AbstractDiphtheria toxin mutant CRM

Abstract
Diphtheria toxin mutant CRM197 is a common carrier protein for glycoconjugate vaccines, which has been proven an effective protein vector for, among others, meningococcal carbohydrates. The wide-range use of this protein in massive vaccine production requires constant increase of production yields and adaptability to an ever-growing market. Here we compare CRM197 with the alternative diphtheria non-toxic variant DT-K51E/E148K, an inactive mutant that can be produced in the periplasm of Escherichia coli. Biophysical characterization of DT-K51E/E148K suggested high similarity with CRM197, with main differences in their alpha-helical content, and a suitable purity for conjugation and vaccine preparation. Meningococcal serogroup A (MenA) glycoconjugates were synthesized using CRM197 and DT-K51E/E148K as carrier proteins, obtaining the same conjugation yields and comparable biophysical profiles. Mice were then immunized with these CRM197 and DT-K51E/E148K conjugates, and essentially identical immunogenic and protective effects were observed. Overall, our data indicate that DT-K51E/E148K is a readily produced protein that now allows the added flexibility of E. coli production in vaccine development and that can be effectively used as protein carrier for a meningococcal conjugate vaccine.

Keywords

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อกลายพันธุ์พิษคอตีบ CRM197 เป็นโปรตีนขนส่งทั่วไปสำหรับวัคซีน glycoconjugate ซึ่งได้รับการพิสูจน์เวกเตอร์มีประสิทธิภาพโปรตีน อื่น ๆ คาร์โบไฮเดรตนอก การใช้ช่วงกว้างของโปรตีนนี้ในการผลิตวัคซีนขนาดใหญ่ต้องเพิ่มขึ้นคงที่ของผลผลิตและการปรับตัวการตลาดเคยเติบโต นี่เราเปรียบเทียบ CRM197 กับตัวแปรพิษคอตีบทาง DT-K51E/E148K การกลายพันธุ์ที่ไม่ได้ใช้งานที่สามารถผลิตได้ใน periplasm ของ Escherichia coli สมบัติ biophysical ของ DT-K51E/E148K สูงคล้ายกับ CRM197 มีความแตกต่างหลักในเนื้อหาของเกลียวอัลฟา และความบริสุทธิ์ที่เหมาะสมสำหรับเตรียมผันและวัคซีนที่แนะนำ นอก serogroup glycoconjugates (MenA) ได้สังเคราะห์ใช้ DT-K51E/E148K และ CRM197 เป็นโปรตีนขนส่ง ได้รับผลตอบแทนผันเดียวและโปรไฟล์ biophysical เทียบเคียง หนูได้แล้ว immunized กับ conjugates CRM197 และ DT-K51E/E148K เหล่านี้ และข้อสังเกตหลักเหมือน immunogenic และป้องกันผลกระทบ โดยรวม ข้อมูลบ่งชี้ว่า DT-K51E/E148K เป็นโปรตีนที่ผลิตได้ที่ตอนนี้ช่วยเพิ่มความยืดหยุ่นของโคไลผลิตในการพัฒนาวัคซีน และที่มีประสิทธิภาพใช้เป็นโปรตีนขนส่งสำหรับวัคซีน conjugate นอกคำสำคัญ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ
พิษโรคคอตีบกลายพันธุ์ CRM197 เป็นโปรตีนที่ให้บริการทั่วไปสำหรับวัคซีน glycoconjugate ซึ่งได้รับการพิสูจน์เวกเตอร์โปรตีนที่มีประสิทธิภาพสำหรับอื่น ๆ ในกลุ่มคาร์โบไฮเดรต meningococcal การใช้งานที่หลากหลายของโปรตีนนี้ในการผลิตวัคซีนขนาดใหญ่ต้องมีการเพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่องของอัตราผลตอบแทนการผลิตและการปรับตัวที่จะเป็นตลาดที่เคยเติบโต ที่นี่เราเปรียบเทียบ CRM197 กับโรคคอตีบทางเลือกที่ปลอดสารพิษที่แตกต่าง DT-K51E / E148K การกลายพันธุ์ที่ไม่ได้ใช้งานสามารถผลิตได้ใน periplasm ของ Escherichia coli ลักษณะชีวฟิสิกส์ของ DT-K51E / E148K ปัญหาคล้ายคลึงกันสูงด้วย CRM197 มีความแตกต่างหลักในเนื้อหาของอัลฟาขดลวดของพวกเขาและความบริสุทธิ์เหมาะสำหรับการเชื่อมต่อกันและการเตรียมวัคซีน meningococcal serogroup A (MENA) glycoconjugates ถูกสังเคราะห์โดยใช้ CRM197 และ DT-K51E / E148K เป็นโปรตีนที่ผู้ให้บริการได้รับอัตราผลตอบแทนที่ผันเดียวกันและโปรไฟล์ชีวฟิสิกส์เทียบเคียง หนูได้รับวัคซีนแล้วกับ CRM197 เหล่านี้และ DT-K51E / คอนจูเกต E148K และเป็นหลักผลกระทบภูมิคุ้มกันและป้องกันเหมือนถูกตั้งข้อสังเกต โดยรวม, ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่า DT-K51E / E148K เป็นโปรตีนที่ผลิตได้อย่างง่ายดายว่าตอนนี้ช่วยเพิ่มความยืดหยุ่นของการผลิตเชื้อ E. coli ในการพัฒนาวัคซีนและที่สามารถนำมาใช้อย่างมีประสิทธิภาพเป็นผู้ให้บริการที่มีโปรตีนสำหรับวัคซีนป้องกันเยื่อหุ้มสมอง. คำสำคัญ