2.3. Confocal laser scanning micros

2.3. Confocal laser scanning microscopy (CLSM)
The labelled samples were analysed with a Leica TCS SP confocal
laser-scanning microscope (Leica Microsystem, Heidelberg,
Germany) equipped with argon and helium/neon laser. Photomultipliers
parameters were adjusted to achieve the maximum signal
from each fluorochrome, but at the same time trying to keep the
noise signal generated by the soil particles and by the algal cells
as low as possible. Up to three FISH probes were applied in parallel
on the samples and signals were measured simultaneously.
The ranges of wavelength set to detect the emission signal of the
fluorochromes labelling the FISH probes were the following: Cy3
at 560–610 nm, Cy5 at 660–700 nm, 6-FAM and FITC at 470–530.
Stacks of 0.5 m slices were scanned through the 30 m thick
section and their maximum projections were converted into 2D
pictures. The 3D-reconstructions of 2D stacks and the different section
levels to characterize the size and the position of the bacteria
colonies were performed with the software AMIRA v. 5.2 (Visage
Imaging GmbH). No image artifacts were present or needed to be
corrected.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. เลเซอร์ confocal สแกน microscopy (CLSM)ตัวอย่างมันมี analysed ด้วย SP TCS ไลมี confocalกล้องจุลทรรศน์สแกนเลเซอร์ (Microsystem ไล ไฮเดลเบิร์กเยอรมนี) พร้อมอาร์กอน และฮีเลียม/นีออนเลเซอร์ Photomultipliersพารามิเตอร์ที่ถูกปรับปรุงเพื่อให้ได้สัญญาณสูงสุดจาก fluorochrome ละ แต่ขณะเดียวกันพยายามที่จะให้การสัญญาณเสียงที่สร้างขึ้น โดยอนุภาคดิน และเซลล์ algalต่ำสุดที่เป็นไป ถึงสามปลา คลิปปากตะเข้ถูกนำไปใช้ควบคู่กันตัวอย่างและสัญญาณที่วัดพร้อมกันตั้งค่าตรวจพบสัญญาณปล่อยก๊าซของช่วงของความยาวคลื่นfluorochromes ฉลากคลิปปากตะเข้ปลาได้ต่อไปนี้: Cy3ที่ 560 – 610 nm, Cy5 ที่ 660-700 nm, 6 FAM และ FITC ที่ 470 – 530กอง 0.5 m ชิ้นถูกสแกนผ่าน 30 เมตรหนาส่วนและประมาณการสูงสุดได้ถูกแปลงเป็น 2Dรูปภาพ ศึกษา 3D 2D กองและส่วนแตกต่างกันระดับต้องกำหนดลักษณะขนาดและตำแหน่งของแบคทีเรียอาณานิคมได้ดำเนินการกับซอฟต์แวร์ AMIRA v. 5.2 (Visageภาพ GmbH) วัตถุไม่มีรูปไม่มี หรือจำเป็นต้องแก้ไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 กล้องจุลทรรศน์ confocal เลเซอร์สแกน (CLSM)
กลุ่มตัวอย่างที่มีข้อความถูกนำมาวิเคราะห์กับ Leica TCS SP confocal
กล้องจุลทรรศน์เลเซอร์สแกน (Leica ไมโครไฮเดลเบิร์ก,
เยอรมนี) พร้อมกับอาร์กอนฮีเลียมและ / นีออนเลเซอร์ Photomultipliers
พารามิเตอร์มีการปรับเพื่อให้บรรลุสัญญาณสูงสุดจาก fluorochrome แต่ละ แต่ในเวลาเดียวกันพยายามที่จะให้สัญญาณเสียงรบกวนที่เกิดจากอนุภาคดินและโดยเซลล์สาหร่ายที่ต่ำที่สุดเท่าที่เป็นไปได้ ถึงสาม probes ปลาถูกนำไปใช้ในแบบคู่ขนานในตัวอย่างและสัญญาณวัดพร้อมกัน. ช่วงความยาวคลื่นตั้งเพื่อตรวจจับสัญญาณการปล่อยของfluorochromes การติดฉลากฟิวส์ปลามีดังต่อไปนี้: Cy3 ที่ 560-610 นาโนเมตร Cy5 ที่ 660- 700 นาโนเมตร 6 FAM และ FITC ที่ 470-530. กอง 0.5? ชิ้นเมตรถูกสแกนผ่าน 30 เมตรหนาส่วนและประมาณการสูงสุดของพวกเขาถูกแปลงเป็น2D ภาพ ไทปัน-3 มิติของกอง 2D และส่วนที่แตกต่างกันในระดับที่จะอธิบายลักษณะขนาดและตำแหน่งของแบคทีเรียอาณานิคมได้ดำเนินการกับซอฟต์แวร์AMIRA v. 5.2 (Visage Imaging GmbH) สิ่งประดิษฐ์ที่ยังไม่มีภาพที่อยู่ในปัจจุบันหรือจำเป็นต้องได้รับการแก้ไข

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 ด้วยเลเซอร์สแกนกล้องจุลทรรศน์ ( clsm )
labelled วิเคราะห์กับ SA SP ด้วยเลเซอร์ Leica ( ไลก้า ไมโครซิสเต็มส์กล้องจุลทรรศน์
,
Germany Heidelberg ) อุปกรณ์และฮีเลียมนีออนอาร์กอน / เลเซอร์ โฟโต้มัลติไพเ ร์

ค่าปรับให้ได้สัญญาณสูงสุดจากแต่ละฟลู โรโครม แต่ในเวลาเดียวกันพยายามที่จะเก็บ
เสียงสัญญาณที่สร้างขึ้นโดยอนุภาคดินและโดยสาหร่ายเซลล์
น้อยที่สุดเท่าที่จะทำได้ ถึงปลา 3 ง่ามมาใช้ขนาน
กับตัวอย่างและสัญญาณที่วัดพร้อมกัน
ช่วงของความยาวคลื่นชุดตรวจสอบการปล่อยสัญญาณของ
fluorochromes ปลาและฉลากมีดังต่อไปนี้ cy3
ที่ 560 – 610 nm cy5 ที่ 660 – 700 นาโนเมตรและที่ 6-fam fitc 470 – 530 .
กอง  0.5 M ชิ้นถูกสแกนผ่าน 30 เมตร หนา 
ส่วนและประมาณการสูงสุดของพวกเขาถูกแปลงเป็นภาพ 2 มิติ

3 มิติการสร้างใหม่ 2 กอง และส่วนที่แตกต่างกัน
ระดับลักษณะขนาดและตำแหน่งของแบคทีเรีย
อาณานิคมได้กับซอฟต์แวร์ร่าโวลต์ 5.2 ( GmbH ภาพใบหน้า
) ไม่มีสิ่งประดิษฐ์ภาพอยู่หรือต้อง
แก้ไข