The crude enzymatic extract was pre

The crude enzymatic extract was prepared from leaf tissue (0.5 g)
macerated using liquid N2 and homogenized with 5.0 mL of 100 mM
potassium phosphate buffer (pH 7.5) containing 1.0 mM EDTA,
3.0 mM dithiothreitol (DTT) and 2% polyvinylpolypyrrolidone (PVPP)
(m/v) (Azevedo et al., 1998). The homogenate was centrifuged at
14,000 g for 30 min at 4 °C, the supernatant was collected, and 0.5 mL
aliquots were stored in a freezer at −80 °C until enzyme and total
protein quantification. The total protein concentration of each sample
was assessed in a spectrophotometer at 595 nm as described by
Bradford (1976) using bovine serum albumin (BSA) as standard.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สารสกัดเอนไซม์ดิบถูกเตรียมจากเนื้อเยื่อใบ (0.5 กรัม)ผ่อนใช้ N2 เหลว และ homogenized กับ 5.0 มิลลิลิตรของ 100 มม.โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.5) ที่มี 1.0 mM EDTAdithiothreitol 3.0 มม. (DTT) และ 2% polyvinylpolypyrrolidone (PVPP)(m/v) (Azevedo et al. 1998) Homogenate ถูกเหวี่ยงที่14,000 กรัมสำหรับ 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 ° C, supernatant ถูกรวบรวม และ 0.5 mLaliquots ถูกเก็บไว้ในตู้แช่ที่ −80 ° C จนถึงเอนไซม์และรวมโปรตีนนับ ความเข้มข้นของโปรตีนทั้งหมดของแต่ละอย่างรับการประเมินใน spectrophotometer ที่ 595 nm ตามที่อธิบายไว้โดยแบรดฟอร์ด (1976) โดยใช้วัว serum albumin (บีเอสเอ) เป็นมาตรฐาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สารสกัดเอนไซม์ดิบที่เตรียมจากเนื้อเยื่อใบ (0.5 กรัม)
หมักโดยใช้ N2 ของเหลวและปั่นกับ 5.0 มิลลิลิตร 100
มิลลิโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์(pH 7.5) ที่มี EDTA 1.0 มิลลิ,
3.0 มิลลิ dithiothreitol (DTT) และ 2% polyvinylpolypyrrolidone (PVPP)
(m / v) (Azevedo et al., 1998) homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่
14,000 กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่ 4 ° C, ใสถูกเก็บรวบรวมและ 0.5 มิลลิลิตร
aliquots ถูกเก็บไว้ในช่องแช่แข็งที่ -80
องศาเซลเซียสจนถึงเอนไซม์และรวมปริมาณโปรตีน ความเข้มข้นของโปรตีนรวมของแต่ละตัวอย่างได้รับการประเมินใน spectrophotometer ที่ 595 นาโนเมตรตามที่อธิบายไว้โดยแบรดฟอ(1976) โดยใช้ซีรั่มอัลบูมิวัว (BSA) เป็นมาตรฐาน