Lipid peroxidation by Ferric thiocy

Lipid peroxidation by Ferric thiocyanate method (Mistuda et al., 1996)
Cell membrane is more susceptible to free radicals that reacts rapidly with the unsaturated fatty acids (like linoleic acid and arachidonic acid) embedded in the membrane resulting in lipid peroxidation. In this assay, linoleic acid is used as the model system for measuring the levels of lipid peroxidation. This was used to determine the amount of peroxide formed during the lipid peroxidation, in which peroxide will react with ferrous chloride and form ferric ions. Ferric ions will then unite with ammonium thiocyanate and produce a ferric thiocyanate complex whose colour is measured at 500nm. A mixture containing 10 ml of 0.05 M-phosphate buffer (pH 7.0), 5.9ml of water, 0.1 ml of plant extract and 4 ml of 2.5% linoleic acid in absolute ethanol was placed in a vial with a screw cap and then placedin a dark oven at 40 degree centigrade overnight. To 0.1ml of this incubation mixture, added 9.7ml of 75% ethanol and 0.1 ml of 0.02M ferrous chloride in 3.5% HCl. Add 0.1ml of 30% ammonium thiocyanate, precisely 3 minutes after the addition of ferrous chloride. The absorbance of the red colour was measured at 500nm. A mixture without the plant sample was used as the negative control. (Note: Instead of plant extract, use 0.1 ml of water/ethanol/ petroleum ether as control).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Peroxidation ของไขมัน โดยวิธี thiocyanate เฟอร์ (Mistuda et al., 1996)
เซลล์เมมเบรนจะอ่อนแอมากขึ้นจากอนุมูลอิสระที่ทำปฏิกิริยากับกรดไขมันในระดับที่สม (เช่นกรด linoleic และกรด arachidonic) อย่างรวดเร็วในเมมเบรนเกิด peroxidation ของไขมัน ในการทดสอบนี้ กรด linoleic ใช้เป็นระบบจำลองสำหรับวัดระดับของ peroxidation ของไขมัน นี้ถูกใช้เพื่อกำหนดจำนวนของเปอร์ออกไซด์ที่เกิดขึ้นระหว่าง peroxidation ไขมัน เปอร์ออกไซด์ซึ่งจะทำปฏิกิริยากับคลอไรด์เหล็ก และประจุเฟอร์ฟอร์ม ประจุเฟอร์แล้วจะดามกับ thiocyanate แอมโมเนีย และผลิตเป็นเฟอร์ thiocyanate ซับซ้อนสีซึ่งเป็นวัดที่ 500nm ส่วนผสมที่ประกอบด้วย 10 ml 0.05 M-ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0), 5.9ml น้ำ 01 ml ของโรงงานสกัด และ ml 4 ของ 2.5% กรด linoleic ในเอทานอลนอนถูกวางในคอนแทคกับฝาครอบสกรูแล้ว placedin เตาอบเข้มที่ 40 ดีกรีเซนติเกรดค้างคืน 0.1 มล.ของผสมนี้คณะทันตแพทยศาสตร์ เพิ่ม 9.7ml 75% เอทานอล และ 0.1 มล.ของ 0.02M เหล็กคลอไรด์ 3.5% HCl เพิ่ม 0.1ml ของ 30% แอมโมเนีย thiocyanate แม่นยำ 3 นาทีหลังจากการเพิ่มเหล็กคลอไรด์ มีวัด absorbance ของสีแดงที่ 500nm ส่วนผสมไม่ มีตัวอย่างพืชถูกใช้เป็นตัวควบคุมค่าลบ (หมายเหตุ: แทนพืชแยก ใช้ 0.1 ml ของน้ำ/เอทานอล/ปิโตรเลียมอีเทอร์เป็นตัวควบคุม)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เกิด lipid peroxidation โดยเฟอร์ริกวิธี thiocyanate (Mistuda et al., 1996)
เยื่อหุ้มเซลล์เป็นอ่อนแอมากขึ้นเพื่ออนุมูลอิสระที่ทำปฏิกิริยาอย่างรวดเร็วด้วยกรดไขมันไม่อิ่มตัว (เช่นกรดไลโนเลอิกและกรด arachidonic) ที่ฝังอยู่ในเยื่อหุ้มเซลล์ที่เกิดขึ้นใน lipid peroxidation ในการทดลองนี้กรดไลโนเลอิกจะใช้เป็นระบบรูปแบบสำหรับการวัดระดับของ lipid peroxidation นี้ถูกใช้ในการกำหนดปริมาณของเปอร์ออกไซด์ที่เกิดขึ้นในระหว่างการเกิด lipid peroxidation ซึ่งในเปอร์ออกไซด์จะทำปฏิกิริยากับคลอไรด์เหล็กและรูปแบบอิออนธาตุเหล็ก เฟอร์ริกไอออนจะรวมกันกับแอมโมเนียม thiocyanate และผลิตที่ซับซ้อน thiocyanate ธาตุเหล็กที่มีสีที่เป็นวัดที่ 500nm ส่วนผสมที่มี 10 ml 0.05 บัฟเฟอร์ M-ฟอสเฟต (pH 7.0), 5.9ml น้ำ 0.1 มิลลิลิตรของสารสกัดจากพืชและ 4 มล 2.5% กรดไลโนเลเอทานอลที่แน่นอนอยู่ในขวดที่มีฝาเกลียวแล้ว placedin เตาอบมืดที่ 40 องศาเซนติเกรดในชั่วข้ามคืน เพื่อ 0.1ml ส่วนผสมบ่มนี้เพิ่ม 9.7ml 75% เอทานอลและ 0.1 มิลลิลิตร 0.02M คลอไรด์เหล็ก 3.5% HCl เพิ่ม 0.1ml 30% thiocyanate แอมโมเนียมแม่นยำ 3 นาทีหลังจากที่การเพิ่มขึ้นของคลอไรด์เหล็ก การดูดกลืนแสงของสีแดงที่ได้รับการวัดที่ 500nm ส่วนผสมโดยไม่ต้องตัวอย่างพืชที่ใช้เป็นที่ควบคุมเชิงลบ (หมายเหตุ: แทนของสารสกัดจากพืชที่ใช้ 0.1 มิลลิลิตรอีเทอร์น้ำ / เอทานอล / ปิโตรเลียมเป็นตัวควบคุม)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเกิด lipid peroxidation โดยใช้ไทโอไซยาเนตเฟอร์ ( mistuda et al . , 1996 )
เยื่อหุ้มเซลล์เป็นอ่อนแอมากขึ้นเพื่อการเกิดอนุมูลอิสระที่ตอบสนองอย่างรวดเร็ว ด้วยกรดไขมันไม่อิ่มตัว ( เช่นกรดไลโนเลนิก และกรดอะราคิโดนิก ) ที่ฝังตัวในเยื่อที่เกิด lipid peroxidation ในการทดสอบนี้ กรดไขมันที่ใช้เป็นแบบจำลองระบบวัดระดับของ lipid peroxidationนี้ถูกใช้เพื่อกำหนดปริมาณเปอร์ออกไซด์ที่เกิดขึ้นในระหว่างการเกิด lipid peroxidation ซึ่งในเปอร์ออกไซด์จะทำปฏิกิริยากับโลหะและเฟอร์ริคคลอไรด์ไอออนรูปแบบ . เฟอริกไอออนแอมโมเนียมไทโอไซยาเนต และจะรวมกับการผลิตเฟอร์ Thiocyanate ซับซ้อนที่มีสีเป็นวัดที่ 500nm . ส่วนผสมที่ประกอบด้วย 10 มิลลิลิตร 0.05 m-phosphate บัฟเฟอร์ pH 7.0 ) , 5.9ml น้ำ 01 มิลลิลิตร สารสกัดจากพืชและ 4 ml 2.5% กรด linoleic ในสัมบูรณ์เอทานอลอยู่ในขวดที่มีฝาเกลียวแล้ว placedin เตาอบมืดที่อุณหภูมิ 40 องศาเซนติเกรดค้างคืน เพื่อ 0.1ml นี้บ่มส่วนผสมเพิ่ม 9.7ml เอทานอล 75% และ 0.1 มิลลิลิตร 0.02m เฟอร์รัสคลอไรด์ใน 3.5 % HCL . เพิ่ม 0.1ml 30% แอมโมเนียมไทโอไซยาเนต แน่นอน 3 นาทีหลังจากเติมเฟอร์รัสคลอไรด์ส่วนค่าสี แดง สี เป็นวัดที่ 500nm . ส่วนผสมปราศจากพืชตัวอย่างที่ใช้เป็นตัวควบคุมลบ ( หมายเหตุ : แทนที่จะใช้สารสกัดจากพืช , 0.1 มิลลิลิตรเอทานอล / น้ำ / ปิโตรเลียมอีเทอร์เป็นตัวควบคุม )