and assayed as described previously

and assayed as described previously (Tsujii et al. 1996). In
brief, 100 ll supernatant of SE strain was added in 50 mM
phosphate buffer at pH 6.7 and incubated at 37C for
30 min. The enzymatic reaction was initiated by adding
0.5 mM p-nitrophenyl-N-acetyl-b-D-glucosaminide and
incubated for 1 h at 37C. The reaction was stopped by
adding three volumes of 1 M Na2CO3. Enzymatic activity
was quantified by measuring the absorption at 405 nm and
compared with standard curve of p-nitrophenol. One unit of
hydrolase activity is defined as amount of enzyme converting
1.0 lmole of p-nitrophenyl-N-acetyl-b-D-glucosaminide
to p-nitrophenol per min under the assay conditions.
With regard to AHL-lactonases, primers from the literature
(Lee et al. 2002) were used to screen for the presence
of aiiA homologue gene. Genomic DNA was isolated from
B. thuringiensis using the standard method described by
Sambrook and Russell (2001). The aiiA homolog gene was
amplified using chromosomal DNA as a template and the
oligonucleotide primers AIF (50
-TAAATGTAAAGGTGGATACATAATGACAGT-30
) and AIR (50
-AGCTCATGACTTTTTGCACTATATATA-30
). The PCR conditions
involved denaturation at 94C for 3 min followed by 28
cycles at 94C for 30 s, 50C for 30 s, and 72C for 1 min
with PCR Master Mix (MBI, Fermentas).
Stat

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

และ assayed ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Tsujii et al. 1996) ในสั้น 100 ll supernatant ของสายพันธุ์ SE เพิ่มใน 50 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ pH 6.7 และรับการกกที่ 37C สำหรับ30 นาที จุดเริ่มต้นของปฏิกิริยาเอนไซม์ โดยการเพิ่มp-nitrophenyl-N-acetyl-b-D-glucosaminide 0.5 มม. และรับการกก 1 ชั่วโมงที่ 37 c หยุดปฏิกิริยาโดยเพิ่มปริมาณสาม 1 M Na2CO3 เอนไซม์เป็นวัด โดยการวัดการดูดซึมที่ 405 nm และเปรียบเทียบกับกราฟมาตรฐานของ p-nitrophenol หนึ่งหน่วยกำหนดเป็นจำนวนแปลงเอนไซม์ hydrolase กิจกรรมlmole 1.0 ของ p-nitrophenyl-N-acetyl-b-D-glucosaminideการ p-nitrophenol ต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบเกี่ยวกับ AHL lactonases ไพรเมอร์จากวรรณคดี(Lee et al. 2002) ใช้หน้าจอสถานะการออนไลน์aiiA homologue ยีน ออกดีเอ็นเอที่ถูกแยกจากB. thuringiensis ใช้วิธีมาตรฐานโดยSambrook และรัสเซล (2001) แก้ไขยีน homolog aiiAขยายใช้ของโครโมโซมดีเอ็นเอเป็นแม่แบบและไพรเมอร์ oligonucleotide AIF (50-TAAATGTAAAGGTGGATACATAATGACAGT-30) และอากาศ (50-AGCTCATGACTTTTTGCACTATATATA-30). เงื่อนไข PCRเกี่ยวข้องกับการแปรสภาพ 94 c เป็นเวลา 3 นาทีตาม ด้วย 28รอบที่ 94C 30 s, C 50 30 s และ 72C 1 นาทีด้วย PCR หลักผสม (MBI, Fermentas)สถิติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

และ assayed ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Tsujii et al. 1996) ใน
ช่วงสั้น ๆ 100 LL ใสความเครียด SE ถูกเพิ่มเข้ามาในขนาด 50 มม
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ pH 6.7 และบ่มที่อุณหภูมิ 37C สำหรับ
30 นาที ปฏิกิริยาของเอนไซม์ได้ริเริ่มขึ้นโดยการเพิ่ม
0.5 มิลลิ P-Nitrophenyl-N-acetyl-BD-glucosaminide และ
บ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่ 37C ปฏิกิริยาหยุด
เพิ่มสามเล่ม 1 เมตร Na2CO3 เอนไซม์
ที่ถูกวัดโดยการวัดการดูดซึมที่ 405 นาโนเมตรและ
เมื่อเทียบกับเส้นโค้งมาตรฐานของ P-nitrophenol หนึ่งหน่วยของ
กิจกรรม hydrolase ถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์แปลง
1.0 lmole ของ P-Nitrophenyl-N-acetyl-BD-glucosaminide
เพื่อ P-nitrophenol ต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบได้.
เกี่ยวกับการอาห์-lactonases ไพรเมอร์จากวรรณกรรมด้วย
(ลี et al. 2002) ถูกนำมาใช้ไปยังหน้าจอสำหรับการปรากฏตัว
ของ AIIA คล้ายคลึงกันของยีน DNA ของยีนที่แยกได้จาก
บี thuringiensis โดยใช้วิธีการมาตรฐานการอธิบายโดย
Sambrook และรัสเซล (2001) homolog ยีน AIIA ถูก
ขยายโดยใช้ดีเอ็นเอโครโมโซมเป็นแม่แบบและ
oligonucleotide ไพรเมอร์ AIF (50
-TAAATGTAAAGGTGGATACATAATGACAGT-30
) และอากาศ (50
-AGCTCATGACTTTTTGCACTATATATA-30
) เงื่อนไข PCR
ที่เกี่ยวข้องกับการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่ 94C เป็นเวลา 3 นาทีตามด้วย 28
รอบที่ 94C เป็นเวลา 30 วินาที, 50C เป็นเวลา 30 วินาทีและ 72C เป็นเวลา 1 นาที
ด้วยวิธี PCR โท Mix (MBI, Fermentas).
สถิติ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

และได้ปริมาณตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( tsujii et al . 1996 ) ในสั้น 100 จะนำของเซสายพันธุ์เพิ่ม 50 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 6.7 และบ่มที่ 37c สำหรับ30 นาที ปฏิกิริยาเอนไซม์ ได้ริเริ่มขึ้น โดยการเพิ่มp-nitrophenyl-n-acetyl-b-d-glucosaminide 0.5 มม. และบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ใน 37c ปฏิกิริยาที่ถูกหยุดโดยเพิ่มสามเล่ม 1 M Na2CO3 . กิจกรรมของเอนไซม์เป็นวัด โดยวัดการดูดกลืนที่ 405 nm และเมื่อเทียบกับกราฟมาตรฐานของ p-nitrophenol . หนึ่งหน่วยของกิจกรรมของเอนไซม์ไฮโดรเลส หมายถึง จำนวนแปลงlmole p-nitrophenyl-n-acetyl-b-d-glucosaminide ดาวน์โหลดของเพื่อ p-nitrophenol ต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบเกี่ยวกับออล lactonases , ไพรเมอร์จากวรรณคดี( ลี et al . 2002 ) ใช้ไปยังหน้าจอสำหรับตนผิวของการวิจัยยีน ดีเอ็นเอที่แยกได้จากปัญหาการใช้มาตรฐานวิธีการบรรยายโดยพ.sambrook และ Russell ( 2001 ) ในการวิจัย homolog ยีนการใช้ดีเอ็นเอของโครโมโซมเป็นแม่แบบและซึ่งไพรเมอร์ AIF ( 50- taaatgtaaaggtggatacataatgacagt-30อากาศ ( 50 )- agctcatgactttttgcactatatata-30) โดยเงื่อนไขที่เกี่ยวข้อง ( 94c 3 นาที 28 ตามด้วยวงจรที่ 94c 30 , 50c 30 วินาที และ 1 นาที 72cด้วยส่วนผสมหลักจาก ( 2 fermentas , )สถิติ