Materials and Methods Full details

Materials and Methods Full details of all methods used are provided in SI Appendix.
ProteinPurification.BslAwaspurifiedafterexpressionasaGSTfusionprotein using standard techniques. See SI Appendix for full details.
Circular Dichroism Spectropolarimetry. CD was performed using a Jasco J-810 spectropolarimeter. Control samples were analyzed at a concentration of 0.1 mg·mL−1 (6.7 μM) in a 0.1-cm quartz cuvette. Refractive index matched emulsions were analyzed in a 0.01-cm demountable quartz cuvette. Measurementswereperformedwithascanrateof50nm·s−1,adatapitchof0.1nm, and a digital integration time of 1 s.
Pendant Drop Tensiometry. Monitoring the kinetics of BslA adsorption was achieved using pendant drop tensiometry with drop shape analysis. A Krüss Easydrop tensiometer (Krüss GmbH) was used in combination with Drop Shape Analysis software. See SI Appendix for full details.
Transmission Electron Microscopy. BslA-WT and L77K samples were deposited onto carbon-coated copper grids (Cu-grid) (TAAB Laboratories Equipment, Ltd.) and imaged using a Philips/FEI CM120 BioTwin transmission electron microscope. See SI Appendix for full details.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและรายละเอียดทั้งหมดวิธีใช้วิธีทั้งหมดมีอยู่ในภาคผนวก SIProteinPurification.BslAwaspurifiedafterexpressionasaGSTfusionprotein ที่ใช้เทคนิคมาตรฐาน ดูในภาคผนวกสำหรับรายละเอียดทั้งหมดSpectropolarimetry Dichroism วงกลม CD ที่ดำเนินการโดยใช้ spectropolarimeter Jasco J-810 มีวิเคราะห์ตัวอย่างควบคุมที่ความเข้มข้นของ 0.1 mg·mL−1 (6.7 μM) ใน cuvette ควอตซ์ 0.1 cm ดรรชนีหักเหตรง emulsions ถูกวิเคราะห์ใน cuvette ควอตซ์ demountable 0.01 cm Measurementswereperformedwithascanrateof50nm·s−1, adatapitchof0.1nm และเวลารวมดิจิตอล 1 sจี้ฝาก Tensiometry จลนพลศาสตร์ของการดูดซับของ BslA ตรวจสอบสำเร็จด้วยจี้ปล่อย tensiometry วิเคราะห์รูปร่างหล่น Tensiometer Krüss Easydrop (Krüss GmbH) ใช้ร่วมกับซอฟต์แวร์วิเคราะห์รูปร่างวาง ดูในภาคผนวกสำหรับรายละเอียดทั้งหมดส่งอิเล็กตรอน Microscopy การ BslA WT และ L77K ตัวอย่างถูกส่งไปเคลือบคาร์บอนทองแดงกริด (Cu-ตาราง) (TAAB อุปกรณ์ จำกัด) และ imaged โดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนส่งฟิลิปส์/เฟย CM120 BioTwin ดูในภาคผนวกสำหรับรายละเอียดทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการรายละเอียดของวิธีการทั้งหมดที่ใช้มีไว้ในภาคผนวก SI.
ProteinPurification.BslAwaspurifiedafterexpressionasaGSTfusionprotein ใช้เทคนิคมาตรฐาน ดูภาคผนวก SI สำหรับรายละเอียด.
เวียน dichroism spectropolarimetry แผ่นซีดีที่ได้ดำเนินการโดยใช้ Jasco J-810 spectropolarimeter ตัวอย่างการควบคุมการวิเคราะห์ที่ความเข้มข้น 0.1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร·-1 (6.7 ไมครอน) ใน cuvette ควอทซ์ 0.1 ซม ดัชนีหักเหอิมัลชันที่ตรงกับการวิเคราะห์ใน cuvette ควอทซ์ต่อพ่วง 0.01 ซม Measurementswereperformedwithascanrateof50nm · s-1 adatapitchof0.1nm และเวลาการรวมดิจิตอล 1 วินาที.
จี้วาง Tensiometry การตรวจสอบจลนพลศาสตร์ของการดูดซับ BslA ก็ประสบความสำเร็จโดยใช้ tensiometry จี้ลดลงด้วยการวิเคราะห์รูปร่างลดลง Krüss Easydrop แรงดึง (Krüss GmbH) ถูกนำมาใช้ในการทำงานร่วมกับซอฟต์แวร์การวิเคราะห์รูปทรงหยด ดูภาคผนวก SI สำหรับรายละเอียด.
ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน BslA-WT และตัวอย่าง L77K วางลงบนกริดทองแดงเคลือบคาร์บอน (Cu ตาราง) (TAAB ห้องปฏิบัติการอุปกรณ์กัด) และอยู่จริงใช้ฟิลิปส์ / เฟ CM120 BioTwin ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ดูภาคผนวก SI สำหรับรายละเอียด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ รายละเอียดของวิธีการที่ใช้ทั้งหมดให้ในจังหวัดไส้ติ่ง
proteinpurification.bslawaspurifiedafterexpressionasagstfusionprotein โดยใช้เทคนิคมาตรฐาน เห็นศรีภาคผนวกรายละเอียด .
spectropolarimetry dichroism วงกลม ซีดีการใช้ jasco j-810 spectropolarimeter . ตัวอย่างควบคุม วิเคราะห์ข้อมูลที่ระดับความเข้มข้น 0.1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรด้วย− 1 ( 6.7 μ M ) 01-cm พิทยาพลควอตซ์ ดัชนีการหักเหของแสงแบบอิมัลชัน วิเคราะห์ใน 0.01-cm demountable ควอตซ์พิทยาพล . measurementswereperformedwithascanrateof50nm ด้วย s − 1 , adatapitchof0.1nm และเวลารวมดิจิตอล 1 S .
จี้ปล่อย tensiometry . จลนพลศาสตร์ของการดูดซับการ bsla เร็จจี้ปล่อย tensiometry ใช้กับการวิเคราะห์รูปร่างวางเป็น KR ü SS easydrop เทนซิโอมิเตอร์ ( KR ü SS GmbH ) ที่ใช้ในการวางรูปร่างซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ เห็นศรีภาคผนวกรายละเอียด
ส่งกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน . bsla WT และ l77k จำนวนเงินลงบนคาร์บอนเคลือบทองแดง ( Cu กริด Grid ) ( taab ห้องปฏิบัติการอุปกรณ์ , Ltd . ) และภาพลักษณ์ของการใช้ Philips / เฟย cm120 biotwin กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน .เห็นศรีภาคผนวกรายละเอียด