Recent significant outlays has been

Recent significant outlays has been focused on the
development of rapid enzymatic procedures applicable
to drinking water with the objective of reaching results
within a working day’s schedule. Van Poucke and
Nelis (1999a) evaluated instrumental detection of
fluorescent signals for decreasing the time analysis
of an enzymatic membrane filtration test. They used a
laser-scanning device (ScanRDI1-Chemunex, Ivrysur-
Seine, Paris, France) which detects and enumerates
low numbers of fluorescently labeled cells by
means of a solid phase cytometry technique (Brailsford,
1996). This system offers a very low quantitative
direct detection limit allowing the detection of
between 1 and 1000 fluorescently labeled cells distributed
on a membrane. Using this system, Van
Poucke and Nelis (1999b) proposed a test allowing
the detection of E. coli and TC within 3.5 h, in
principle also including metabolically active but nonculturable
cells. The principle of the method for E. coli
cells was as follows (Van Poucke and Nelis, 1999b,
2000a): E. coli present in drinking water samples are
retained on a 0.4-mm pore-size filter after vacuum
filtration. The trapped E. coli cells are treated with
reagents to induce the enzyme b-D-glucuronidase (3 h
at 37 C) and label (0.5 h at 0 C) the induced cells.
Only the b-D-glucuronidase of viable E. coli can be
induced and therefore only these bacteria cleave the
non-fluorescent substrate (fluorescein-di-b-D-glucuronide),
retaining the fluorescent end-product inside the
cell. The fluorescence of a single cell or a microcolony
(i.e. a fluorescent event) is detected by the
ScanRDI1 device: a complete laser scanning of the
membrane allows enumeration of fluorescent cells in 3
min. A visual validation of fluorescent events is
performed by transferring the membrane to an epifluorescence
microscope fitted with a motorized stage controlled by the ScanRDI1 software. The procedure
for detection of TC is similar, but fluorescein-di-b-Dgalactoside
is used as the substrate, allowing the
detection of b-D galactosidase (Van Poucke and Nelis,
2000b).
Application of the proposed methods for E. coli and
TC to naturally contaminated and uncontaminated well
water, surface water and tap water samples has indicated
more than 90% E. coli and more than 92% TC
agreement and equivalence with reference methods
including mFC agar (E. coli), m-Endo agar (TC) and
Chromocult Coliform agar (E. coli and TC) (Van
Poucke and Nelis, 1999a,b, 2000a,b). Calculated
against the latter medium, the false negative rates were
3% for E. coli and 3.2% for TC. In a limited number of
samples, low numbers (1–3) of the target organisms
were detected by laser scanning and not by conventional
plate counts. If these results are confirmed in the
future, this method will surely be of interest due to the
short time required to analyze a water sample.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ล่าสุด outlays ที่สำคัญได้เน้นการพัฒนากระบวนที่เอนไซม์ในระบบอย่างรวดเร็วใช้ได้น้ำดื่มมีวัตถุประสงค์ถึงผลลัพธ์ภายในกำหนดการของวันทำงาน Poucke รถตู้ และตรวจสอบเครื่องมือประเมิน Nelis (1999a)สัญญาณฟลูออเรสเซนต์สำหรับการวิเคราะห์เวลาที่ลดลงเรื่อย ๆของการทดสอบกรองเมมเบรนที่เอนไซม์ในระบบ พวกเขาใช้เป็นอุปกรณ์เลเซอร์สแกน (ScanRDI1 Chemunex, Ivrysur-แซน ปารีส ฝรั่งเศส) ที่ตรวจพบ และระบุหมายเลขต่ำสุดของเซลล์ fluorescently ป้ายโดยวิธีการเทคนิคเซลล์เฟสของแข็ง (Brailsfordปี 1996) . ระบบนี้มีต่ำมากเชิงปริมาณตรงตรวจวงเงินให้การตรวจพบระหว่าง 1 ถึง 1000 fluorescently ป้ายเซลล์กระจายในเมมเบรน ใช้ระบบนี้ รถตู้Poucke Nelis (1999b) การนำเสนอและทดสอบให้การตรวจพบ E. coli และ TC ภายใน 3.5 h ในนอกจากนี้ยัง รวมถึง metabolically nonculturable แต่การใช้งานหลักเซลล์ หลักวิธีการสำหรับ E. coliเซลล์มีดังนี้ (Van Poucke และ Nelis, 1999b2000a): E. coli ในน้ำดื่มอย่างมีรักษาตัวกรองรูพรุนขนาด 0.4 มม.หลังจากดูดกรอง รับการรักษาด้วยเซลล์ติดอยู่ E. colireagents ชวนเอนไซม์ b-D-glucuronidase (3 hที่ 37 C) และป้ายชื่อ (0.5 h ที่ 0 C) เซลล์อาจเฉพาะ b-D-glucuronidase ของได้ E. coli ได้เกิด และ cleave เฉพาะแบคทีเรียเหล่านี้ดังนั้น การฟลูออเรสเซนต์ไม่ใช่พื้นผิว (fluorescein-ดิ-b-D-glucuronide),การรักษาสิ้นสุดผลิตภัณฑ์เรืองแสงภายในเซลล์ Fluorescence เซลล์เดียวหรือ microcolony(เช่นการเรืองแสงมาตรวจจับการอุปกรณ์ ScanRDI1: สแกนเลเซอร์ที่สมบูรณ์แบบของการเมมเบรนอนุญาตให้การแจงนับของเซลล์เรืองแสงใน 3นาที ตรวจสอบภาพเหตุการณ์ที่เรืองแสงได้ดำเนินการ โดยโอนเมมเบรนมี epifluorescenceกล้องจุลทรรศน์อาบขั้นเครื่องควบคุม โดยซอฟต์แวร์ ScanRDI1 ขั้นตอนการตรวจ TC เป็นคล้าย fluorescein-ดิบี-Dgalactosideใช้เป็นพื้นผิว ช่วยให้การตรวจ galactosidase b-D (Van Poucke และ Nelis2000b)ใช้วิธีการนำเสนอสำหรับ E. coli และTC เพื่อดื่ม และปนเปื้อนตามธรรมชาติดีน้ำ พื้นผิวตัวอย่างน้ำและน้ำประปาได้ระบุมากกว่า 90% E. coli และมากกว่า 92% TCข้อตกลงและเทียบเท่ากับวิธีการอ้างอิงรวม mFC agar (E. coli), m-Endo agar (TC) และโคลิฟอร์ม Chromocult agar (E. coli และ TC) (รถตู้Poucke และ Nelis, 1999a บี 2000a, b) คำนวณกับกลางหลัง ราคาค่าลบไม่ได้3% สำหรับ E. coli และ 3.2% TC ในจำนวนจำกัดตัวอย่าง ตัวเลขต่ำสุด (1-3) ของสิ่งมีชีวิตเป้าหมายตรวจพบ โดยการสแกนเลเซอร์ และไม่ธรรมดาจานไว้ ถ้าผลลัพธ์เหล่านี้ได้รับการยืนยันในการในอนาคต วิธีการนี้จะน่าสนใจเนื่องในเวลาสั้น ๆ ที่ใช้ในการวิเคราะห์ตัวอย่างน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ค่าใช้จ่ายอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเร็ว ๆ
นี้ได้รับการมุ่งเน้นไปที่การพัฒนาของขั้นตอนการบังคับเอนไซม์อย่างรวดเร็วไปในน้ำดื่มโดยมีวัตถุประสงค์เพื่อผลถึงการภายในเวลาที่วันทำงานของ Van Poucke และNelis (1999a) การประเมินผลการตรวจสอบการใช้เครื่องมือของสัญญาณเรืองแสงการลดการวิเคราะห์เวลาของการทดสอบกรองเมมเบรนของเอนไซม์ พวกเขาใช้อุปกรณ์เลเซอร์สแกน (ScanRDI1-Chemunex, Ivrysur- Seine, ปารีส, ฝรั่งเศส) ซึ่งตรวจสอบและระบุตัวเลขที่ต่ำของเซลล์ที่มีข้อความfluorescently โดยวิธีการของของแข็งภูมิคุ้มกันเทคนิค (Brailsford, 1996) ระบบนี้มีปริมาณที่ต่ำมากขีด จำกัด ของการตรวจสอบโดยตรงช่วยให้การตรวจสอบของระหว่าง1 และ 1,000 เซลล์ที่มีข้อความ fluorescently กระจายในเมมเบรน การใช้ระบบนี้ Van Poucke และ Nelis (1999b) ได้เสนอการทดสอบที่ช่วยให้การตรวจสอบของเชื้อE. coli และ TC ภายใน 3.5 ชั่วโมงในหลักการรวมทั้งยังใช้งานได้แต่เมตาบอลิ nonculturable เซลล์ หลักการของวิธีการสำหรับเชื้อ E. coli เซลล์เป็นดังนี้ (Van Poucke และ Nelis, 1999b, 2000a): อีโคไลอยู่ในตัวอย่างน้ำดื่มจะถูกเก็บไว้บน0.4 มมกรองขนาดรูขุมขนหลังจากสูญญากาศการกรอง ติดเซล E.coli รับการรักษาด้วยสารเคมีที่จะทำให้เกิดเอนไซม์BD-glucuronidase (3 ชั่วโมงที่37 องศาเซลเซียส) และฉลาก (0.5 ชั่วโมงที่ 0 องศาเซลเซียส) เซลล์เกิด. เฉพาะ BD-glucuronidase ของอีโคไลที่ทำงานสามารถ ได้รับการเหนี่ยวนำและดังนั้นจึงมีเพียงแบคทีเรียเหล่านี้แยกพื้นผิวที่ไม่เรืองแสง(fluorescein-di-BD-glucuronide) รักษาเรืองแสงแบบ end-สินค้าภายในเซลล์ การเรืองแสงของเซลล์เดียวหรือ microcolony (เช่นเหตุการณ์ที่เรืองแสง) จะตรวจพบโดยอุปกรณ์ScanRDI1: สแกนเลเซอร์ที่สมบูรณ์ของเมมเบรนจะช่วยให้การแจงนับของเซลล์เรืองแสงใน3 นาที การตรวจสอบภาพของเหตุการณ์ที่เรืองแสงจะดำเนินการโดยการโอนเยื่อไปยัง epifluorescence กล้องจุลทรรศน์ติดตั้งเวทีมอเตอร์ควบคุมโดยซอฟต์แวร์ ScanRDI1 ขั้นตอนในการตรวจหา TC จะคล้ายกัน แต่ fluorescein-di-B-Dgalactoside ใช้เป็นสารตั้งต้นที่ช่วยให้การตรวจสอบของ BD galactosidase (Van Poucke และ Nelis, 2000b). การประยุกต์ใช้วิธีการที่นำเสนอสำหรับเชื้อ E. coli และTC ไป ที่ปนเปื้อนตามธรรมชาติและความโสโครกน้ำ, น้ำผิวดินและแตะตัวอย่างน้ำได้ชี้ให้เห็นมากกว่า 90% เชื้อ E. coli และอื่น ๆ กว่า 92% TC ข้อตกลงและความเท่าเทียมกันด้วยวิธีการอ้างอิงรวมทั้งเอ็มเอฟวุ้น (เชื้อ E. coli), M-Endo วุ้น (TC) และ Chromocult โคลิฟอร์มวุ้น (เชื้อ E. coli และ TC) (Van Poucke และ Nelis, 1999a, B, 2000a b) จากการคำนวณกับกลางหลังอัตราการลบเท็จเป็น3% สำหรับเชื้อ E. coli และ 3.2% สำหรับ TC ในจำนวนที่ จำกัด ของตัวอย่างตัวเลขที่ต่ำ(1-3) ของสิ่งมีชีวิตเป้าหมายถูกตรวจพบโดยการสแกนเลเซอร์และไม่ได้โดยทั่วไปนับจาน ถ้าผลลัพธ์เหล่านี้ได้รับการยืนยันในอนาคตวิธีการนี้ก็จะเป็นที่น่าสนใจเนื่องจากการช่วงเวลาสั้นๆ ที่จำเป็นในการวิเคราะห์ตัวอย่างน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ล่าสุดที่สำคัญค่าใช้จ่ายได้มุ่งเน้นการพัฒนาอย่างรวดเร็วของกระบวนการใช้เอนไซม์
เพื่อดื่มน้ำ ด้วยวัตถุประสงค์ของการเข้าถึงผล
ภายในตารางเวลาในการทำงานทุกวัน รถตู้ poucke และ
nelis ( 1999a ) ประเมินเครื่องมือตรวจจับสัญญาณฟลูออเรสเซนต์เพื่อลดเวลา

ของการวิเคราะห์เอนไซม์เยื่อกรองแบบ พวกเขาใช้
เลเซอร์สแกนอุปกรณ์ ( scanrdi1 CHEMUNEX ivrysur -
, อวน , ปารีส , ฝรั่งเศส ) ซึ่งตรวจจับและระบุหมายเลขของ fluorescently ติดป้ายเซลล์ต่ำ

ความหมายของของแข็งโดยเทคนิคเฟส ( เบรลส์เฟิร์ด (
, 1996 ) ระบบนี้มีปริมาณต่ำมาก
ตรงขีดจำกัดให้ตรวจหา
ระหว่าง 1 ถึง 1000 fluorescently ติดป้ายเซลล์กระจาย
บนเยื่อแผ่น การใช้ระบบนี้และรถตู้
poucke nelis ( 1999b ) เสนอให้
ทดสอบตรวจหาเชื้ออีโคไลและ TC ภายใน 3.5 H ,
หลักยังรวมถึง metabolically ปราดเปรียวแต่ nonculturable
เซลล์ หลักการของวิธีการเซลล์ E . coli
เป็นดังนี้ ( รถตู้ poucke และ nelis 1999b
, , ประกอบ ) : E . coli ปัจจุบันในการดื่มน้ำเป็น
เก็บไว้ใน 0.4-mm รูขุมขนขนาดกรองหลังจากการกรองสูญญากาศ

ติด Eเซลล์จะได้รับการรักษาด้วยสารเคมีจะกระตุ้นเอนไซม์ b-d-glucuronidase
3 H
37  C ) และป้าย ( 0.5 ) ที่ 0  C ) การเหนี่ยวนำเซลล์ .
เพียง b-d-glucuronidase ของ E . coli ได้ชักนำเท่านั้นจึงสามารถ

ไม่เรืองแสงเหล่านี้แบคทีเรียติดพื้นผิว ( fluorescein-di-b-d-glucuronide
รักษา ) สารเรืองแสงผลิตภัณฑ์สิ้นสุดภายใน
เซลล์เรืองแสงในเซลล์เดียวหรือ microcolony
( เช่นเหตุการณ์เรืองแสง ) ถูกตรวจพบโดย
scanrdi1 อุปกรณ์ : สมบูรณ์สแกนเลเซอร์ของเยื่อเซลล์เรืองแสงช่วยแจง
3
มินตรวจสอบภาพเหตุการณ์ Fluorescent
ขับร้องโดยโอนเยื่อเป็น epifluorescence
แบบติดตั้งกับรถเวที ควบคุมโดย scanrdi1 ซอฟต์แวร์