2. Materials and methods2.1. Fungal

2. Materials and methods
2.1. Fungal isolation and identification
P. expansum was initially isolated from the naturally infected pear fruits (Pyrus bretschneideri Rehd.) as described by Qinet al. (2007) and maintained on potato dextrose agar (PDA)plates. Total DNA of pathogen was isolated using a DNeasy Plant Mini kit (Qiagen, Germany), following the manufacturer’s instructions. The complete rDNA-ITS of the isolated was ampli-fied using universal primers ITS4 (TCCTCCGCTTATTGATATGC) and ITS5 (GGAAGGTAAAAGTCGTAACAAG) by routine PCR approach.The sequencing results of amplified products were analyzed in into100 mL PDB medium with 0 or 0.6% NaHCO3 to obtain a final concentration of 1.0 × 106spores/mL. After incubation of 12, 24, 36 and48 h, the dry weight of hypha was measured after repeated wash-ing of mycelial pellets with distilled water and during at 70◦C inhot-air oven to a constant weight. Each treatment was replicated
three times and the experiment was repeated.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. เชื้อราแยกและระบุP. expansum ถูกเริ่มแยกจากผลไม้ลูกแพร์ที่ติดเชื้อตามธรรมชาติ (Pyrus bretschneideri Rehd.) ตามที่อธิบายไว้ โดย Qinet al. (2007) และอยู่ในแผ่นมันฝรั่งขึ้น agar (PDA) ดีเอ็นเอทั้งหมดของการศึกษาได้ใช้ชุดมินิโรงงาน DNeasy (Qiagen เยอรมนี), แยกตามคำแนะนำของผู้ผลิต การทำ rDNA เป็นของที่แยกเป็นฟอง ampli ที่ใช้สากลไพรเมอร์ ITS4 (TCCTCCGCTTATTGATATGC) และ ITS5 (GGAAGGTAAAAGTCGTAACAAG) โดยวิธี PCR ประจำ ผลการจัดลำดับผลิตภัณฑ์เอาต์ได้วิเคราะห์ใน into100 มล PDB 0 หรือ 0.6% NaHCO3 เพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายของ 1.0 × 106spores/mL หลังจากบ่ม 12, 24, 36 and48 h มีวัดน้ำหนักแห้งของ hypha หลังล้างกำลังซ้ำของขี้ mycelial ด้วยน้ำกลั่น และในระหว่างที่เตาอบ inhot อากาศ 70◦C น้ำหนักคง ทรีตเมนท์จำลองแบบแล้วมีซ้ำสามครั้งและทดลอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1
แยกเชื้อราและบัตรประจำตัวพี expansum ที่แยกได้ในขั้นต้นจากผลไม้ลูกแพร์ที่ติดเชื้อตามธรรมชาติ (Pyrus bretschneideri Rehd.) ตามที่อธิบาย Qinet อัล (2007) และการบำรุงรักษาในอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่ง (PDA) แผ่น รวมดีเอ็นเอของเชื้อโรคที่แยกได้โดยใช้พืช DNeasy ชุดมินิ (Qiagen, เยอรมนี) ทำตามคำแนะนำของผู้ผลิต สมบูรณ์ rDNA-ITS ของแยกเป็น ampli-กระแสไฟใช้ไพรเมอร์สากล ITS4 (TCCTCCGCTTATTGATATGC) และ ITS5 (GGAAGGTAAAAGTCGTAACAAG) โดยวิธี PCR ประจำ approach.The ผลการจัดลำดับของผลิตภัณฑ์ขยายวิเคราะห์ใน into100 กลางมิลลิลิตร PDB กับ 0 หรือ 0.6% NaHCO3 ที่จะได้รับ ความเข้มข้นสุดท้ายของ 1.0 × 106spores / มิลลิลิตร หลังจากการบ่ม 12, 24, 36 and48 ชั่วโมงน้ำหนักแห้งของ hypha วัดซ้ำหลังจากล้างไอเอ็นจีเม็ดเส้นใยด้วยน้ำกลั่นและในช่วงที่70◦Cเตาอบ inhot อากาศที่จะมีน้ำหนักคงที่
การรักษาที่แต่ละคนได้รับการจำลองแบบสามครั้งและทดลองซ้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . การแยกและจำแนกเชื้อราหน้า expansum ก็เริ่มแยกจากธรรมชาติติดเชื้อลูกแพร์ผลไม้ ( pyrus bretschneideri rehd ) ตามที่อธิบายไว้โดย qinet อัล ( 2007 ) และรักษาในอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) จาน ดีเอ็นเอทั้งหมดของเชื้อโรคได้โดยใช้ dneasy พืช Mini Kit ( QIAGEN , เยอรมัน ) , ทำตามคำแนะนำของผู้ผลิต ที่สมบูรณ์ของชนิดของแยกเป็น ampli fied ใช้ไพรเมอร์ its4 สากล ( tcctccgcttattgatatgc ) และ its5 ( ggaaggtaaaagtcgtaacaag ) โดยวิธี PCR ตามปกติ การจัดการขยายผลิตภัณฑ์ วิเคราะห์ใน into100 ml PDB ขนาดกลางด้วย 0 หรือ 0.6% โซเดียมไบคาร์บอเนตเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้าย 1.0 × 106spores / มล. หลังจากบ่ม 12 , 24 , 36 and48 H , น้ำหนักแห้งของไฮฟาวัดซ้ําหลังจากล้างไอเอ็นจีเม็ดเส้นใยด้วยน้ำกลั่นและในระหว่างที่ 70 ◦ C inhot อากาศเตาน้ำหนักคงที่ การรักษาแต่ละครั้งเป็นจำนวนสามครั้งและการทดลองซ้ำ