Pore formation as caused by peptide

Pore formation as caused by peptide addition was determined by measuring ATP leakage from the bacterial cell using a bioluminescence assay as previously described. S. aureus 8325–4 was grown in TSB at 37°C overnight and then re-inoculated in TSB at 37°C. S. aureus was harvested (3000 RPM, 10 min) at mid-exponential phase (OD546 of 2.5 ± 0.1), washed once in 50 mM potassium phosphate buffer pH 7.0 and once in 50 mM HEPES buffer pH 7.0. The pellet was resuspended in 50 mM HEPES pH 7.0 to a final OD546 of 10. Bacteria were stored on ice and used within 5 h. Bacteria were energized in 50 mM HEPES (pH 7.0) with 0.2% (w/v) glucose and treated with various concentrations of LP5 up to a concentration of 1000 μg/ml.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผู้แต่งรูขุมขนเป็นสาเหตุเพิ่มเพปไทด์ที่ถูกกำหนด โดยการวัดการรั่วไหลของ ATP จากเซลล์แบคทีเรียที่ใช้ทดสอบ bioluminescence อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ หมอเทศข้างลาย S. 8325-4 โตใน TSB ที่ 37° C ค้างคืน และจากนั้น อีก inoculated ใน TSB ที่ 37 องศาเซลเซียส ถูกหมอเทศข้างลาย S. (3000 RPM, 10 นาที) เก็บเกี่ยวที่ระยะกลางเนน (OD546 ของ 2.5 ± 0.1), ล้างเมื่อใน 50 มม.โพแทสเซียมฟอสเฟต บัฟเฟอร์ pH 7.0 และหนึ่งใน 50 มม. HEPES บัฟเฟอร์ pH 7.0 เม็ดถูก resuspended ใน 50 มม. HEPES pH 7.0 OD546 สุดท้าย 10 แบคทีเรียถูกเก็บไว้ในน้ำแข็ง และใช้ภายใน 5 h. แบคทีเรียพลังงาน 50 มม. HEPES (pH 7.0) กับกลูโคส 0.2% (w/v) และถือว่า มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของ LP5 ถึงเข้มข้น 1000 μg/ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ก่อตัวเป็นรูพรุนที่เกิดจากการนอกจากนี้เปปไทด์ที่ถูกกำหนดโดยการวัดการรั่วไหลของเอทีพีจากเซลล์ของแบคทีเรียที่ใช้ทดสอบชีวิตเรืองแสงตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ เชื้อ S. aureus 8325-4 ถูกปลูกใน TSB ที่ 37 ° C ในชั่วข้ามคืนแล้วกลับเชื้อใน TSB ที่ 37 ° CS aureus เก็บเกี่ยว (3000 รอบต่อนาที, 10 นาที) ในระยะกลางชี้แจง (OD546 2.5 ± 0.1) ล้าง ครั้งเดียวใน 50 มิลลิโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 และครั้งเดียวใน 50 มิลลิ HEPES บัฟเฟอร์ pH 7.0 เม็ดถูก resuspended ใน 50 มิลลิ HEPES ค่า pH 7.0 ที่จะเป็นครั้งสุดท้ายของ OD546 10. แบคทีเรียถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งและใช้ภายใน 5 ชั่​​วโมง แบคทีเรียถูกลุ้นใน 50 มิลลิ HEPES (pH 7.0) ที่ 0.2% (w / v) กลูโคสและได้รับการรักษาที่มีความเข้มข้นต่างๆของ LP5 ขึ้นกับความเข้มข้นของ 1,000 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การก่อตัวเป็นรูที่เกิดจากเปปไทด์ถูกกำหนดโดยวัดจากเอทีพี รั่วจากเซลล์แบคทีเรียโดยใช้ไบโอลูมิเนสเซน ( ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ S . aureus 8325 – 4 ปลูกใน TSB 37 ° C ในชั่วข้ามคืนและจากนั้นอีกครั้งใน TSB 37 ° C เชื้อ S . aureus เก็บเกี่ยว ( 3000 รอบต่อนาที 10 นาที ) ที่ชี้แจงระยะกลาง ( od546 2.5  ±  0.1 )ซักครั้ง ใน 50 mm โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 และหนึ่งใน 50 มิลฮีเปสบัฟเฟอร์ pH 7.0 . เม็ดเป็น resuspended 50 มิลฮีเปส pH 7.0 ไป od546 สุดท้าย 10 แบคทีเรียที่ถูกเก็บไว้ในน้ำแข็งและใช้ภายใน 5 ชั่วโมง แบคทีเรียเป็น energized ใน 50 มิลฮีเปส ( pH 7.0 ) 0.2% ( w / v ) กลูโคสและการรักษาที่มีความเข้มข้นต่าง ๆ ของ lp5 ถึงระดับ 1 , 000 μกรัม / มิลลิลิตร