On the other hand, it was observed

On the other hand, it was observed an inefficient phase separation evidenced by on small volume of the surfactant rich phase (95%), except for NFV (ca. 70%), and remained invariant only for EFV at higher pH values. These results could be due to the tradeoff between the effect of affinity of the analyte by the micelles and their efficiency in forming, resulting in an improvement of the analytical signal. NFV analytical responses reached the highest values (>95%) at pH 9 and remained invariant at pH 11.5. The analytical responses of 3 TC and ABC decreased from pH 7 and pH 9, respectively. Phases separation was efficient from pH 7 ahead, obtaining a coacervate-phase volume of ca. 350 μL. Coacervate phase showed the highest dehydration and the smaller volume (ca. 300 μL) at pH of 11.5; resulting in a better phases separation performance and reducing of the loss of coacervate phase when the supernatant was discharged. The decrease in the analytical signal of ABC and 3 TC at pH 11.5 could be due to a signal suppression effect in the mass spectrometer because of a high matrix load in the solvent front. Considering the short retention time of ABC and 3 TC (1.30 and 1.34 min−1, respectively) it was expected that their analytical signal were more affected by this phenomenon than for NFV and EFV, whose retention time were higher (1.61 and 2.06 min−1, respectively).

Based on these results, pH 7.5 was adopted as working condition considering it as the best compromise pH that lead to successful analytical response for the studied ARV. Considering that human plasma pH is 7.4 [27], the extraction pH was not adjusted for CPE of ARV from plasma. This fact is relevant for the development of an analytical methodology for a multi-component analysis since it simplify the procedure.

3.4. Optimization of extraction temperature and time

Reported cloud point temperatures for TritonX-114 are within the range of 15–20 °C [19]. It refers to the temperature at which the surfactant coacervation results notorious in the extraction system, because of its turbid aspect. As it is well known, extraction temperatures above the cloud point, and/or the extended extraction time (>2 min), diminishes the water content of the resulting surfactant reach phase, and thus, its final volume [25]. This argument is based on the fact that as the extraction temperature increases, the hydrogen bonds are disrupted leading, thus, to dehydration of micelles [25]. On the other hand, it is important to take into account that the use of excessive high extraction temperature can reduce the CPE efficiency, because of the thermal stability of surfactant aggregates [30] as well as the analytes lability. Therefore, it was of interest to study the effect of the extraction temperature on the extraction system performance, as well as on the analytes analytical response along with the extraction time within the range 45–75 °C and 10–30 min, respectively. The extraction temperature assays were carried out considering a 20 min extraction time; while the time assays, were carried out at the optimum temperature resulting from the former. As the temperature increased from 45 to 65 °C a better surfactant-rich phase separation as well as an increased response of the analytes was observed. The results showed no significant change neither on the CPE performance nor on the analytical response of the studied ARV at extraction temperatures above 65 °C. Therefore, 65 °C were chosen for further assays. For the extraction time, it was observed that by increasing it, the relative response is subsequently increased, reaching the maximum analytical responses of the studied ARV at 20 min; after which, and remained invariant. Thus, in the following experiments, an extraction time of 20 min was selected for the extraction.

3.5. Analytical performance and method validation

The proposed analytical multi-component method was evaluated in terms of linearity, recovery, accuracy and precision intra- and inter-day, selectivity and sensitivity. Blank plasma was assessed in six different batches of plasma samples by analyzing blanks and spiked samples at LOQ levels. The calibration curves were made under optimized conditions following the proposed methodology, which was described above. Blank plasma were spiked with ARV standards achieving different concentration levels [31

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในทางกลับกัน มันถูกตรวจสอบการแยกระยะต่ำที่เป็นหลักฐานโดยบนไดรฟ์ข้อมูลขนาดเล็กของ surfactant ระยะรวย (< 50 μL), ซึ่งได้รับผลกระทบประสิทธิภาพการแยก และจากนั้นวิเคราะห์ตอบสนองที่ pH 5 เสียงระยะ coacervate ได้ถูก ca 450 μL และพบ turbid ที่ล้างหลังจากขั้นตอนฝนโปรตีน ที่นี้ pH, 3 TC และ ABC แผ่ขยายไปในฟอร์ม ionic ขณะ NFV และ EFV แผ่ขยายไปในฟอร์มของ nonionic ตาม pKa ของ ในนี้ มันถูกคาดว่าจะดูตอบสนองญาติล่างสำหรับ ionic analytes เนื่องจากจะมีความเกี่ยวข้องด้านล่างสำหรับ nonionic micelle และลดประสิทธิภาพในการสกัดสำหรับ ARV เหล่านี้ดังนั้น อย่างไรก็ตาม การตอบสนองของ ARV วิเคราะห์ถึงค่าสูงสุดที่ pH 5 (> 95%), ยก เว้น NFV (ca 70%), และก่อนหน้าบล็อกสำหรับ EFV ที่ค่า pH สูงขึ้น ผลลัพธ์เหล่านี้อาจเป็น เพราะข้อดีข้อเสียระหว่างผลของความสัมพันธ์ของ analyte โดย micelles การและประสิทธิภาพของพวกเขาในการขึ้นรูป ผลของการวิเคราะห์สัญญาณ ตอบวิเคราะห์ NFV ถึงค่าสูงสุด (> 95%) ที่ pH 9 และก่อนหน้าบล็อกที่ pH 11.5 ตอบวิเคราะห์ 3 TC และ ABC ลดลงจากค่า pH 7 และ pH 9 ตามลำดับ ระยะแยกมากจาก pH 7 หน้า ได้รับปริมาณ coacervate เฟสของ ca 350 μL แสดงให้เห็นว่าปริมาณขนาดเล็ก (ca. 300 μL) และคายน้ำสูงสุดที่ pH 11.5 ระยะ coacervate ในการระยะแยกประสิทธิภาพ และลดการสูญเสียของระยะ coacervate เมื่อ supernatant ที่ออก สัญญาณวิเคราะห์ ABC และ 3 TC ที่ pH 11.5 ที่ลดลงนี้อาจเป็น เพราะผลการปราบปรามสัญญาณในสเปกโตรมิเตอร์โดยรวมเนื่องจากโหลดเมทริกซ์สูงในด้านหน้าเป็นตัวทำละลาย พิจารณาเวลาเก็บรักษาสั้นของ ABC และ 3 TC (1.30 และ 1.34 min−1 ตามลำดับ) จึงคาดว่าว่า สัญญาณการวิเคราะห์มากถูกกระทบ โดยปรากฏการณ์นี้มากกว่า NFV และ EFV เวลาเก็บข้อมูลได้สูงขึ้น (1.61 และ 2.06 min−1 ตามลำดับ)ขึ้นอยู่กับผลลัพธ์เหล่านี้ pH 7.5 ถูกนำเป็นเงื่อนไขการทำงานที่พิจารณาเป็น pH ประนีประนอมสุดที่นำไปสู่คำตอบวิเคราะห์ประสบความสำเร็จสำหรับ studied ARV พิจารณา pH ที่พลาสม่ามนุษย์เป็น 7.4 [27], pH สกัดถูกปรับสำหรับ CPE ARV จากพลาสม่าครั้ง ความจริงนี้จะเกี่ยวข้องกับการพัฒนาวิธีการวิเคราะห์สำหรับการวิเคราะห์ส่วนประกอบหลายเนื่องจากมันง่ายขั้นตอน3.4 การปรับแยกอุณหภูมิและเวลาReported cloud point temperatures for TritonX-114 are within the range of 15–20 °C [19]. It refers to the temperature at which the surfactant coacervation results notorious in the extraction system, because of its turbid aspect. As it is well known, extraction temperatures above the cloud point, and/or the extended extraction time (>2 min), diminishes the water content of the resulting surfactant reach phase, and thus, its final volume [25]. This argument is based on the fact that as the extraction temperature increases, the hydrogen bonds are disrupted leading, thus, to dehydration of micelles [25]. On the other hand, it is important to take into account that the use of excessive high extraction temperature can reduce the CPE efficiency, because of the thermal stability of surfactant aggregates [30] as well as the analytes lability. Therefore, it was of interest to study the effect of the extraction temperature on the extraction system performance, as well as on the analytes analytical response along with the extraction time within the range 45–75 °C and 10–30 min, respectively. The extraction temperature assays were carried out considering a 20 min extraction time; while the time assays, were carried out at the optimum temperature resulting from the former. As the temperature increased from 45 to 65 °C a better surfactant-rich phase separation as well as an increased response of the analytes was observed. The results showed no significant change neither on the CPE performance nor on the analytical response of the studied ARV at extraction temperatures above 65 °C. Therefore, 65 °C were chosen for further assays. For the extraction time, it was observed that by increasing it, the relative response is subsequently increased, reaching the maximum analytical responses of the studied ARV at 20 min; after which, and remained invariant. Thus, in the following experiments, an extraction time of 20 min was selected for the extraction.3.5 การวิเคราะห์ประสิทธิภาพและวิธีการตรวจสอบมีประเมินวิธีวิเคราะห์ส่วนประกอบหลายเสนอแบบดอกไม้ กู้คืน ความถูกต้อง และแม่นยำภายใน - และระหว่างวัน ใว และความไว พลาสม่าว่างประเมินในหกชุดอื่นอย่างพลาสม่า โดยการวิเคราะห์ช่องว่าง และ spiked ตัวอย่างระดับ LOQ เทียบเส้นโค้งตั้งขึ้นภายใต้เงื่อนไขให้เหมาะต่อการเสนอวิธีการ ที่ได้อธิบายไว้ข้างต้น พลาสม่าเปล่ามี spiked ARV มาตรฐานบรรลุระดับความเข้มข้นแตกต่างกัน [31

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในทางกลับกันมันก็สังเกตการแยกเฟสที่ไม่มีประสิทธิภาพเห็นได้จากบนไดรฟ์ขนาดเล็กของขั้นตอนการลดแรงตึงผิวที่อุดมไปด้วย (<50 ไมโครลิตร) ซึ่งได้รับผลกระทบประสิทธิภาพการสกัดและจึงตอบสนองการวิเคราะห์ของพวกเขา. ที่พีเอช 5 ปริมาณเฟส coacervate ผลเป็นแคลิฟอร์เนีย 450 ไมโครลิตรและแสดงให้เห็นขุ่นซึ่งชัดเจนขึ้นหลังจากที่ขั้นตอนการตกตะกอนโปรตีน ที่ pH นี้ TC 3 และเอบีซีชนะในรูปแบบอิออนในขณะที่ NFV EFV และตระหนักในรูปแบบของพวกเขาไม่มีประจุตาม pKa ของพวกเขา บนพื้นฐานนี้มันก็คาดว่าจะเห็นการตอบสนองที่ต่ำกว่าเมื่อเทียบสำหรับวิเคราะห์อิออนตั้งแต่ที่พวกเขาจะมีความสัมพันธ์ที่ต่ำกว่าสำหรับไมเซลล์ไม่มีประจุและดังนั้นประสิทธิภาพในการสกัดที่ต่ำกว่าสำหรับยาต้านไวรัสเหล่านี้ แต่การตอบสนองของยาต้านไวรัสวิเคราะห์ถึงค่าสูงสุดที่ pH 5 (> 95%) ยกเว้น NFV (แคลิฟอร์เนียได้ 70%) และยังคงคงที่เฉพาะสำหรับ EFV ที่ค่าพีเอชสูง ผลการเหล่านี้อาจจะเกิดจากการถ่วงดุลอำนาจระหว่างผลของความสัมพันธ์ของการวิเคราะห์โดยไมเซลล์และประสิทธิภาพของพวกเขาในการสร้างที่มีผลในการปรับปรุงสัญญาณการวิเคราะห์ การตอบสนองการวิเคราะห์ NFV ถึงค่าสูงสุด (> 95%) ที่ pH 9 และยังคงคงที่ pH 11.5 การตอบสนองวิเคราะห์ของ TC 3 และเอบีซีลดลงจากค่า pH 7 และค่า pH 9 ตามลำดับ แยกขั้นตอนมีประสิทธิภาพจากค่า pH 7 ไปข้างหน้าได้รับปริมาณเฟส coacervate ของรัฐแคลิฟอร์เนีย 350 ไมโครลิตร เฟส Coacervate แสดงให้เห็นถึงการขาดน้ำสูงสุดและปริมาณที่มีขนาดเล็ก (แคลิฟอร์เนีย 300 ไมโครลิตร) ที่ pH 11.5; ส่งผลให้ประสิทธิภาพการทำงานที่แยกขั้นตอนที่ดีขึ้นและลดการสูญเสียของเฟส coacervate เมื่อใสถูกปลด การลดลงของสัญญาณวิเคราะห์ของเอบีซีและ 3 TC ที่ pH 11.5 อาจจะเนื่องมาจากการปราบปรามสัญญาณผลบังคับใช้ในสเปกโตรมิเตอร์มวลเพราะภาระเมทริกซ์ที่สูงในด้านหน้าตัวทำละลาย เมื่อพิจารณาถึงเวลาเก็บสั้น ๆ ของเอบีซีและ 3 TC (1.30 และ 1.34 นาที-1 ตามลำดับ) มันเป็นที่คาดว่าสัญญาณการวิเคราะห์ของพวกเขามากขึ้นได้รับผลกระทบจากปรากฏการณ์กว่า NFV และ EFV นี้มีระยะเวลาเก็บกักสูง (1.61 และ 2.06 min- 1 ตามลำดับ). พิจารณาจากผลการเหล่านี้มีค่า pH 7.5 ถูกนำมาใช้เป็นเงื่อนไขในการทำงานคิดว่ามันเป็นค่า pH ประนีประนอมที่ดีที่สุดที่นำไปสู่การตอบสนองต่อการวิเคราะห์ที่ประสบความสำเร็จในการศึกษายาต้านไวรัส พิจารณาว่าพีเอชพลาสม่าของมนุษย์คือ 7.4 [27], พีเอชสกัดไม่ได้ปรับ CPE ของยาต้านไวรัสจากพลาสม่า ความจริงเรื่องนี้มีความเกี่ยวข้องในการพัฒนาวิธีการวิเคราะห์สำหรับการวิเคราะห์แบบหลายองค์ประกอบเพราะมันลดความซับซ้อนของขั้นตอน. 3.4 การเพิ่มประสิทธิภาพของการสกัดอุณหภูมิและเวลาที่รายงานอุณหภูมิจุดเมฆสำหรับ TritonX-114 อยู่ในช่วง 15-20 องศาเซลเซียส [19] มันหมายถึงอุณหภูมิที่ลดแรงตึงผิว coacervation ผลฉาวโฉ่ในระบบการสกัดเพราะลักษณะขุ่นของ เป็นที่รู้จักกันดีที่มีอุณหภูมิสูงกว่าจุดสกัดเมฆและ / หรือขยายเวลาการสกัด (> 2 นาที) ลดปริมาณน้ำของเฟสลดแรงตึงผิวการเข้าถึงที่เกิดขึ้นและทำให้ปริมาณสุดท้าย [25] เรื่องนี้ขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่าในขณะที่การเพิ่มขึ้นของอุณหภูมิสกัดที่พันธะไฮโดรเจนจะหยุดชะงักชั้นนำจึงการคายน้ำของไมเซลล์ [25] ในทางกลับกันก็เป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องคำนึงว่าการใช้อุณหภูมิสูงมากเกินไปสกัดสามารถลดประสิทธิภาพ CPE เพราะของเสถียรภาพทางความร้อนของมวลรวมลดแรงตึงผิว [30] เช่นเดียวกับ lability วิเคราะห์ ดังนั้นจึงเป็นที่น่าสนใจที่จะศึกษาผลของอุณหภูมิการสกัดต่อประสิทธิภาพของระบบการสกัดเช่นเดียวกับการวิเคราะห์การตอบสนองการวิเคราะห์พร้อมกับเวลาการสกัดอยู่ในช่วง 45-75 องศาเซลเซียสและ 10-30 นาทีตามลำดับ การตรวจอุณหภูมิสกัดได้ดำเนินการพิจารณา 20 นาทีเวลาสกัด; ในขณะที่การตรวจเวลาที่ได้ดำเนินการที่อุณหภูมิที่เหมาะสมที่เกิดจากอดีต ในฐานะที่เป็นอุณหภูมิที่เพิ่มขึ้น 45-65 องศาเซลเซียสการแยกเฟสลดแรงตึงผิวที่อุดมไปด้วยดีกว่าเช่นเดียวกับการตอบสนองที่เพิ่มขึ้นของการวิเคราะห์ได้สังเกต ผลการศึกษาพบไม่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญต่อประสิทธิภาพการทำงานไม่ CPE หรือการตอบสนองวิเคราะห์ของยาต้านไวรัสการศึกษาที่อุณหภูมิสกัดเหนือ 65 องศาเซลเซียส ดังนั้น 65 ° C ได้รับการคัดเลือกสำหรับการวิเคราะห์ต่อไป เวลาสกัดมันถูกตั้งข้อสังเกตว่ามันโดยการเพิ่มการตอบสนองที่ญาติจะเพิ่มขึ้นต่อมาถึงการตอบสนองการวิเคราะห์สูงสุดของยาต้านไวรัสที่ศึกษา 20 นาที; หลังจากที่และยังคงอยู่คงที่ ดังนั้นในการทดลองต่อไปนี้เป็นช่วงเวลาที่การสกัด 20 นาทีได้รับเลือกสำหรับการสกัด. 3.5 การวิเคราะห์ผลการดำเนินงานและการตรวจสอบวิธีการที่นำเสนอการวิเคราะห์วิธีการหลายองค์ประกอบที่ถูกประเมินในแง่ของความเป็นเชิงเส้น, การกู้คืนความถูกต้องและความแม่นยำและ intra- ระหว่างวันเลือกและความไว พลาสม่าที่ว่างเปล่าได้รับการประเมินในรอบหกสำหรับกระบวนการที่แตกต่างกันของตัวอย่างพลาสมาโดยการวิเคราะห์ช่องว่างและตัวอย่างถูกแทงในระดับ LOQ เส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูกสร้างขึ้นภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุดต่อไปนี้วิธีการที่นำเสนอซึ่งได้อธิบายไว้ข้างต้น พลาสม่าที่ว่างเปล่าถูกแทงได้รับยาต้านไวรัสที่มีมาตรฐานการบรรลุระดับความเข้มข้นที่แตกต่างกัน [31

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บนมืออื่น ๆที่พบการขาดการแยกเฟส ) โดยปริมาณขนาดเล็กของเฟสที่อุดมไปด้วยสาร ( < 50 μ L ) ซึ่งมีผลต่อประสิทธิภาพการสกัดและจากนั้นการตอบสนองเชิงวิเคราะห์ของพวกเขาที่ pH 5 ส่งผลให้ปริมาณโคแอคเซอร์เวทระยะประมาณ 450 μ L และมีโคลนตม ซึ่งชัดเจนขึ้นหลังการตกตะกอนโปรตีนขั้น ที่ pH นี้ 3 TC และ ABC ตระหนักในรูปแบบอิออน ในขณะที่ nfv efv และตระหนักในรูปแบบชนิดของพวกเขาตามความของพวกเขา บนพื้นฐานนี้ ก็คาดว่าจะได้เห็นการตอบสนองต่อสารไอออนลดญาติตั้งแต่พวกเขาจะมี affinity สำหรับ ไมเซลล์ประจุลดลง , และดังนั้น ประสิทธิภาพในการสกัดน้อยกว่าเหล่านี้ยา . อย่างไรก็ตาม การตอบสนองของยาวิเคราะห์ถึงค่าสูงสุดที่ pH 5 ( > 95% ) ยกเว้น nfv ( ประมาณ 70% ) และยังคงไม่เปลี่ยนแปลง แต่ efv สูงกว่าค่า pH . ผลลัพธ์เหล่านี้อาจเกิดจากการแลกเปลี่ยนระหว่างผลของความสัมพันธ์ของครู โดยมัประสิทธิภาพในการขึ้นรูปและผลในการปรับปรุงสัญญาณเชิงวิเคราะห์ nfv วิเคราะห์การตอบสนองถึงค่าสูงสุด ( > 95% ) ที่พีเอช 9 และยังคงไม่เปลี่ยนแปลงที่ pH 11.5 . การตอบสนองเชิงวิเคราะห์ 3 TC และ ABC ลดลงจากที่ pH 7 และพีเอช 9 ตามลำดับ ขั้นตอนการแยกจากพีเอช 7 มีประสิทธิภาพล่วงหน้าที่ได้รับโคแอคเซอร์เวทระยะปริมาตรประมาณ 350 ลิตร ระยะμโคแอคเซอร์เวทมีน้ำสูงสุดและปริมาณที่มีขนาดเล็ก ( ประมาณ 300 μ L ) ที่ pH 11.5 ; ส่งผลให้ประสิทธิภาพการแยกขั้นตอนที่ดีขึ้นและลดการสูญเสียของเฟสโคแอคเซอร์เวทเมื่อนำออกไปแล้ว การลดลงของสัญญาณวิเคราะห์ ABC และ 3 TC ที่ pH 11.5 อาจเป็นเพราะสัญญาณการปราบปรามอิทธิพลในแมสสเปกโทรมิเตอร์ เพราะโหลดเมทริกซ์สูงด้านหน้าเป็นตัวทำละลาย พิจารณาเวลาการเก็บรักษาสั้นของ ABC และ 3 TC ( 1.30 และ 1.34 นาที− 1 ตามลำดับ ) คาดว่าเป็นสัญญาณเชิงวิเคราะห์ของพวกเขามากกว่าผลกระทบจากปรากฏการณ์นี้มากกว่าและ nfv efv ที่มีเวลากักต่ำกว่า ( 1.61 2.06 นาที− 1 ตามลำดับ )จากผล pH 7.5 และถูกใช้เป็นเงื่อนไขการทำงานพิจารณามันเป็น pH ประนีประนอมที่ดีที่สุดที่นำไปสู่การประสบความสำเร็จในการศึกษาวิเคราะห์ยาต้านไวรัส . พิจารณาว่า pH พลาสมาเป็น 7.4 [ 27 ] , pH การสกัดไม่ได้ปรับสำหรับ CPE ของยาต้านไวรัสจากพลาสมา ความเป็นจริงนี้จะเกี่ยวข้องกับการพัฒนาวิธีการวิเคราะห์สำหรับการวิเคราะห์โดยเพราะมันลดความซับซ้อนของกระบวนการ3.4 . การเพิ่มประสิทธิภาพของการสกัดที่อุณหภูมิ และเวลาเมฆจุดสำหรับ tritonx-114 รายงานอุณหภูมิภายในช่วง 15 – 20 ° C [ 19 ] หมายถึงอุณหภูมิที่ใช้น้ำผลฉาวโฉ่ในระบบการสกัดเพราะมีขุ่นด้าน เป็นที่รู้จักกันดี ในการสกัดอุณหภูมิสูงกว่าจุดเมฆ และ / หรือการแยกเวลา ( 2 นาที ) เมื่อปริมาณน้ำของผลสารถึงเฟส และ จึง เล่มสุดท้ายของ [ 25 ] อาร์กิวเมนต์นี้จะขึ้นอยู่กับความจริงที่ว่า เป็นการสกัดอุณหภูมิเพิ่มขึ้น พันธะไฮโดรเจนจะหยุดชะงักชั้นนํา ดังนั้น การขาดน้ำของไมเซลล์ [ 25 ] บนมืออื่น ๆ , มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะเข้าบัญชีที่ใช้ในการสกัดอุณหภูมิสูงมากเกินไปสามารถลดถุงประสิทธิภาพ เพราะเสถียรภาพทางความร้อนของผิวผสม [ 30 ] เป็นสาร lability . จึงสนใจที่จะศึกษาผลของอุณหภูมิในการสกัดการสกัดในระบบการปฏิบัติงาน ตลอดจนในการแยกสารวิเคราะห์พร้อมกับเวลาในช่วง 45 - 75 องศา C และ 10 และ 30 นาที ตามลำดับ การสกัดอุณหภูมิ ) ได้ดำเนินการพิจารณาด้วยเวลา 20 นาที ส่วนเวลาที่ใช้ ถูกดำเนินการที่เหมาะสมอุณหภูมิที่เกิดจากอดีต เมื่ออุณหภูมิเพิ่มขึ้นจาก 45 ถึง 65 องศา C ใช้ดี รวย การแยกเฟสรวมทั้งการเพิ่มขึ้นของสารถูกสังเกต ไม่พบการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญทั้งในการปฏิบัติ CPE หรือต่อการตอบสนองของยาวิเคราะห์ศึกษาที่อุณหภูมิ 65 องศา ดังนั้นการสกัดข้างต้น 65 ° C ถูกเลือกเพื่อใช้ต่อไป สำหรับเวลาการสกัด พบว่า โดยการเพิ่มการตอบสนองเทียบเป็นจำนวนเพิ่มขึ้น ถึงสูงสุดของการศึกษาวิเคราะห์การตอบสนองยาต้านไวรัสที่ 20 นาที ภายหลังที่และยังคงไม่เปลี่ยนแปลง . ดังนั้นในการทดลอง มีการสกัดเวลา 20 นาทีก็เลือกสำหรับการสกัด3.5 . งานวิเคราะห์และวิธีการตรวจสอบโดยเสนอวิธีการวิเคราะห์ประเมินในแง่ของเส้นตรง , การกู้คืนที่ถูกต้องและแม่นยำภายในและระหว่างวัน , เวลาและความไว พลาสมาว่างและในหกชุดต่าง ๆของตัวอย่างพลาสมาโดยการวิเคราะห์ช่องว่างและตัวอย่างที่ได้ถูกขัดขวาง loq ระดับ เส้นโค้งสอบเทียบได้ภายใต้เงื่อนไขดังต่อไปนี้การเสนอวิธีการที่อธิบายไว้ข้างต้น ว่างเป็นพลาสมา C มาตรฐานขบวนการต่าง ๆ concen ยา