Materials and Methods Blood samples

Materials and Methods
Blood samples were collected from 66 captive
elephants from two regions of Thailand, the central and
northeastern parts, including 17 related animals from 6
families and other 49 genetically unrelated individuals.
DNA was isolated from whole blood samples using
QIAamp® DNA Blood Minikit according to the
manufacturer’s instructions. PCR amplifications were
performed using the primers for 11 tetranucleotide
microsatellite loci including LaT05, LaT06, LaT07, LaT08,
LaT13, LaT16, LaT17, LaT18, LaT24, LaT25 and LaT26,
with the expected size between 166-392 bp. Two to three
times PCR-amplifications per DNA sample per
microsatellite marker were performed at the annealing
temperature of 52-56oC (Archie et al., 2003; Suwattana et
al. 2007). Each microsatellite locus was identified by
DNA sequencing before all the samples were preceded.
The PCR products were preliminarily tested for size by
2.0% agarose gel electrophoresis and analyzed by using
Applied Biosystems 3130 Series System with the
GeneMapper® program. Number of alleles were
calculated to obtain frequency of alleles, expected
heterozygosity (He) (Nei, 1978), Polymorphic
Information Content (PIC) (Botstein et al., 1980),
Exclusion Probability (EP) and Combined Exclusion
Probability (CEP) (Jamieson and Taylor, 1997)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการ ตัวอย่างเลือดเก็บรวบรวมจากภายในกิจการและ 66ช้างจากสองภูมิภาคประเทศไทย เซ็นทรัล และส่วนตะวันออกเฉียงเหนือ รวมถึงสัตว์ที่เกี่ยวข้อง 17 จาก 6ครอบครัวและบุคคลที่ไม่เกี่ยวข้องแปลงพันธุกรรมอื่น ๆ 49ดีเอ็นเอที่แยกได้จากตัวอย่างเลือดทั้งหมดที่ใช้QIAamp ® Minikit DNA เลือดตามคำแนะนำของผู้ผลิต PCR amplifications ได้ดำเนินการใช้ไพรเมอร์ที่ 11 tetranucleotideชนิด microsatellite loci รวม LaT05, LaT06, LaT07, LaT08LaT13, LaT16, LaT17, LaT18, LaT24, LaT25 และ LaT26ขนาดคาดระหว่าง bp 166-392 สอง-สามเวลา PCR amplifications ต่อตัวอย่างดีเอ็นเอต่อเครื่องหมายชนิด microsatellite ในการอบเหนียวที่ดำเนินอุณหภูมิ 52-56oC (อาร์ชี่และ al., 2003 Suwattana ร้อยเอ็ดal. 2007) แต่ละโลกัสโพลชนิด microsatellite ที่ระบุลำดับดีเอ็นเอก่อนตัวอย่างทั้งหมดถูกนำหน้าผลิตภัณฑ์ PCR preliminarily ทดสอบสำหรับขนาด2.0% agarose เจ electrophoresis และวิเคราะห์ โดยใช้ใช้ระบบ Biosystems 3130 ชุดโปรแกรมของ GeneMapper ® มีจำนวนของ allelesคำนวณหาความถี่ของ alleles คาดว่าheterozygosity (เขา) (Nei, 1978), Polymorphicเนื้อหาข้อมูล (PIC) (Botstein et al., 1980),แยกความน่าเป็น (EP) และแยกรวมความน่าเป็น (CEP) (Jamieson และเทย์เลอร์ 1997)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการเก็บตัวอย่างเลือดจาก 66 เชลยช้างจากสองภูมิภาคของประเทศไทยภาคกลางและชิ้นส่วนภาคตะวันออกเฉียงเหนือ17 รวมทั้งสัตว์ที่เกี่ยวข้องจาก 6 ครอบครัวและอื่น ๆ 49 บุคคลที่ไม่เกี่ยวข้องทางพันธุกรรม. ดีเอ็นเอที่แยกได้จากตัวอย่างเลือดโดยใช้QIAamp®ดีเอ็นเอเลือด Minikit ตามคำแนะนำของผู้ผลิต เครื่องขยายเสียง PCR ถูกดำเนินการโดยใช้ไพรเมอร์สำหรับtetranucleotide 11 ตำแหน่งรวมทั้งไมโคร LaT05, LaT06, LaT07, LaT08, LaT13, LaT16, LaT17, LaT18, LaT24, LaT25 และ LaT26, ที่มีขนาดคาดว่าระหว่าง 166-392 bp สองถึงสามครั้งPCR-เครื่องขยายเสียงต่อตัวอย่างดีเอ็นเอต่อเครื่องหมายไมโครได้รับการดำเนินการในการอบที่อุณหภูมิ52-56oC (อาร์ชี et al, 2003;. สุวัฒนา et al, 2007). แต่ละสถานที่ไมโครได้รับการระบุลำดับดีเอ็นเอก่อนที่กลุ่มตัวอย่างทั้งหมดถูกนำหน้า. ผลิตภัณฑ์ PCR ได้มีการทดสอบเบื้องต้นสำหรับขนาดจาก2.0% ข่าวคราว agarose และวิเคราะห์โดยใช้แอพพลายด์3130 ระบบซีรีส์ที่มีโปรแกรมGeneMapper® จำนวนอัลลีลได้รับการคำนวณเพื่อให้ได้ความถี่ของอัลลีลคาดว่าheterozygosity (เขา) (Nei, 1978), Polymorphic เนื้อหาข้อมูล (PIC) (Botstein et al., 1980) น่าจะยกเว้น (EP) และยกเว้นรวมความน่าจะเป็น(CEP) ( จาไมสันและเทย์เลอร์, 1997)