157 และ L. monocytogenes หลังจากที่เพิ่มคุณค่าได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดยKotzekidou (2013)
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.5
การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาสำหรับการรักษาแต่ละสิบมะกอกถูก aseptically ลบออกจากน้ำเกลือหมัก
, ระบาย และใส่เข้าไปในflถาม ( 100 มล.
น้ำเกลือปลอดเชื้อ ขวดสั่นสะเทือนใน rotary shaker incubator ที่
25 ° C ( Lab เส้นโคจรล้อมรอบปั่น Lab สาย INSTR . , Melrose Park , IL ,
USA ) ที่ 100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 1 นาทีเพื่อลบ " หลวมๆแนบ " microorgan -
ISMS เพื่อมะกอกผิวแล้วมะกอกของแต่ละตัวอย่างโดนเอาออก
ระบายในแบบอากาศflโอ้วตู้ , หลุมใต้
สภาพปลอดเชื้อและ 20 กรัมของกากไปฆ่าเชื้อถุงบรรจุ 180 มิลลิลิตรที่มี NaCl เจือจาง
ปลอดเชื้อ ( 8.5 กรัม / ลิตร ) และ Tween 80 ( / L 1 มิลลิลิตร ) ส่วนผสม
เป็นโฮโม 60 s โดยใช้แผงประดับหน้าอก Lab ปั่น 400
( ซีเวิร์ดทางการแพทย์ , ลอนดอน , UK ) จุลินทรีย์ที่เหลือหลังจากล้าง
ถือว่าเป็น " ขอติด " เชื้อจุลินทรีย์ในน้ำมันมะกอกและระบุว่า CFU / g .
ที่เหมาะสมวิธีการตัวอย่างข้างต้นเป็นการเตรียมน้ำหมัน
extract ( 1 กรัม / ลิตร ) และเชื้อซ้ำในสื่อในการประมาณการของจุลินทรีย์นับ
.
) แบคทีเรียแลกติกถูกนับโดยปลูกที่เหมาะสม
วิธีการตัวอย่างใน MRSA 200 ppm วง
เสริมด้วยheximide และ 0.02 % W / V น่าน
โตพ ( gaspak , BBL
Cockeysville , MD ) ที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง ยีสต์ และราถูกนับ
บนอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( Merck , PDA , ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) ปรับพีเอช 3.5 กับกรดทาร์ทาริก
ไปบ่มที่อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมงสำหรับการและยีสต์ )
3 วันเพิ่มเติมสำหรับการแม่พิมพ์ ผิดเพี้ยน
ครั้งถูกระบุในสีม่วงแดงน้ำดี dextrose agar
3
( เมอร์คดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี , ) ที่ 37 ° C 18 ชั่วโมง . colio157 ตรวจจับและ monocytogenes หลังจากการกระทำตามที่อธิบายไว้โดย kotzekidou
( 2013 )
การแปล กรุณารอสักครู่..