The assay was conducted in borate b

The assay was conducted in borate buffer (100 mM, pH 8.3)
containing 300 mM NaCl. The same buffer was used for solution
preparation of the Captopril, substrate, hippuric acid, peptides,
and enzyme dilutes. A total reaction volume of 60 μL contained
100 mM borate buffer (pH 8.3), 4 mM hippuryl-l-histidyl-lleucine,
300 mM NaCl, and 10 milliunit ACE. All solutions were
incubated at 37 ◦C for 30 min in a thermostatically controlled water
bath prior to mixing, and for an additional 30 min at the same
temperature after mixing (Liu and others 2010b). The reaction
was terminated by adding 60 μL 1 M HCL before injecting the
sample into the HPLC sample loop to quantify the hippuric acid
produced by the enzymatic hydrolysis of the substrate hippuryll-
histidyl-l-leucine. The isocratic mobile phase consisted of
25% acetonitrile in deionized water (v:v) with 0.5% TFA. It was
filtered through 0.45 μm cellulose filters and degassed by ultrasound
for 30 min. An aliquot of 10 μL of the reaction mixture
was analyzed on the reverse phase HPLC. Hippuryl-l-histidyll-
leucine and hippuric acid were detected at 228 nm when the
mobile phase was controlled at 0.5 mL/min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การทดสอบดำเนินการบัฟเฟอร์ borate (100 มม. ค่า pH 8.3)ประกอบด้วย 300 มม. NaCl ใช้บัฟเฟอร์ที่เดียวสำหรับการแก้ปัญหาเตรียม Captopril พื้นผิว กรด hippuric เปป ไทด์และเอนไซม์ dilutes 60 μL อยู่ระดับปฏิกิริยาทั้งหมด100 mM borate บัฟเฟอร์ (pH 8.3), 4 mM hippuryl-l-histidyl-lleucine300 มม. NaCl และ 10 milliunit เอ โซลูชันทั้งหมดได้ได้รับการกกที่ ◦C 37 30 นาทีในน้ำพร้อมระบบปรับอุณหภูมิอาบน้ำ ก่อนผสม และเพิ่มเติม 30 นาทีเดียวอุณหภูมิหลังผสม (หลิว และอื่น ๆ 2010b) การเกิดปฏิกิริยาถูกยกเลิก โดยการเพิ่ม μL 60 1 M HCL ก่อนฉีดตัวอย่างเป็นการวนรอบอย่าง HPLC จะปริมาณกรด hippuricผลิต โดยการย่อยเอนไซม์ของพื้นผิว hippuryll-histidyl-l-ไธร ขั้นตอนการเคลื่อน isocratic คิดประกอบด้วย25% acetonitrile จุน้ำ (v: v) 0.5% TFA มันเป็นกรองผ่าน 0.45 ไมครอนเซลลูโลสกรอง และ degassed โดยอัลตร้าซาวด์30 นาที ส่วนลงตัวของ μL 10 ของส่วนผสมของปฏิกิริยาวิเคราะห์ได้ในขั้นตอนย้อนกลับการ HPLC Hippuryl-l-histidyll -พบกรดไธรและ hippuric 228 nm เมื่อการมีควบคุมเฟสเคลื่อนที่ 0.5 มิลลิลิตร/นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทดสอบได้ดำเนินการในบัฟเฟอร์ borate (100 มิลลิเมตรมีค่า pH 8.3)
มี 300 มิลลิเมตรโซเดียมคลอไรด์ บัฟเฟอร์เดียวกันถูกนำมาใช้สำหรับการแก้ปัญหา
การจัดทำ Captopril สารตั้งต้นกรด hippuric, เปปไทด์
และเจือจางเอนไซม์ ปริมาณการเกิดปฏิกิริยารวม 60 ไมโครลิตรมี
100 มิลลิเมตรบัฟเฟอร์ borate (pH 8.3) 4 มิ hippuryl-L-histidyl-lleucine,
300 มิลลิเมตรโซเดียมคลอไรด์และ 10 milliunit ACE การแก้ปัญหาทั้งหมดได้รับการ
บ่มที่ 37 ◦Cเป็นเวลา 30 นาทีในน้ำควบคุม Thermostatically
อาบน้ำก่อนที่จะมีการผสมและสำหรับอีก 30 นาทีในเวลาเดียวกัน
อุณหภูมิหลังจากผสม (หลิวและอื่น ๆ 2010b) ปฏิกิริยา
ถูกยกเลิกโดยการเพิ่ม 60 ไมโครลิตร M 1 HCL ก่อนที่จะฉีด
ตัวอย่างเข้ามาในวงตัวอย่าง HPLC ได้ปริมาณกรด hippuric
ผลิตโดยการย่อยด้วยเอนไซม์ของพื้นผิว hippuryll-
histidyl-L-leucine เฟสเคลื่อนที่ isocratic ประกอบด้วย
25% acetonitrile ในน้ำ deionized (V: V) 0.5% TFA มันถูก
กรองผ่าน 0.45 ไมครอนกรองเซลลูโลสและ degassed โดยอัลตราซาวนด์
เป็นเวลา 30 นาที หาร 10 ไมโครลิตรของผสมปฏิกิริยา
ได้รับการวิเคราะห์บน HPLC เฟสย้อนกลับ Hippuryl-L-histidyll-
leucine และกรด hippuric ตรวจพบที่ 228 นาโนเมตรเมื่อ
เฟสเคลื่อนที่ถูกควบคุมที่ 0.5 มิลลิลิตร / นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( วัตถุประสงค์บอเรตบัฟเฟอร์ ( 100 มม. , pH 8.3 )ที่มีขนาด 300 มิลลิเมตร บัฟเฟอร์เดียวกันถูกใช้สำหรับโซลูชั่นการเตรียมการของแคปโตพริลตั้งต้นฮิพกรด เปปและเอนไซม์เจือจาง . รวมปริมาณ 60 μผมมีปฏิกิริยา100 มิลลิเมตร บอเรตบัฟเฟอร์ pH 8.3 ) hippuryl-l-histidyl-lleucine 4 มม.ขนาด 300 มม. และ 10 milliunit เอซ โซลูชั่นทั้งหมดบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีใน◦ควบคุมอุณหภูมิน้ำอาบน้ำก่อนผสม และอีก 30 นาทีเหมือนเดิมอุณหภูมิหลังจากผสม ( หลิว และคนอื่น ๆ 2010b ) ปฏิกิริยาถูกยกเลิกโดยการเพิ่ม 60 μ L 1 M HCl ก่อนฉีดตัวอย่างใน HPLC ตัวอย่างห่วงปริมาณกรดฮิพผลิตโดยการย่อยสลายของพื้นผิว hippuryll - เอนไซม์histidyl-l-leucine . ระยะเคลื่อนที่ Isocratic ประกอบด้วยไนไตรล์ 25 % ในน้ำคล้ายเนื้อเยื่อประสาน ( V : V ) 0.5 เปอร์เซ็นต์กรดไขมัน . มันคือกรองผ่านตัวกรองและ degassed 0.45 μ M เซลลูโลสโดยอัลตร้าซาวน์เป็นเวลา 30 นาที เป็นส่วนลงตัวของ 10 μ L ของปฏิกิริยาผสมวิเคราะห์บนกลับเฟส HPLC . hippuryl-l-histidyll -และกรดฮิพลูซีนถูกตรวจพบที่ 228 นาโนเมตรเมื่อเฟสเคลื่อนที่ถูกควบคุมไว้ที่ 0.5 มิลลิลิตร / นาที