Sperm motility and sperm concentration were objectively assayed as previously described (Santiago Moreno et al., 2012) using a computer aided sperm analyses (CASA) system coupled to a phase contrast contrast microscope (Nikon Eclipse model 50i; negative contrast) and employing Sperm Class Analyzer (SCA R ) v.4.0 software (Microptic S.L., Barcelona, Spain). Sperm samples were diluted 1:41 (v:v) in Lake and Ravie medium and loaded onto a warmed (38oC) 20 μm LejaR 8-chamber slide (Leja Products B.V., Nieuw-Vennep, The Netherlands). The percentage of immotile sperm (i.e., not moving at all), the percentage of sperm showing non-progressive motility (sperm moving their tails but not moving forward, or swimming slowly but in a curve) and the percentage showing progressive motility (sperm swimming quickly forward in a straight line) were recorded. Sperm movement characteristics - straight-line velocity (VSL), curvilinear velocity (VCL), average path velocity (VAP) - were also analyzed by CASA. According to their general velocity, spermatozoa were classified as slow (50 μm/sec). The amplitude of lateral head displacement (ALH) and beat-cross frequency (BCF) were also analyzed. A minimum of three fields and 500 sperm tracks were examined at 10x for each sample chamber (image acquisition rate 25 frames/s).
ความเข้มข้นของอสุจิและอสุจิ motility ได้เป็น assayed เป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Santiago Moreno et al., 2012) โดยใช้อสุจิคอมพิวเตอร์ช่วยวิเคราะห์ระบบ (CASA) ควบคู่กับระยะความคมชัดความคมชัดกล้องจุลทรรศน์ (คราส Nikon รุ่น 50i ลบคม) และใช้ซอฟต์แวร์ v.4.0 วิเคราะห์ชั้นสเปิร์ม (SCA R) (เย็น Microptic บาร์เซโลนา สเปน) ตัวอย่างอสุจิแตกออก 1:41 (v: v) ในทะเลสาบและแรมเรวี และโหลดบน warmed (38oC) 20 μm LejaR 8 หอภาพนิ่ง (Leja ผลิตภัณฑ์ B.V., Nieuw Vennep ประเทศเนเธอร์แลนด์) เปอร์เซ็นต์ของสเปิร์ม immotile (เช่น ไม่เคลื่อนที่), บันทึกเปอร์เซ็นต์ของสเปิร์มแสดง motility ไม่ก้าวหน้า (จ๊ากย้ายหางแต่ไม่ก้าวไปข้างหน้าของพวกเขา หรือว่ายน้ำช้า ๆ แต่ ในเส้นโค้ง) และเปอร์เซ็นต์แสดง motility ก้าวหน้า (อสุจิว่ายน้ำอย่างรวดเร็วไปข้างหน้าในแนวเส้นตรง) ยังมีวิเคราะห์ลักษณะความเคลื่อนไหวของสเปิร์ม -เส้นตรงความเร็ว (VSL), curvilinear ความเร็ว (VCL), เส้นค่าเฉลี่ยความเร็ว (โกวัป) - โดยคาซา ตามความเร็วของพวกเขาทั่วไป spermatozoa ถูกจัดเป็นช้า (< μm 10 วินาที), ปานกลาง (μm 10 – 50 วินาที) หรืออย่างรวดเร็ว (> 50 μm/sec) นอกจากนี้ยังได้วิเคราะห์คลื่นใหญ่ด้านข้างแทน (ALH) และข้ามจังหวะความถี่ (BCF) อย่างน้อยสามฟิลด์และแทร็คสเปิร์ม 500 ถูกตรวจสอบที่ x 10 สำหรับแต่ละห้องตัวอย่าง (ภาพซื้ออัตรา 25 เฟรม/s)
การแปล กรุณารอสักครู่..