2.4. Enzyme activity analysis2.4.1.

2.4. Enzyme activity analysis
2.4.1. Fructose-1,6-bisphosphatase activities
To measure the activity of fructose-1.6-bisphosphatase (FBPase; EC
3.1.3.11), a frozen sample of soft bodywas homogenized (dilution 1/10)
in ice-cold buffer (85 mM imidazole-HCl, pH 7.7, 5 mM MgCl2,0.5mM
NADP, 12 mM 2-mercaptoethanol, 0.05 mM fructose-1,6-bisphosphate,
2.5 U ml
−1
phosphate glucose isomerase, 0.48 U ml
−1
G6PDH). The
homogenate was centrifuged at 20,000×g for 30 min at 4 °C (Metón
et al.,1999, 2003). Enzyme assaywas performed as previously described
(Foste and Moon, 1985; Bonamusa et al., 1992) using a Boi-Tek µ-Quart
Microplate Spectrophotometer.
2.4.2. Glucose-6-phosphate dehydrogenase activities
To analyze the glucose-6-phosphate dehydrogenase activity
(G6PD; EC 1.1.1.49), a frozen sample of soft body was homogenized
(dilution 1/10) in ice-cold buffer (8 mM imidazole-HCl, pH 7.7, 5 mM
MgCl2, 1 mM NADP and 1 mM glucose-6-phosphate). The homoge-
nate was centrifuged at 20,000×g for 30 min at 4 °C (Metón et al.,
1999, 2003). The assay was performed as previously described (Foste
and Moon, 1985; Bonamusa et al., 1992) using a Boi-Tek µ-Quart
Microplate Spectrophotometer.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์2.4.1. กิจกรรมที่ฟรักโทส-1,6-bisphosphataseการวัดกิจกรรมของฟรักโทส-1.6-bisphosphatase (FBPase EC3.1.3.11), ตัวอย่างน้ำแข็งนุ่ม bodywas homogenized เป็นกลุ่ม (เจือจาง 1/10)ในบัฟเฟอร์ฉ่ำ (85 มม.อิมิดาโซล-HCl, pH 7.7, MgCl2, 0.5 มม. 5 มม.NADP, 12 มม. 2-mercaptoethanol, 0.05 mM ฟรักโทส-1,6-bisphosphate2.5 U ml−1ฟอสเฟตน้ำตาลกลูโคสไอโซเมอเรส 0.48 U ml−1G6PDH) ที่homogenate ถูก centrifuged ที่ 20, 000 ซื้อ g ใน 30 นาทีที่ 4 ° C (Metónร้อยเอ็ด al., 1999, 2003) เอนไซม์ assaywas ทำอธิบายไว้ก่อนหน้านี้(Foste และมูน 1985 Bonamusa et al., 1992) โดยใช้เขต Boi-Tek ควอร์ตเครื่องทดสอบกรดด่าง Microplate2.4.2 กิจกรรมที่กลูโคส-6-ฟอสเฟต dehydrogenaseการวิเคราะห์กิจกรรม dehydrogenase กลูโคส-6-ฟอสเฟต(G6PD EC 1.1.1.49), ตัวอย่างตัวอ่อนแช่แข็งถูก homogenized เป็นกลุ่ม(เจือจาง 1/10) ในบัฟเฟอร์ฉ่ำ (8 มม.อิมิดาโซล-HCl, pH 7.7, 5 มม.MgCl2, NADP 1 มม.และ 1 มม.กลูโคส-6-ฟอสเฟต) Homoge-เนตรมี centrifuged ที่ 20, 000 ซื้อ g ใน 30 นาทีที่ 4 ° C (Metón et al.,1999, 2003) ทำการทดสอบที่เป็นการอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Fosteและดวง จันทร์ 1985 Bonamusa et al., 1992) โดยใช้เขต Boi-Tek ควอร์ตเครื่องทดสอบกรดด่าง Microplate

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์
2.4.1 กิจกรรมฟรักโทส-1,6-bisphosphatase
การวัดกิจกรรมของฟรุกโตส-1.6 bisphosphatase (FBPase; EC
3.1.3.11) เป็นตัวอย่างของการแช่แข็ง bodywas นุ่มปั่น (เจือจาง 1/10)
ในบัฟเฟอร์เย็น (85 มิลลิ imidazole- HCl, pH 7.7, 5 มิลลิ MgCl2,0.5mM
NADP 12 มิลลิ 2 mercaptoethanol, 0.05 มิลลิฟรุกโตส-1,6-bisphosphate,
2.5 มล. U
-1
ฟอสเฟต isomerase กลูโคส 0.48 U มล.
-1
G6PDH)
homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 20,000 ×กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่ 4 ° C (Meton
et al., 1999, 2003) เอนไซม์ assaywas ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า
(Foste และดวงจันทร์, 1985. Bonamusa et al, 1992) โดยใช้บีโอไอเต็กμ-Quart
ไมโคร Spectrophotometer.
2.4.2 กิจกรรม dehydrogenase กลูโคส -6-
ฟอสเฟตเพื่อวิเคราะห์กิจกรรมdehydrogenase กลูโคส -6- ฟอสเฟต
(G6PD; EC 1.1.1.49) ตัวอย่างแช่แข็งของตัวอ่อนได้รับการปั่น
(เจือจาง 1/10) ในบัฟเฟอร์เย็น (8 มิลลิ imidazole- HCl, pH 7.7, 5 มิลลิ
MgCl2 1 มิลลิ NADP 1 มิลลิกลูโคส -6- ฟอสเฟต) ลักษณะเหมือนกันเนทได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 20,000 ×กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่ 4 ° C (Meton et al., 1999, 2003) ผลการวิเคราะห์ที่ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Foste และดวงจันทร์, 1985. Bonamusa et al, 1992) โดยใช้บีโอไอเต็กμ-Quart ไมโคร Spectrophotometer

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . fructose-1,6-bisphosphatase กิจกรรม
วัดกิจกรรมของ fructose-1.6-bisphosphatase ( fbpase ; EC
3.1.3.11 ) แช่แข็งตัวอย่าง bodywas นุ่มบด ( เจือจาง 1 / 10 )
น้ำแข็งในบัฟเฟอร์เย็น ( 85 มม. อิมิดาโซลกรดไฮโดรคลอริก pH 7.7 , 5 มม. mgcl2,0.5mm
nadp 12 mm อย่างเดียว , 0.05 มม. fructose-1,6-bisphosphate
U
− , 2.5 มล. ฟอสเฟตกลูโคสไอโซเมอเรส 1
, u +
.− 1
g6pdh )
แยกเป็นระดับที่ 20 , 000 × G สำหรับ 30 นาทีที่ 4 ° C ( เจอเลออง
et al . , 1999 , 2003 ) เอนไซม์ assaywas ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
( foste และดวงจันทร์ , 1985 ; bonamusa et al . , 1992 ) โดยใช้เทคµบีโอไอ - Quart เครื่องพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
.
2.4.2 . กิจกรรมดี glucose-6-phosphate
วิเคราะห์ glucose-6-phosphate dehydrogenase กิจกรรม
( G6PD ; EC 1.1.1.49 )ตัวอย่างของแช่แข็งเนื้อนุ่มถูกบด
( ( 1 / 10 ) ในบัฟเฟอร์น้ำแข็งเย็น ( 8 มม. อิมิดาโซลกรดไฮโดรคลอริก pH 7.7 , 5 มม. ชุด nadp
, 1 มม. และ 1 มิลลิเมตร glucose-6-phosphate ) การ homoge -
เนทที่ระดับที่ 20 , 000 × G สำหรับ 30 นาทีที่ 4 ° C ( เจอเลออง et al . ,
1999 , 2003 ) ( กำลังดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( foste
และดวงจันทร์ , 1985 ; bonamusa et al . , 1992 ) โดยใช้เทคµวอร์
- บีโอไอพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยวัสดุ