Abstract
Two electrochemical assays for detecting Staphylococcus aureus enterotoxin A and B genes were developed. The assays are based on PCR amplification with biotinylated primers, hybridization to a fluorescein-labeled probe, and detection with horseradish peroxidase-conjugated anti-fluorescein antibody using a hand-held electrochemical detector. The limit of detection (LOD) for both assays was approximately 16 copies of the sea and seb genes. The assays were evaluated in blinded studies, each with 81 samples that included genomic and cloned S. aureus DNA, and genomic DNA from Alcaligens, Bacillus, Bacteroides, Bordetella, Borkholderia, Clostridium, Comanonas, Enterobacter, Enterococcus, Escherichia, Francisella, Haemophilus, Klebsiella, Listeria, Moraxella, Neisseria, Proteus, Pseudomonas, Salmonella, Serratia, Shigella, Streptococcus, Vibrio and Yersinia species. Both assays showed 100% sensitivity. The specificity was 96% for the SEA assay and 98% for the SEB assay. These results demonstrate the feasibility of performing probe-based detection of PCR products with a low-cost, hand-held, electrochemical detection device as a viable alternative to colorimetric enzyme-linked assays of PCR products.
บทคัดย่อสอง assays ไฟฟ้าสำหรับตรวจจับ Staphylococcus หมอเทศข้างลาย enterotoxin A และ B ยีนได้ถูกพัฒนาขึ้น Assays ที่ขึ้นอยู่กับกระบือกับไพรเมอร์ biotinylated, hybridization เพื่อการสอบสวนระบุว่า fluorescein และตรวจจับเป็ดน้ำผันฮอส fluorescein ต้านแอนติบอดีโดยใช้เครื่องตรวจจับไฟฟ้ามือถือ ขีดจำกัดของการตรวจสอบ (LOD) สำหรับทั้ง assays เป็นประมาณ 16 สำเนาของยีนที่ทะเลและ seb Assays ถูกประเมินในตาบอดการศึกษา ตัวอย่าง 81 ที่รวมออก และโคลน DNA หมอเทศข้างลาย S. และดีเอ็นเอออกจาก Alcaligens, Bacillus, Bacteroides, Bordetella, Borkholderia, Clostridium, Comanonas, Enterobacter, Enterococcus, Escherichia, Francisella, Haemophilus, Klebsiella เช่น Moraxella, Neisseria, Proteus, Pseudomonas, Salmonella, Serratia, Shigella อุณหภูมิ ปริมาณวิบริโอ Yersinia สายพันธุ์ และ แต่ละ Assays ทั้งสองแสดงให้เห็นว่าความไว 100% ความจำเพาะที่ถูกทดสอบซี 96% และ 98% สำหรับทดสอบ SEB ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ที่ทำการสอบสวนตามผลิตภัณฑ์ PCR กับอุปกรณ์ตรวจจับโลว์ มือถือ ไฟฟ้าเป็นอีกทางเลือกหนึ่งเพื่อ assays เอนไซม์ลิงค์สีของผลิตภัณฑ์ PCR
การแปล กรุณารอสักครู่..

บทคัดย่อ
สองชุดตรวจไฟฟ้าสำหรับการตรวจสอบ Staphylococcus aureus enterotoxin A และ B ยีนได้รับการพัฒนา ตรวจอยู่บนพื้นฐานของการขยาย PCR กับไพรเมอร์ biotinylated พันธุ์เพื่อการสอบสวน fluorescein ติดฉลากและการตรวจหาแอนติบอดีกับมะรุม peroxidase-ผันป้องกัน fluorescein ใช้มือถือเครื่องตรวจจับไฟฟ้า ขีด จำกัด ของการตรวจสอบ (LOD) สำหรับการวิเคราะห์ทั้งสองอยู่ที่ประมาณ 16 สำเนาของทะเลและ SEB ยีน ตรวจได้รับการประเมินในการศึกษาคนตาบอดแต่ละคนมี 81 ตัวอย่างซึ่งรวมถึงจีโนมและโคลนเชื้อ S. aureus ดีเอ็นเอและดีเอ็นเอจาก Alcaligens, Bacillus, Bacteroides, Bordetella, Borkholderia, Clostridium, Comanonas, Enterobacter, Enterococcus, Escherichia, Francisella, Haemophilus, Klebsiella, Listeria, Moraxella, Neisseria, Proteus, Pseudomonas, Salmonella, Serratia, Shigella, Streptococcus, Yersinia Vibrio และสายพันธุ์ ทั้งการตรวจพบว่ามีความไว 100% ความจำเพาะเป็น 96% สำหรับการทดสอบทะเลและ 98% สำหรับการทดสอบ SEB ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ในการดำเนินการตรวจสอบการสอบสวนตามของผลิตภัณฑ์ PCR ที่มีต้นทุนต่ำ, การตรวจสอบอุปกรณ์ไฟฟ้ามือถือเป็นทางเลือกที่ทำงานได้กับสีชุดตรวจเอนไซม์ที่เชื่อมโยงของผลิตภัณฑ์วิธี PCR
การแปล กรุณารอสักครู่..

บทคัดย่อสองวิธีไฟฟ้าเคมีเพื่อการตรวจหาเชื้อ Staphylococcus aureus ปน A และ B ยีนได้รับการพัฒนา หรือจะตามด้วย PCR แบบไลไพรเมอร์ , เบส เพื่อสอบสวนและตรวจสอบี่ติดป้าย , peroxidase แอนติบอดีต่อต้านกับพืชชนิดหนึ่ง conjugated ี่ใช้ electrochemical มือถือเครื่องตรวจจับ ขีดจำกัดของการตรวจหา ( LOD ) ทั้ง 2 วิธีคือประมาณ 16 เล่มของทะเลและ Seb ยีน หรือในการศึกษา ได้แก่ ตาบอดละ 81 ตัวอย่างที่ประกอบด้วยจีโนมขนาด S . aureus ดีเอ็นเอและดีเอ็นเอจาก alcaligens , Bacillus , bacteroides bordetella borkholderia Clostridium , , , , comanonas , Enterobacter , เอ็นเทโรค็อกคัส , Escherichia francisella โฮโมฟิลัส , , , moraxella เชื้อ Listeria สามารถ , , , , ที่มี , Pseudomonas , Salmonella , เซอร์ราเทียเชื้อชิเกลลา , เชื้อแบคทีเรีย , และ เยอซิเนียสายพันธุ์ ทั้ง 2 วิธีมีความไว 100% . ความจำเพาะเป็น 96% สำหรับทะเล assay และ 98% สำหรับ SEB ตามลำดับ ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการปฏิบัติตามการตรวจสอบของผลิตภัณฑ์ PCR ที่มีต้นทุนต่ำ , มือถือ , อุปกรณ์ตรวจจับไฟฟ้าเป็นทางเลือกที่ทำงานได้กับ 7.4 enzyme-linked ) ของผลิตภัณฑ์ PCR
การแปล กรุณารอสักครู่..
