Shaking Flasks ExperimentPreculture

Shaking Flasks Experiment
Precultures were prepared from solid agar medium and
incubated for overnight at 30 °C and 180 rpm. Studies on PHA production were conducted in sterilized 250 mL
Erlenmeyer flasks with 50 mL of mineral culture medium for
the others substrates, inoculated with 1 mL of bacteria from a
seed culture and incubated at 30 °C with shaking at 180 rpm. The fatty acids were added as sole carbon source in each test
flask according to the text above. After a preliminary
screening at 48 h to analyze dry biomass and PHA
accumulation, a proper timing of fermentation was established at 24, 48, 72 and 96 h; the process was monitored
by Nile Red fluorescent dye to check the PHA production. The cells were harvested by centrifugation at 5000 rpm, for 20 min, at 20 °C (Beckman Coulter, avanti J-HC), washed with saline solution at 0.9 % and lyophilized overnight. (Virtis, benchtop 2K). All the assays were done in triplicate

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เขย่าขวดทดลองPrecultures ถูกจัดทำขึ้นจากวุ้นแข็งปานกลาง และได้รับการกก 30 ° C ถึง 180 รอบต่อนาที มีการดำเนินการศึกษาการผลิตผาฆ่าเชื้อ 250 mlขวด Erlenmeyer กับ 50 มล.ของสารแร่สำหรับอื่น ๆ พื้นผิว inoculated กับ 1 มิลลิลิตรของแบคทีเรียจากการเมล็ดวัฒนธรรม และได้รับการกกที่ 30 ° C ด้วยการสั่นที่ 180 รอบต่อนาที เพิ่มกรดไขมันเป็นแหล่งคาร์บอนแต่เพียงผู้เดียวในแต่ละการทดสอบขวดตามข้อความข้างต้น หลังจากเบื้องต้นคัดกรองเวลา 48 ชั่วโมงเพื่อวิเคราะห์ชีวมวลแห้งและผาสะสม เวลาที่เหมาะสมของการหมักก่อเวลา 24, 48, 72 และ 96 h กระบวนการแก้ไขตรวจสอบโดยแม่น้ำไนล์สีแดงย้อมฟลูออเรสเซนต์เพื่อตรวจสอบการผลิตผา เซลล์ถูกเก็บเกี่ยว โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 5000 rpm, 20 นาที ที่อุณหภูมิ 20 ° C (Beckman Coulter งติ J HC), ล้าง ด้วยเกลือ 0.9% และ lyophilized ค้างคืน (Virtis แบบตั้งโต๊ะ 2K) ทำทั้งหมด assays ลข้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เขย่า Flasks ทดลอง
Precultures ที่เตรียมจากกลางวุ้นของแข็งและ
บ่มเป็นเวลาชั่วข้ามคืนวันที่ 30 องศาเซลเซียสและ 180 รอบต่อนาที การศึกษาเกี่ยวกับการผลิต PHA ได้ดำเนินการในการฆ่าเชื้อ 250 มิลลิลิตร
ขวด Erlenmeyer กับ 50 มลของกลางวัฒนธรรมแร่สำหรับ
พื้นผิวอื่น ๆ , เชื้อด้วย 1 มิลลิลิตรของเชื้อแบคทีเรียจาก
วัฒนธรรมเมล็ดพันธุ์และการบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเขย่าที่ 180 รอบต่อนาที กรดไขมันที่ถูกเพิ่มเป็นแหล่งคาร์บอน แต่เพียงผู้เดียวในการทดสอบแต่ละ
ขวดตามข้อความข้างต้น หลังจากเบื้องต้น
การตรวจคัดกรองที่เวลา 48 ชั่วโมงในการวิเคราะห์ชีวมวลแห้งและ PHA
สะสมเป็นระยะเวลาที่เหมาะสมของการหมักได้ก่อตั้งขึ้นที่ 24, 48, 72 และ 96 เอช; เป็นกระบวนการที่มีการตรวจสอบ
โดยไนล์แดงเรืองแสงสีย้อมเพื่อตรวจสอบการผลิต PHA เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 5000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีที่ 20 ° C (Beckman Coulter, Avanti J-HC), การล้างด้วยน้ำเกลือที่ 0.9% และแห้งในชั่วข้ามคืน (Virtis, benchtop 2K) ตรวจทั้งหมดถูกทำในเพิ่มขึ้นสามเท่า