Microorganism and inocula preparati

Microorganism and inocula preparation
The strain of S. cerevisiae was isolated and identified by
Valverde, Marín-Iniesta, and Calvo (2010) and kept at 80
C in
Microbank™ vials (Pro-labo Diagnostics, Neston, Wirrall, UK).
Every two months, one of the vials was opened and the stock culture
was grown in Trypticase Soy Broth (TSB; Cultimed, Barcelona,
Spain) for 24 h at 25
C. After, it was streaked onto Standard
Methods Agar (SMA; Cultimed, Panreac Barcelona, Spain) containing
chloramphenicol (Ch) at 0.1 g l1 (Tournas, Stack, Mislivec,
Koch, & Bandler, 1998). The S. cerevisiae inocula were prepared by
transferring a colony obtained in SMA-Ch plates to TSB, which was
incubated for 24 h at 25
C before being stored at 20
C in a solution
of 40% TSB and 60% glycerol until use. The fresh cultures for
the experiments were made by incubating one loopful of pure
culture in TSB for 24 h at 25
C. The inocula were standardized by
dilution in TSB until an optical density (OD) of 0.1 at 600 nm
(Nicolet Evolution 300, Thermo Electron Corporation VIS-UV
spectrophotometer) was reached to obtain a yeast concentration
of 107 cfu ml1
. The yeast populations were estimated by spreading
suitable diluted aliquots onto SMA-Ch plates, followed by incubation
at 25
C for 48 h.
2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การเตรียมเชื้อจุลินทรีย์และ inoculaระบุ และแยกสายพันธุ์ของ S. cerevisiaeบายา นอว์ Marín และรายการนิทรรศการ (2010) และเก็บไว้ที่ 80 C ในMicrobank™ ขวด (โปร-labo การวินิจฉัย Neston, Wirrall, UK)ทุกสองเดือน หนึ่งขวดที่เปิด และวัฒนธรรมหุ้นถูกปลูกในน้ำซุปถั่วเหลือง Trypticase (TSB Cultimed บาร์เซโลนาสเปน) สำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 25 c หลังจาก มันลายบนมาตรฐานวุ้นวิธี (SMA Cultimed, Panreac บาร์เซโลนา สเปน) ที่ประกอบด้วยคคัส (Ch) ที่ l1 0.1 กรัม (Tournas กอง Mislivecสาขา & Bandler, 1998) ใน S. cerevisiae inocula ณที่นี้โอนอาณานิคมได้รับในแผ่น SMA Ch เพื่อ TSB ซึ่งเป็นได้รับการกก 24 ชม.ที่อุณหภูมิ 25 ก่อนที่จะมีการเก็บที่อุณหภูมิ 20 C ในการแก้ปัญหาของ 40% 60% และ TSB กลีเซอรอลจนกว่าจะใช้ วัฒนธรรมสดสำหรับทำการทดลอง โดย incubating loopful หนึ่งของบริสุทธิ์วัฒนธรรมใน TSB สำหรับ 24 ชั่วโมงที่ 25 c Inocula ได้มาตรฐานโดยเจือจางใน TSB จนความหนาแน่นออปติคอล (OD) 0.1 ที่ 600 นาโนเมตร(วิวัฒนาการ Nicolet 300 เทอร์โม คอร์ปอเรชั่นอิเล็กตรอน VIS-UVสเปค) ก็มาถึงการขอรับความเข้มข้นของยีสต์ของ 107 cfu ml1. ประชากรยีสต์ถูกประเมิน โดยการกระจายaliquots เจือจางเหมาะลงบนแผ่น SMA Ch ตาม ด้วยกกไข่25 c เป็นเวลา 48 ชั่วโมง2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุลินทรีย์และ inocula เตรียม
ความเครียดของ S. cerevisiae ถูกแยกและระบุ
Valverde ริน-Iniesta และ Calvo (2010) และเก็บไว้ที่ 80 องศาเซลเซียสใน
Microbank ขวด™ (Pro-Labo วินิจฉัยเนสตัน Wirrall สหราชอาณาจักร).
ทุกคน สองเดือนหนึ่งขวดถูกเปิดและวัฒนธรรมหุ้น
ถูกปลูกในน้ำซุปถั่วเหลือง Trypticase (TSB; Cultimed, บาร์เซโลนา,
สเปน) เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 25 C? หลังจากที่มันถูกลายลงบนมาตรฐาน
วิธีการวุ้น (SMA; Cultimed, Panreac บาร์เซโลนา, สเปน) ที่มี
chloramphenicol (CH) ที่ 0.1 กรัม L1 (Tournas, กอง Mislivec,
Koch และ Bandler, 1998) เอส inocula cerevisiae ถูกจัดทำขึ้นโดย
การถ่ายโอนอาณานิคมที่ได้รับในแผ่น SMA-CH จะ TSB ซึ่งได้รับการ
บ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสก่อนที่จะถูกเก็บไว้ที่ 20 องศาเซลเซียสในสารละลาย
40% TSB และกลีเซอรีน 60% จนถึงการใช้งาน . วัฒนธรรมที่สดใหม่สำหรับ
การทดลองได้ทำโดยการบ่มหนึ่ง loopful บริสุทธิ์
วัฒนธรรมใน TSB เวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส inocula ถูกมาตรฐานโดย
การลดสัดส่วนใน TSB จนกว่าจะมีความหนาแน่นของแสง (OD) 0.1 ที่ 600 นาโนเมตร
(เลวิวัฒนาการ 300, เทอร์โมอิเลคตรอนคอร์ปอเรชั่น Vis-UV
spectrophotometer) ก็มาถึงเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของยีสต์
107 CFU
ML1 ประชากรยีสต์ได้ประมาณโดยการกระจาย
aliquots เจือจางที่เหมาะสมลงบนแผ่น SMA-CH ตามด้วยการบ่ม
ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง.
2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จุลินทรีย์และ inocula เตรียมสายพันธุ์ของเชื้อ S . cerevisiae แยกและระบุโดยวาลเวอเด Mar í , n-iniesta และ calvo ( 2010 ) และเก็บที่อุณหภูมิ 80 C ในmicrobank ™ขวด ( Pro Labo การวินิจฉัย อยู่ wirrall , UK )ทุกสองเดือน หนึ่งในขวดถูกเปิดและสินค้าวัฒนธรรมที่ปลูกใน trypticase ซุปถั่วเหลือง ( TSB ; cultimed , บาร์เซโลนา ,สเปน ) ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลังเป็นลายบนมาตรฐานวิธี agar ( SMA ; cultimed panreac , บาร์เซโลนา , สเปน ) ที่มีคลอแรมเฟนิคอล ( CH ) ที่ระดับ 0.1 g l1 ( tournas กอง mislivec , , ,Koch & Bandler , 1998 ) การ inocula S . cerevisiae เตรียมโดยการถ่ายโอนเป็นอาณานิคมได้แผ่น SMA CH กับ TSB ซึ่งบ่มเชื้อเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 25 C ก่อนที่จะถูกเก็บไว้ที่ 20 องศาเซลเซียสในสารละลายของ TSB 40% และ 60% กลีเซอรอลจนกว่าจะใช้ วัฒนธรรมใหม่สำหรับการทดลองทำโดยการแช่หนึ่ง loopful บริสุทธิ์วัฒนธรรมใน TSB สำหรับ 24 ชั่วโมง ที่ 25 องศาเซลเซียส inocula ได้รับการรับรองมาตรฐานโดยเจือจางใน TSB จนมีความหนาแน่นของแสง ( OD ) 0.1 ที่ 600 นาโนเมตร( nicolet วิวัฒนาการ 300 , เทอร์โม vis-uv อิเล็กตรอนบริษัทSpectrophotometer ) เข้ามาเพื่อให้ได้ปริมาณยีสต์107 CFU ml1. ยีสต์กระจายจำนวนโดยประมาณอยู่เฉยๆบนแผ่น SMA CH เหมาะสมตามระยะเวลาที่ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง2 .