The seeds of Lagenaria siceraria (F

The seeds of Lagenaria siceraria (Family Cucurbitaceae) were extracted with water and the extract was lyophilized. The lyophilized extract was chromatographed on a DEAE-cellulose column in 10 mM Tris-HCl buffer (pH 7.2). The unadsorbed fraction was applied to an Affi-gel Blue gel column previously equilibrated with the same buffer. After removal of unadsorbed materials, the adsorbed proteins were eluted with 1.5 M NaCl in the Tris-HCl buffer. After dialysis the adsorbed fraction was loaded on a CM-Sepharose CL-6B column which had been equilibrated with and was eluted with the same buffer. After elution of unadsorbed proteins, the column was eluted with a gradient of 0–1 M NaCl in 10 mM Tris-HCl buffer (pH 7.2). The fraction eluting at about 0.55 M NaCl, which represented pure ribosome inactivating protein (RIP), inhibited cell-free translation in a rabbit reticulocyte system with an IC50 of 0.21 nM and exerted ribonuclease activity on yeast tRNA with an activity of 45 U/mg. The RIP was designated lagenin. It possessed a molecular weight of 20 kDa, smaller than the range of 26–32 kDa reported for other RIPs. The N-terminal sequence of lagenin exhibited a lesser extent of similarity to those of other Cucurbitaceae RIPs, characterized by a deletion of the first three amino acid residues and a replacement of the 4th (Phe), 17th (Phe), 18th (Ile) and 22nd (Arg) residues which are invariant in other RIPs.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เมล็ดของ siceraria Lagenaria (ครอบครัววงศ์แตง) ที่สกัด ด้วยน้ำ และสารสกัดเป็น lyophilized สารสกัด lyophilized ถูก chromatographed คอลัมน์ DEAE-เซลลูโลสใน 10 มม.ทริสเรทติ้ง HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.2) เศษส่วน unadsorbed ใช้เป็น Affi เจลเจลสีน้ำเงินคอลัมน์ก่อนหน้านี้ equilibrated กับบัฟเฟอร์ที่เดียวกัน หลังจากการกำจัดวัสดุ unadsorbed โปรตีน adsorbed ถูก eluted กับ 1.5 M NaCl ในบัฟเฟอร์ทริสเรทติ้ง HCl หลังจากฟอกเลือด เศษ adsorbed ถูกโหลดบน CL Sepharose ซม.-คอลัมน์ 6B ซึ่งได้รับการ equilibrated ด้วย และถูก eluted กับบัฟเฟอร์เดียวกัน หลังจากชะของโปรตีน unadsorbed คอลัมน์ eluted ด้วยการไล่ระดับสีของ 0 – 1 M NaCl ใน 10 มม.ทริสเรทติ้ง HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.2) การเศษส่วน eluting ที่ประมาณ 0.55 M NaCl ซึ่งไรโบโซมบริสุทธิ์เป็นตัวแทน inactivating โปรตีน (RIP), แปลฟรีเซลล์ยับยั้งในระบบ reticulocyte กระต่ายด้วย IC50 0.21 nM และกิจกรรม ribonuclease นั่นเองในยีสต์ป้องกันสลาย ด้วยกิจกรรมของ 45 U/mg การ RIP ถูกกำหนด lagenin กินน้ำหนักโมเลกุลของ 20 kDa รายงานมีขนาดเล็กกว่าช่วง 26 – 32 kDa สำหรับ RIPs อื่น ๆ ลำดับขั้ว N ของ lagenin แสดงขอบเขตที่น้อยของความคล้ายคลึงกับของอื่น ๆ ริพซีวงศ์แตง ลักษณะการลบตกค้างของกรดอะมิโนสามอันดับแรกและ 4 (เพ), 17 (เพ), 18 (เมา) และ 22 (อาร์กิวเมนต์ของค่า) แทนที่ตกค้างซึ่งเป็นการบล็อกใน RIPs อื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เมล็ดของ lagenaria siceraria (ครอบครัว Cucurbitaceae) ถูกสกัดด้วยน้ำและสารสกัดแห้ง สารสกัดแห้งถูก chromatographed ในคอลัมน์ DEAE-เซลลูโลสใน 10 มิลลิ Tris-HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.2) ส่วน unadsorbed ถูกนำไปใช้กับฟฟีสีน้ำเงินเจลเจลคอลัมน์ equilibrated ก่อนหน้านี้กับบัฟเฟอร์เดียวกัน หลังจากที่กำจัดของวัสดุ unadsorbed โปรตีนการดูดซับที่ถูกชะพร้อมกับ 1.5 M NaCl ในบัฟเฟอร์ Tris-HCl หลังจากการล้างไตส่วนการดูดซับที่ถูกโหลดในคอลัมน์ CM-Sepharose CL-6B ซึ่งได้รับการ equilibrated ด้วยและถูกชะด้วยบัฟเฟอร์เดียวกัน หลังจากการชะของโปรตีน unadsorbed คอลัมน์ที่ถูกชะที่มีความลาดชัน 0-1 M NaCl 10 มิลลิ Tris-HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.2) ส่วน eluting ที่ประมาณ 0.55 M NaCl ซึ่งเป็นตัวแทนไรโบโซมบริสุทธิ์ยับยั้งโปรตีน (RIP) แปลปราศจากเซลล์ยับยั้งในระบบกระต่าย reticulocyte กับ IC50 เท่ากับ 0.21 นาโนเมตรและกระทำกิจกรรม ribonuclease บน tRNA ยีสต์ที่มีกิจกรรม 45 U / มก . ฉีกถูกกำหนด lagenin มันมีน้ำหนักโมเลกุล 20 กิโลดาลตันเล็กกว่าช่วงของ 26-32 กิโลดาลตันรายงาน RIPs อื่น ๆ ลำดับ n- ขั้วของ lagenin แสดงระดับที่น้อยกว่าความคล้ายคลึงกันกับของ Cucurbitaceae RIPs อื่น ๆ ที่โดดเด่นด้วยการลบแรกสามกรดอะมิโนและทดแทนที่ 4 (เพ), 17 (เพ), 18 (อิล) และ 22 (หาเรื่อง) ตกค้างซึ่งเป็นค่าคงที่ใน RIPs อื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เมล็ดพันธุ์แห่ง lagenaria siceraria ( Cucurbitaceae ครอบครัว ) สกัดด้วยน้ำ และสารสกัดที่เป็นแห้ง . โปรตีนที่สกัดได้ chromatographed บน DEAE เซลลูโลสคอลัมน์ใน 10 มม. นอกจากนี้ ไฮโดรคลอไรด์บัฟเฟอร์ pH 7.2 ) ส่วนที่ใช้เป็น unadsorbed ฟีเจลสีฟ้าคอลัมน์ก่อนหน้านี้ equilibrated กับบัฟเฟอร์เดียวกัน หลังจากเอาของ unadsorbed วัสดุดูดซับโปรตีนเป็นตัวอย่างกับ 1.5 M NaCl ในบริษัท ไฮโดรคลอไรด์บัฟเฟอร์ หลังจากฟอกไตดูดซับเศษส่วนคือโหลด cl-6b คอลัมน์ที่เกี่ยวข้องใน cm ซึ่งเคย equilibrated ด้วยและเป็นตัวอย่างกับบัฟเฟอร์เดียวกัน หลังจากใช้ unadsorbed โปรตีนคอลัมน์คือตัวอย่าง ด้วยการไล่ระดับสี 0 – 1 M NaCl 10 มม. นอกจากนี้ ไฮโดรคลอไรด์บัฟเฟอร์ pH 7.2 ) ส่วน hexane ประมาณ 0.55 M NaCl ซึ่งแสดง inactivating โปรตีนบริสุทธิ์ไรโบโซม ( ฉีก ) , ยับยั้งการสังเคราะห์แปลในระบบเรติคิวโลไซต์กระต่ายกับ ic50 0.21 นาโนเมตรและใช้ไรโบนิวคลีเกิจกรรมการเมารถยีสต์กับกิจกรรม 45 U / mg ฉีกเป็นเขต lagenin . มันมีน้ำหนักโมเลกุล 20 กิโลดาลตัน เล็กกว่าช่วง 26 - 32 ) จะรายงานอื่น ๆ ลำดับของกรดอะมิโนของ lagenin มีขอบเขตที่น้อยกว่าของความเหมือนที่ rips ต้นอื่น ๆ ลักษณะ โดยการลบครั้งแรกสามกรดอะมิโนตกค้าง และตัวแทนของ 4 ( เพ ) , 17 ( เพ ) , 18 ( ILE ) และ 22 ( ARG ) ตกค้างซึ่งเป็นค่าคงที่ในจะอื่น ๆ