Enzyme assayExtract preparationAll

Enzyme assay
Extract preparation
All enzyme extract procedures were conducted at 4 °C.
Frozen leaf tissues (2 g) were ground with 10 ml
extracting buffer (0.2 M boric acid buffer, containing
1 mM EDTA and 50 mM b-mercaptoethanol, pH 8.8).
The extracts were homogenised and centrifuged at12 000 9 g at 4 °C for 30 min, and the supernatant
was collected.
Enzyme assay
Tyrosine ammonia-lyase (TAL) assay. Tyrosine ammonia-
lyase activity was performed according to Abdel-
Fattah & Al-Amri (2012). Specific enzyme activity was
defined as mM p-coumaric acid per minute per mg of
protein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดสอบเอนไซม์การเตรียมสารสกัดจากได้ดำเนินการกระบวนงานทั้งหมดเอนไซม์สกัดที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสแช่แข็งเนื้อเยื่อใบ (2 กรัม) ถูกพื้นดินกับ 10 มล.ขยายบัฟเฟอร์ (บัฟเฟอร์ 0.2 M เป็นกรด ประกอบด้วย1 mM EDTA และ 50 มม. b-mercaptoethanol, pH 8.8)ถูกนี้สารสกัด และผลิตภัณฑ์ at12 000 9 กรัมที่ 4 ° C เป็นเวลา 30 นาที และ supernatantรวบรวมได้ทดสอบเอนไซม์ไทโรซีนแอมโมเนีย-lyase (ทัล) assay ไทโรซีนแอมโมเนีย-กิจกรรม lyase ทำตาม Abdel-Fattah และอัล-Amri (2012) มีเฉพาะเอนไซม์กำหนดเป็นกรด p-coumaric มม.ต่อนาทีต่อมิลลิกรัมโปรตีนที่มี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เอนไซม์ทดสอบ
การเตรียมสารสกัดจาก
ทั้งหมดเอนไซม์ขั้นตอนการสกัดจากได้ดำเนินการที่ 4 ° C.
เนื้อเยื่อใบแช่แข็ง (2 กรัม) มาบดกับ 10 มล.
สกัดบัฟเฟอร์ (0.2 M บอริกบัฟเฟอร์กรดที่มี
1 มิลลิ EDTA และ 50 มิลลิ B-mercaptoethanol ค่า pH 8.8) .
สารสกัดถูก homogenised และปั่น at12 000 9 กรัมที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีและสารละลาย
ที่ถูกเก็บรวบรวม.
เอนไซม์ทดสอบ
ไทโรซีนแอมโมเนียไอเลส (TAL) การทดสอบ ไทโรซีน ammonia-
กิจกรรมไอเลสได้ดำเนินการตาม Abdel-
เทห์ & Al-Amri (2012) กิจกรรมของเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงได้รับการ
กำหนดให้เป็นมิลลิกรด P-coumaric ต่อนาทีต่อมิลลิกรัม
โปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เอนไซม์ การทดสอบการเตรียมสารสกัดทุกขั้นตอนสกัดเอนไซม์การทดลองที่ 4 องศาเนื้อเยื่อใบแช่แข็ง ( 2 กรัม ) มีพื้น 10 มล.การบัฟเฟอร์ ( 0.2 เมตรประกอบด้วยกรดบอริก บัฟเฟอร์1 mM EDTA และ b-mercaptoethanol 50 มิลลิเมตร พีเอช 8.8 )สารสกัดที่ได้ homogenised ไฟฟ้า at12 000 9 กรัม 4 ° C เป็นเวลา 30 นาที และน่านคือการเก็บรวบรวมเอนไซม์ การทดสอบไทโรซีนแอมโมเนีย lyase ( TAL ) ตามลำดับ แอมโมเนีย - แต่อย่างใดกิจกรรม lyase ได้ปฏิบัติตาม - เดลfattah & อัล amri ( 2012 ) กิจกรรมของเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงคือกําหนดเป็นมิลลิเมตร p-coumaric กรดต่อนาทีต่อมิลลิกรัมโปรตีน