2.4. Pharmacological studiesThe eff

2.4. Pharmacological studies

The effect of LFME, NBF-LFME on the intestinal responses of guinea pig ileum was examined. The contractile responses to ACh (a standard cholinergic agonist; 0.01-100 μM), LFME (0.25-16 mg/mL) and NBF-LFME (0.065-4 mg/mL) were recorded both before and 15 minutes following addition of 1 μM atropine (a non-selective muscarinic blocker) to the tissue bath.

The effect on the acetylcholine esterase enzyme (AChE) and ganglionic nicotinic receptors was investigated using three concentrations of either ACh (0.01, 0.02 and 0.03 μM), LFME (0.25, 0.5 and 1 mg/mL) or NBF-LFME (0.125, 0.25 and 0.5 mg/mL). The contractile effects induced by the standard, extract and fraction were recorded before and 15 minutes following addition of either 0.05 μM neostigmine (a cholinesterase inhibitor) or 100 μM hexamethonium (a ganglionic nicotinic blocker) to the tissue bath.

2.5. Statistical analysis

All data are expressed in terms of mean ± standard error mean (S.E.M). The statistical analysis of the data was performed using one-way analysis of variance (ANOVA) followed by Bonferroni/Dunnett (all mean) post hoc test (SuperANOVA, Abacus Concepts, Inc., Berkeley, CA, USA). The differences between the means were considered significant at p=0.05, 0.01 and 0.001. The number of determinations n = 8. The median effective concentration (EC50) was analyzed by GraphPad Prism version 5, USA.

3. Results
Our findings clearly showed that the addition of graded concentrations of either LFME, NBF-LFME to the organ bath produced concentration-dependent contractile responses in the ileal segments of guinea pig which was quite similar in pattern to that obtained using ACh (Figure 1B and 1C). ACh contractile responses were significantly abolished with 1 μM atropine pretreatment of the guinea pig ileum preparations (p < 0.001-0.01; Figure 1 and Figure 2vs. 2B). Similarly, the contractile effects of LFME and NBF-LFME were significantly inhibited in tissue segments incubated with 1 μM atropine at organ bath concentrations of 0.5-16 mg/mL and 0.25-4 mg/mL, respectively (p < 0.001-0.01; Figure 1 and Figure 2vs. 2F and 2Ivs. 2J, respectively). Similarly, the EC50 values obtained from the concentration-response curves of ACh, LFME and NBF-LFME were 0.584 μM, 2.0 mg/mL and 2.4 mg/mL, respectively.

Effects of increasing concentrations of (A) acetylcholine (ACh), (B) Loranthus ...
Figure 1.
Effects of increasing concentrations of (A) acetylcholine (ACh), (B) Loranthus ferrugineus methanol extract (LFME) and (C) n-butanol fraction of Loranthus ferrugineus methanol extract (NBF-LFME) on the contrac-tile response in isolated guinea pig ileum subjected to pretreatment with 1 μM atropine. *p < 0.01 and †p < 0.001.
Figure options
Full-size image (214 K)
Figure 2.
Effects of increasing concentrations of acetylcholine (ACh) on the contractile response in isolated guinea pig ileum, from a typical tracer in which each centimeter corresponds to 1 minute and 1 g tension. (A) without pretreatment, (B) with 1 μM atropine pretreatment, (C) with 0.05 μM neostigmine pretreatment and (D) with 100 μM hexamethonium pretreatment. The addition of increasing concentrations of Loranthus ferrugineus methanol extract (LFME) is also shown: (E) without pretreatment, (F) with 1 μM atropine pretreatment, (G) with 0.05 μM neostigmine pretreatment and (H) with 100 μM hexamethonium pretreatment. Increasing concentrations of n-butanol fraction of L. ferrugineus methanol extract (NBF-LFME) also produced a response in guinea pig ileum: (I) without pretreatment, (J) with 1 μM atropine pretreatment, (K) with 0.05 μM neostigmine pretreatment and (L) with 100 μM hexamethonium pretreatment.
Figure options
Data from typical traces demonstrated that the incubation of the ileal segments with 0.05 μM neostigmine markedly enhanced the contractile responses of the lower concentrations (0.01-0.03 M) of ACh (Figure 2Avs. 2C). LFME (0.25-1 mg/mL; Figure 2Evs. 2G) and NBF-LFME (0.125-0.5 mg/mL; Figure 2Ivs. 2K), evidently showed a similar pattern of potentiation in the contractile responses. However, no observable changes in the contractile responses of ACh ( Figure 2Avs. 2D), LFME ( Figure 2Evs. 2H) and NBF-LFME ( Figure 2Ivs. 2L) were seen upon the incubation of the ileal preparations with 100 μM hexamethonium

4. Discussion
This study examined the effects of LFME and its active fraction NBF-LFME on isolated guinea pig ileum in the absence and presence of various antagonists. Different mechanisms are involved in the contraction of GI tract smooth muscle. These include the agonistic action of the parasympathetic neuro-transmitter ACh [9 and 10] and the excitatory activity of the autacoid histamine [10 and 11]. Thus, it is well known that cholinergic and histaminergic transmission is involved in the regulation of intestinal motility. Drugs that can influence cholinergic or histaminergic transmission by acting on their receptors or by affecting the relea

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การศึกษาทางเภสัชวิทยา

ผลของ LFME, NBF-LFME ในการตอบสนองในลำไส้กินี ileum หมูถูกตรวจสอบ การตอบสนองที่จะหดตัวเอซี (เป็นตัวเอก cholinergic มาตรฐาน 0.01-100 ไมครอน), LFME (0.25-16 mg / ml) และ NBF-LFME (0.065-4 mg / ml) ถูกบันทึกไว้ทั้งก่อนและ 15 นาทีต่อไปนอกเหนือจาก 1 ไมครอน atropine (ไม่ใช่เลือก Blocker muscarinic) ไปอาบน้ำเนื้อเยื่อ.

ผลใน acetylcholine esterase เอนไซม์ (เจ็บ) และ nicotinic ผู้รับ ganglionic ถูกตรวจสอบโดยใช้สามระดับความเข้มข้นของทั้งเอซี (0.01, 0.02 และ 0.03 ไมครอน), LFME (0.25, 0.5 และ 1 mg / ml) หรือ NBF-LFME (0.125, 0.25 และ 0.5 mg / ml) ผลกระทบที่เกิดจากการหดตัวมาตรฐานสารสกัดและส่วนที่ถูกบันทึกไว้ก่อนและ 15 นาทีต่อไปนอกจากนี้ทั้ง 0.05 ไมครอน neostigmine (ยับยั้งแท้จริง) หรือ 100 ไมครอน hexamethonium (ป้องกัน nicotinic ganglionic) ไปอาบน้ำเนื้อเยื่อ.

2.5 การวิเคราะห์สถิติ

ข้อมูลทั้งหมดจะถูกแสดงในแง่ของค่าเฉลี่ย±หมายถึงข้อผิดพลาดมาตรฐาน (SEM) การวิเคราะห์ทางสถิติของข้อมูลที่ได้ดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ทางเดียวของความแปรปรวน (ANOVA) ตามด้วย Bonferroni / Dunnett (ทั้งหมดหมายความว่า) โพสต์เฉพาะกิจการทดสอบ (SuperANOVA ลูกคิดแนวคิด, Inc, Berkeley, CA, USA) ความแตกต่างระหว่างวิธีการที่ได้รับการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญที่ p = 0.05, 0.01 และ 0.001 จำนวนของการหาความ n = 8. เฉลี่ยความเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพ (EC50) คือการวิเคราะห์โดยปริซึม GraphPad รุ่น 5, USA.

3 ผลการ
ค้นพบของเราแสดงให้เห็นอย่างชัดเจนว่าการเพิ่มขึ้นของความเข้มข้นอย่างช้า ๆ ของทั้ง LFME, NBF-LFME ไปอาบน้ำอวัยวะผลิตเข้มข้นขึ้นอยู่กับการตอบสนองที่หดตัวในกลุ่ม ileal ของหนูตะเภาซึ่งค่อนข้างคล้ายกันในรูปแบบที่ได้รับใช้เอซี (รูปที่ 1B และ 1C) อ๊ะการหดตัวถูกยกเลิกอย่างมีนัยสำคัญ 1 ไมครอน atropine การปรับสภาพของการเตรียมการตะเภา ileum (p <0.001-0.01. รูปที่ 1 และรูปที่ 2vs 2B) ในทำนองเดียวกันผลกระทบที่หดตัวของ LFME และ NBF-LFME ถูกยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญในส่วนของเนื้อเยื่อบ่มกับ 1 ไมครอน atropine อาบน้ำที่ระดับความเข้มข้นของอวัยวะ 0.5-16 mg / ml และ 0.25-4 mg / ml ตามลำดับ (p <0.001-0.01; เต็มตัว ที่ 1 และรูป 2vs. 2F และ 2Ivs. 2J ตามลำดับ) ในทำนองเดียวกันค่า EC50 ที่ได้จากเส้นโค้งความเข้มข้นของการตอบสนองของเอซี, LFME และ NBF-LFME เป็น 0.584 ไมครอน 2.0 mg / ml และ 2.4 mg / ml ตามลำดับ.

ผลกระทบของการเพิ่มความเข้มข้นของ (A) acetylcholine (เอซี), ( B) Loranthus ...
รูปที่ 1
ผลกระทบของการเพิ่มความเข้มข้นของ (A) acetylcholine (เอซี), (B) Loranthus ferrugineus สารสกัดเมทานอล (LFME) และ (ค) ส่วน n-butanol ของ Loranthus ferrugineus สารสกัดเมทานอล (NBF-LFME) ในการตอบสนอง Contrac กระเบื้องในแยก ileum ตะเภาภายใต้การปรับสภาพด้วย 1 ไมครอน atropine * p <0.01 และ† p <0.001.
ตัวเลือกรูป
แบบขนาดภาพ (214 K)
รูปที่ 2
ผลกระทบของการเพิ่มความเข้มข้นของ acetylcholine (เอซี) ในการตอบสนองต่อการหดตัวในแยก ileum ตะเภาจาก Tracer ทั่วไปซึ่งในแต่ละเซนติเมตร สอดคล้องกับ 1 นาทีและ 1 กรัมความตึงเครียด (A) โดยไม่ต้องปรับสภาพ (B) 1 ไมครอน atropine ปรับสภาพ (C) 0.05 ไมครอนและปรับสภาพ neostigmine (D) 100 ไมครอน hexamethonium การปรับสภาพ นอกเหนือจากการเพิ่มความเข้มข้นของสารสกัดจาก Loranthus ferrugineus เมทานอล (LFME) นอกจากนี้ยังมีการแสดง: (E) โดยไม่ต้องปรับสภาพ (F) 1 ไมครอน atropine ปรับสภาพ (G) กับ 0.05 ไมครอนและปรับสภาพ neostigmine (H) 100 ไมครอน hexamethonium การปรับสภาพ ความเข้มข้นของส่วน N-บิวทานอแอล ferrugineus สารสกัดที่เพิ่มขึ้น (NBF-LFME) ยังผลิตการตอบสนองใน ileum ตะเภา: (i) โดยไม่ต้องปรับสภาพ (ญ) 1 ไมครอน atropine ปรับสภาพ (k) 0.05 ไมครอน neostigmine การปรับสภาพ และ (L) 100 ไมครอน hexamethonium ปรับสภาพ.
ตัวเลือกรูปที่
ข้อมูลจากร่องรอยทั่วไปแสดงให้เห็นว่าการบ่มในกลุ่ม ileal 0.05 ไมครอน neostigmine เด่นชัดเพิ่มการหดตัวของความเข้มข้นต่ำ (0.01-0.03 เมตร) เอซี (รูป 2Avs. 2C ) LFME (0.25-1 mg / ml. รูป 2Evs 2G) และ NBF-LFME (0.125-0.5 mg / ml. รูป 2Ivs 2K) อย่างเห็นได้ชัดแสดงให้เห็นว่ารูปแบบของการ potentiation ที่คล้ายกันในการตอบสนองหด อย่างไรก็ตามไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่สังเกตได้ในการหดตัวของเอซี (รูป 2Avs. 2D) LFME (รูป 2Evs. 2H) และ NBF-LFME (รูป 2Ivs. 2L) ได้เห็นเมื่อบ่มเตรียม ileal 100 ไมครอน hexamethonium

4 การอภิปราย
การศึกษาครั้งนี้การตรวจสอบผลกระทบของ LFME และส่วนที่ใช้งาน NBF-LFME บนแยก ileum หนูตะเภาในกรณีที่ไม่มีและการปรากฏตัวของคู่อริต่างๆ กลไกที่แตกต่างกันมีส่วนร่วมในการหดตัวของกล้ามเนื้อเรียบทางเดินอาหาร เหล่านี้รวมถึงการดำเนินการของ agonistic กระซิกระบบประสาทส่งสัญญาณเอซี [9 และ 10] และกิจกรรม excitatory ของฮีสตามี autacoid [10 และ 11] ดังนั้นจึงเป็นที่รู้จักกันดีว่า cholinergic และการส่ง histaminergic มีส่วนเกี่ยวข้องในการควบคุมการเคลื่อนไหวของลำไส้ ยาเสพติดที่สามารถมีอิทธิพลต่อ cholinergic หรือการส่ง histaminergic โดยทำหน้าที่ในการรับของพวกเขาหรือโดยการส่งผลกระทบต่อ relea

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . เภสัชวิทยาศาสตร์ผลของ lfme nbf-lfme , ในการตอบสนองของลำไส้ในหนูทดลองได้ตรวจสอบ การตอบสนองของลำตัวเพื่อ ACH ( มาตรฐานโคลิเนอร์จิกอะโกนิสต์ ; 0.01-100 μ M ) lfme ( 0.25-16 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) และ nbf-lfme ( 0.065-4 mg / ml ) ที่ถูกบันทึกไว้ก่อน 15 นาทีต่อไปนี้นอกเหนือจาก atropine 1 μ ( ไม่เลือก muscarinic บล็อกเกอร์ ) เนื้อเยื่ออาบผลต่อเอนไซม์อะเซทิลโคลีน เอสเทอเรส ( ปวด ) และปมประสาทารสอบสวนโดยใช้ตัวรับสามความเข้มข้นของ ACH ( 0.01 , 0.02 , 0.03 และμ M ) lfme ( 0.25 , 0.5 และ 1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) หรือ nbf-lfme ( 0.125 , 0.25 และ 0.5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) ที่ได้ผลและมาตรฐาน , สารสกัดและส่วนที่ถูกบันทึกไว้ก่อน 15 นาทีต่อไปนี้เพิ่มให้ 0.05 μ M neostigmine ( cholinesterase inhibitor ) หรือ 100 μ M hexamethonium ( ปมประสาทารบล็อกเกอร์ ) เนื้อเยื่ออาบ2.5 สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลข้อมูลทั้งหมดจะแสดงในแง่ของหมายถึง±หมายถึงค่าความคลาดเคลื่อนมาตรฐาน ( s.e.m ) สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลคือ วิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว ( ANOVA ) รองลงมา คือ บอนเฟอร์โรนี / Dunnett ( หมายถึง ) Post Hoc Test ( superanova แนวคิด ลูกคิดอิงค์ , Berkeley , CA , USA ) ความแตกต่างระหว่างค่าเฉลี่ยระดับปานกลาง อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติที่ p = 0.05 , 0.01 และ 0.001 . จํานวนหา n = 8 ความเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพเฉลี่ย ( ec50 ) โดยใช้ปริซึม graphpad รุ่น 5 , สหรัฐอเมริกา3 . ผลลัพธ์ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่า นอกเหนือจากระดับความเข้มข้นของ lfme nbf-lfme , ไปยังอวัยวะบาทขึ้นอยู่กับปริมาณการผลิตได้ในส่วน ileal ของหนูตะเภาที่ค่อนข้างคล้ายกันในรูปแบบเพื่อที่ได้รับใช้ ACH ( 1B รูป 1C ) แต่การตอบสนองอย่างมีนัยสำคัญที่ยกเลิก 1 μ M atropine การ ileum หนูตะเภาการเตรียม ( P < 0.001-0.01 ; รูปที่ 1 และรูปที่ 2vs . 2B ) ส่วนผลของ lfme หดตัวและยับยั้ง nbf-lfme อย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มเนื้อเยื่อแยก 1 μ M atropine ในอวัยวะนํ้าความเข้มข้นของ 0.5-16 มก. / มล. มก. / มล. และ 0.25-4 ตามลำดับ ( P < 0.001-0.01 ; รูปที่ 1 และรูปที่ 2vs . ห้อง 2F และ 2ivs . 2j ตามลำดับ ) ส่วน ec50 ค่าที่ได้จากความเข้มข้นของการตอบสนองของระบบ lfme nbf-lfme เส้นโค้ง , และมี 0.584 μ m , 2.0 และ 2.4 mg / ml มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ตามลำดับผลของการเพิ่มความเข้มข้นของ acetylcholine ( ACh ) ( a ) , ( b ) loranthus . . . . . . .รูปที่ 1ผลของการเพิ่มความเข้มข้นของ acetylcholine ( ACh ) ( ก ) ( ข ) loranthus ferrugineus เมทานอล ( lfme ) และ ( c ) n-butanol เศษส่วนของ loranthus ferrugineus เมทานอล ( nbf-lfme ) บนคอนแทร็กซ์ กระเบื้องในการตอบสนองต่อแยกหนูตะเภา ileum ภายใต้การปีน ม. 1 μ . * p < 0.01 และ p < 0.001 ภีษมะ .เลือกรูปภาพขนาดเต็ม ( 214 K )รูปที่ 2ผลของการเพิ่มความเข้มข้นของ acetylcholine ( ACh ) บนลำตัวในการแยกหนูตะเภาเลียม จากปกติติดตาม ซึ่งในแต่ละเซนติเมตรสอดคล้องกับ 1 นาทีและแรง 1 กรัม ( 1 ) โดยไม่ต้องทำ ( 2 ) 1 μ M ( C ) การปีน , การ neostigmine ) μ M ( D ) กับ 100 μ M hexamethonium ก่อน . นอกเหนือจากการเพิ่มความเข้มข้นของ loranthus ferrugineus เมทานอล ( lfme ) ยังแสดง : ( E ) โดยไม่ต้องทำ ( F ) กับ 1 μ atropine การ M ( g ) M ) μ neostigmine การ ( H ) กับ 100 μ M hexamethonium ก่อน . การเพิ่มความเข้มข้นของ n-butanol เศษส่วนของ L . ferrugineus เมทานอล ( nbf-lfme ) ที่ตอบสนองในหนูทดลองเลียม : ( ฉัน ) โดยไม่ต้องทำ ( J ) M 1 μ atropine การ ( k ) M ) μ neostigmine การ ( L ) กับ 100 μ M hexamethonium ก่อน .เลือกรูปข้อมูลจากร่องรอยโดยทั่วไปแสดงให้เห็นว่าระยะเวลาของกลุ่ม ileal ) μ M neostigmine เด่นชัด เพิ่มการตอบสนองที่หดตัวได้ในความเข้มข้นต่ำ ( 0.01-0.03 m ) ของระบบ ( รูปที่ 2avs . 2 ) lfme ( 0.25-1 mg / ml ; รูป 2evs . 2G ) และ nbf-lfme ( 0.125-0.5 mg / ml ; รูป 2ivs . 2 ) โดยแสดงลักษณะของเอ็น - ในการตอบสนองที่หดตัวได้ แต่ไม่สังเกตการเปลี่ยนแปลงในการตอบสนองของระบบ ( รูปที่ 2avs . 2 ) lfme ( รูป 2evs . 2H ) และ nbf-lfme ( รูป 2ivs . 2L ) ได้เห็นเมื่อบ่มเพาะของการเตรียม ileal 100 μ M hexamethonium4 . การอภิปรายงานวิจัยนี้มุ่งศึกษาผลของ lfme nbf-lfme เศษส่วนและใช้งานอยู่ในส่วนแยกหนูตะเภาในการขาดงานและการปรากฏตัวของประเภทต่างๆ เป็นกลไกที่แตกต่างกันที่เกี่ยวข้องกับการหดตัวของกล้ามเนื้อเรียบที่ทางเดินอาหาร . เหล่านี้รวมถึงการส่งสัญญาณประสาทพาราซิมพาเทติก agonistic ของ ACH [ 8 ] และกิจกรรม excitatory ของ autacoid histamine [ 10 และ 11 ) ดังนั้น มันเป็นที่รู้จักกันดีว่าชนะขาดลอย histaminergic ส่งและมีส่วนร่วมในการควบคุมการเคลื่อนที่ของลำไส้ . ยาที่สามารถมีอิทธิพลต่อชนะขาดลอย หรือ histaminergic ส่งโดยการแสดงบนตัวรับของพวกเขาหรือโดย