Protective Effect of Aqueous Crude

Protective Effect of Aqueous Crude Extract of Neem
(Azadirachta indica) Leaves on Plasmodium berghei-Induced
Renal Damage in Mice.

2. Materials and Methods
2.1. Crude Extract Preparation. The neem leaves were collected
from Kanchanaburi province, Thailand. The plants
were identified in the Faculty of Pharmacy, Payap University.
The leaves were cleaned and dried using hot air oven at 55∘C
for 6 h and then they were powdered. The powder was used
for the preparation of aqueous crude extract according to
the procedure previously described with some modification
[10]. The dried powders of neem leaves were boiled with
distilled water (plant :water = 1 : 20, w/v) for 6 h and then
filtered. The filtrate was evaporated to dryness in a vacuum
evaporator to yield the aqueous crude extract of neem leaf.
Before experiment, the neem leaf extract was dissolved in
20% Tween-80 at the doses of 500, 1,000, and 2,000mg/kg.
2.2. Mice. Female ICR mice obtained from the National
Laboratory Animal Center,Mahidol University,Thailand, 4–
6weeks old,weighing 25 to 30gwere used for the study.They
were given clean tap water and pelleted diet ad libitum. All
mouse procedures were approved by the Ethical Committee
on Animal Experimentation, Faculty ofMedical Technology,
Western University,Thailand.
2.3. Parasite Strain and Infection of Animals. Plasmodium
bergheiANKA(PbANKA) obtained fromDr.ChairatUthaipibull
from BIOTEC, NSTDA, Thailand, was used. Na¨ıve ICR
mice were inoculated with 1 × 107 parasitized erythrocytes
of PbANKA by intraperitoneal (IP) injection. Parasitemia
was daily monitored by microscopy of Giemsa stained thin
blood smear. Additionally, renal markers including BUN and
creatinine levels were also measured.
2.4. Measurements of Renal Markers. For determination of
renal damage, BUN and creatinine levels were used as
markers in this study. Blood was collected from tail vein of
mice into heparinized hematocrit tubes. Centrifugation was
then performed with 10,000 g for 10 min. Next, plasma was
collected into a new 1.5-mL tube for measurement of BUN
and creatinine using commercially available diagnostic kits
(BioSystems S. A. Costa Brava, Barcelona, Spain) according
to the manufacturer’s instructions.
2.5. Efficacy Test In Vivo. The standard 4-day suppressive
test against PbANKA infection in mice was employed [21].
Groups of na¨ıve ICR mice (5 mice of each) were inoculated
with 1 × 107 parasitized erythrocytes of PbANKA by IP
injection. They were subsequently treated with 500, 1,000,
and 2,000mg/kg of neem leaf extract orally by gavage twice
a day for 4 consecutive days. Normal mice treated with or
without 2,000mg/kg of extract were used as healthy controls,
while PbANKA infected mice treated with 20% Tween-80 were used as disease controls. On day 5 of experiment, blood
was collected for measurement of BUN and creatinine levels.
2.6. Statistical Analysis. The one-way ANOVA was used to
analyze and compare the results at a 95% confidence level.
Values of

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ป้องกันผลกระทบของน้ำดิบสารสกัดจากสะเดา(สะเดา) ใบไม้บน berghei เกิดพลาสโมเดียมความเสียหายไตในหนู2. วัสดุและวิธีการ2.1. ดิบแยกเตรียม ใบสะเดาถูกเก็บรวบรวมจากจังหวัดกาญจนบุรี ประเทศไทย พืชถูกระบุในคณะเภสัชศาสตร์ มหาวิทยาลัยพายัพใบถูกทำความสะอาด และแห้งโดยใช้เตาอบลมร้อนที่ 55∘Cสำหรับ 6 ชม.แล้วพวกเขามีผง ใช้ผงสำหรับการเตรียมสารละลายน้ำมันดิบแยกตามขั้นตอนที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ กับการปรับเปลี่ยนบางอย่าง[10] . ผงแห้งของใบสะเดาถูกต้มด้วยน้ำกลั่น (พืช: น้ำ = 1:20, w/v) สำหรับ 6 h แล้วกรองนั้น การกรองถูกระเหยให้แห้งในสุญญากาศระเหยให้ผลดิบละลายสารสกัดของใบสะเดาก่อนทดลอง สารสกัดจากใบสะเดาที่ละลายใน20% 80 แต่ที่ปริมาณของ 500, 1,000 และ 2, 000mg/kg2.2. หนู เมาส์ ICR หญิงที่ได้รับมาจากชาติห้องปฏิบัติการศูนย์สัตว์ มหาวิทยาลัยมหิดล ประเทศไทย 4 –6weeks เก่า น้ำหนัก 25 ถึง 30gwere ใช้สำหรับการศึกษา พวกเขาได้รับน้ำสะอาดและอาหารสัตว์ ad libitum ทั้งหมดตอนเมาส์ได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมในสัตว์ทดลอง ofMedical คณะเทคโนโลยีมหาวิทยาลัยเวสเทิร์น ประเทศไทย2.3. พยาธิสายพันธุ์และการติดเชื้อของสัตว์ พลาสโมเดียมfromDr.ChairatUthaipibull bergheiANKA(PbANKA) ที่ได้รับจาก BIOTEC สวทช., ประเทศไทย ใช้ Na¨ıve ICRหนูได้ inoculated กับเม็ดเลือดแดง 1 × 107 parasitizedของ PbANKA โดยการฉีด intraperitoneal (IP) Parasitemiaแก้ไขวันที่ตรวจสอบ ด้วยกล้องจุลทรรศน์ของ Giemsa ย้อมบางเลอะเปื้อนเลือด นอกจากนี้ เครื่องหมายไตรวมทั้งบุญ และนอกจากนี้ยังได้วัดระดับ creatinine2.4. การวัดของเครื่องหมายไต สำหรับการกำหนดระดับความเสียหาย BUN และ creatinine ที่ไตถูกใช้เป็นเครื่องหมายในการศึกษานี้ รวบรวมเลือดจากหลอดเลือดดำหางของหนูลงในหลอด heparinized hematocrit ถูกหมุนเหวี่ยงแล้ว ดำเนินการกับ 10,000 g 10 นาที ถัดไป เป็นพลาสม่ารวบรวมลงในหลอด 1.5 มิลลิลิตรใหม่วัดบุญและ creatinine ที่ใช้ในเชิงพาณิชย์มีชุดเครื่องมือวินิจฉัย(ศาสตร์เชิงชีวภาพ S. A. มาดริด บาร์เซโลนา สเปน) ตามให้คำแนะนำของผู้ผลิต2.5. ประสิทธิภาพการทดสอบใน Vivo มาตรฐาน 4-วัน suppressiveทดสอบกับเชื้อ PbANKA ในหนูแก้ไขส่วน [21]กลุ่มของ na¨ıve ICR ไมซ์ (mice 5 ของแต่ละ) ได้ inoculatedกับ 1 × 107 parasitized เม็ดเลือดแดงของ PbANKA โดย IPฉีด พวกเขาในเวลาต่อมาได้รับการรักษา ด้วย 500, 1,000และ 2, 000 มิลลิกรัม/กิโลกรัมของสะเดาใบแยกรับประทาน โดยทางหลอดอาหารสองครั้งวัน 4 วันติดต่อกัน ปกติหนูรักษาด้วย หรือโดย 2, 000 มิลลิกรัม/กิโลกรัมของสารสกัดถูกใช้เป็นตัวควบคุมเพื่อสุขภาพในขณะที่ติดเชื้อ PbANKA หนูรักษา ด้วย 20% ใช้ 80 แต่เป็นการควบคุมโรค ในวันที่ 5 ของการทดลอง เลือดถูกรวบรวมสำหรับวัดระดับ BUN และ creatinine2.6. สถิติวิเคราะห์ ใช้ ANOVA ทางเดียววิเคราะห์ และเปรียบเทียบผลที่ระดับความเชื่อมั่น 95%ค่า