The assay protocol was previously described by Re and colleagues [17]. ABTS radical cation (ABTS˙+) was prepared by mixing 7 mM ABTS [2,2ʹ-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid); (Sigma-Aldrich, Germany)] with 2.45 mM K2S2O8 (Sigma-Aldrich) at an equal volume and allowing the mixture to stand in the dark at room temperature for 12-16 h. This stock solution could be stable for 2 days and used to prepare the workingsolution by diluting with water (Merck, Germany) to an absorbance of 0.7-0.9 at 734 nm. To perform the ABTS˙+ assay, 20 µL of sample was mixed with 80 µL of water and 2 µL of ABTS˙+ workingsolution for 3 min and an absorbance at 734 was read using Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethychroman-2-carboxylic acid; Sigma-Aldrich) as a standard. Each sample was analyzed in duplicate. Concentration of antioxidants was obtained by fitting a change in absorbance of samples to a standard curve of Trolox.
โปรโตคอลการทดสอบที่ได้รับการอธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยเรื่องและเพื่อนร่วมงาน [17] ABTS ไอออนบวกที่รุนแรง (ABTS +) ถูกจัดทำขึ้นโดยการผสม 7 มิลลิ ABTS [2,2'-azinobis (กรด 3 ethylbenzothiazoline-6-sulfonic); (Sigma-Aldrich, เยอรมนี)] ด้วย 2.45 มิลลิ K2S2O8 (Sigma-Aldrich) ในปริมาณที่เท่ากันและช่วยให้ส่วนผสมที่จะยืนอยู่ในที่มืดที่อุณหภูมิห้องสำหรับ 12-16 ชั่วโมง วิธีการแก้ปัญหาหุ้นนี้อาจจะมีเสถียรภาพเป็นเวลา 2 วันและใช้ในการเตรียม workingsolution โดยเจือจางด้วยน้ำ (เมอร์ค, เยอรมนี) ในการดูดกลืนแสงของ 0.7-0.9 ที่ 734 นาโนเมตร ที่จะดำเนินการทดสอบ ABTS + 20 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่างได้รับการผสมกับ 80 ไมโครลิตรของน้ำและ 2 ไมโครลิตรของ workingsolution ABTS + เวลา 3 นาทีและการดูดกลืนแสงที่ 734 ถูกอ่านได้โดยใช้ Trolox (6 ไฮดรอกซี-2,5,7, กรด 8 tetramethychroman-2-คาร์บอกซิ; Sigma-Aldrich) เป็นมาตรฐาน ตัวอย่างแต่ละคนได้รับการวิเคราะห์ในที่ซ้ำกัน ความเข้มข้นของสารต้านอนุมูลอิสระที่ได้รับโดยการปรับการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงของกลุ่มตัวอย่างที่จะโค้งมาตรฐานของ Trolox
การแปล กรุณารอสักครู่..
