3. Results and discussion3.1. Devel

3. Results and discussion
3.1. Development and finalisation of HPLC method
Many of the published methods for examining the metabolites
found in pomegranate have focused on determining ellagic and
gallic acids, or the punicalagins A and B, but not all four of the
metabolites in a single HPLC analysis. This divided approach has
largely resulted from the differences in the chromatographic properties
of these four compounds when applied to C-18 stationary
phases. Gallic and ellagic acids represent the extremes in terms
of retention and are relatively simple to separate if the oligomeric
hydrolyzable polyphenols that elute in between them are ignored.
In contrast, punicalagins A and B are part of the oligomeric hydrolyzable
polyphenols that elute in the between the extremes and
require elongated chromatographic runs focused on that region
to resolve. We selected a 2.6 lm Kinetex C-18 column with the
hope that the additional resolution afforded by a smaller particle
size would facilitate resolution of the target compounds, while
minimising sample run time.
We initially employed the aggressive parameters recommend
by the column manufacturer for the HPLC–UV analysis of phenolics
in green tea to the analysis of a pomegranate marc extract, but
quickly learned that the suggested chromatographic conditions
did not adequately resolve the targeted compounds and resulted
in gallic acid eluting in the column void volume. Since our objective
was to minimise or eliminate any pretreatment steps we
elected to modify the chromatographic conditions, including the
overall run time, slope of the gradient, and phosphoric acid composition
of the mobile phase. In the course of our method

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1 การพัฒนาและ finalisation ของวิธี HPLCวิธีการเผยแพร่ใน metabolites ตรวจสอบมากมายในทับทิมมีเน้นกำหนด ellagic และกรด gallic หรือ punicalagins A และ B แต่ไม่ทั้งนี้metabolites ในวิเคราะห์ HPLC เดียว วิธีการนี้ถูกแบ่งได้ส่วนใหญ่เป็นผลมาจากความแตกต่างในคุณสมบัติ chromatographicสารเหล่านี้สี่เมื่อใช้เขียน C-18ขั้นตอนการ Gallic และกรด ellagic แทนสุดเงื่อนไขเก็บข้อมูลและจะค่อนข้างง่ายที่จะแยกถ้าที่ oligomericโพลีฟีน hydrolyzable ที่ elute ระหว่างพวกเขาจะถูกละเว้นในทางตรงกันข้าม punicalagins A และ B เป็นส่วนหนึ่งของการ oligomeric hydrolyzableโพลีฟีนที่ elute ในที่ระหว่างสุด และต้องทำ chromatographic อีลองเกตมุ่งเน้นเมื่อต้องการแก้ไข เราเลือกคอลัมน์ lm 18 Kinetex C 2.6 มีการหวังว่า การแก้ปัญหาเพิ่มเติมนี่ ด้วยอนุภาคขนาดเล็กขนาดจะช่วยแก้ไขปัญหาของสารเป้าหมาย ขณะที่ตัวอย่างกับลดเวลาที่ใช้เราเริ่มจ้างแนะนำพารามิเตอร์ที่ก้าวร้าวโดยผู้ผลิตคอลัมน์สำหรับการวิเคราะห์ HPLC-UV phenolicsในชาเขียวเพื่อวิเคราะห์แยกเป็นมาร์คทับทิม แต่อย่างรวดเร็วได้เรียนรู้ว่าเงื่อนไข chromatographic แนะนำไม่เพียงพอก็แก้ไขสารเป้าหมาย และส่งผลให้ในกรด gallic eluting ปริมาณยกเลิกคอลัมน์ เนื่องจากวัตถุประสงค์ของเรามีการลด หรือกำจัดการ pretreatment ต่อเราเลือกที่จะปรับเปลี่ยนเงื่อนไข chromatographic รวมทั้งการเวลาโดยรวม ความชันของการไล่ระดับสี และองค์ประกอบกรดฟอสฟอริกของเฟสเคลื่อนที่ ในหลักสูตรวิธีการของเรา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลการอภิปรายและ
3.1 การพัฒนาและการสรุปของวิธี HPLC
หลายวิธีการตีพิมพ์การตรวจสอบสาร
ที่พบในทับทิมมีความสำคัญกับการกำหนด ellagic และ
กรดแกลลิหรือ punicalagins A และ B แต่ไม่ทั้งสี่ของ
สารในการวิเคราะห์ HPLC เดียว วิธีการแบ่งนี้ได้
ส่งผลให้ส่วนใหญ่มาจากความแตกต่างในคุณสมบัติของสาร
เหล่านี้สี่สารประกอบเมื่อนำไปใช้กับ C-18 เครื่องเขียน
ขั้นตอน กรด ellagic ฝรั่งเศสและเป็นตัวแทนของสุดขั้วในแง่
ของการเก็บรักษาและมีความง่ายที่จะแยกถ้า oligomeric
โพลีฟีน hydrolyzable ที่ชะในระหว่างพวกเขาจะถูกละเว้น.
ในทางตรงกันข้าม punicalagins A และ B เป็นส่วนหนึ่งของ hydrolyzable oligomeric
โพลีฟีนที่ชะในระหว่าง สุดขั้วและ
ต้องวิ่งยาวโครมามุ่งเน้นไปที่พื้นที่ที่
จะแก้ปัญหา เราเลือก 2.6 LM KINETEX เสา C-18 ด้วย
ความหวังว่าความละเอียดเพิ่มเติม afforded โดยอนุภาคขนาดเล็ก
ขนาดจะอำนวยความสะดวกความละเอียดของสารเป้าหมายในขณะที่
การลดเวลาการทำงานตัวอย่าง.
เราจ้างขั้นต้นพารามิเตอร์ก้าวร้าวแนะนำ
โดยผู้ผลิตคอลัมน์สำหรับ การวิเคราะห์ HPLC-UV ของฟีนอล
ในชาเขียวการวิเคราะห์สารสกัดจากทับทิมรายการ MARC แต่
เรียนรู้อย่างรวดเร็วว่าเงื่อนไขโครมาแนะนำ
ไม่เพียงพอแก้ไขสารประกอบที่กำหนดเป้าหมายและส่งผล
ในกรดแกลลิ eluting ปริมาณโมฆะคอลัมน์ เนื่องจากวัตถุประสงค์ของเรา
คือการลดหรือขจัดขั้นตอนการปรับสภาพใด ๆ ที่เรา
เลือกที่จะปรับเปลี่ยนเงื่อนไขโครมารวมทั้ง
เวลาทำงานโดยรวม, ความลาดเอียงของการไล่ระดับสีและองค์ประกอบของกรดฟอสฟ
ของเฟสเคลื่อนที่ ในหลักสูตรของวิธีการของเรา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลและการอภิปราย
3.1 . การพัฒนาและ finalisation ของ HPLC วิธี
มากมายเผยแพร่วิธีการตรวจสอบสาร
พบทับทิมได้มุ่งเน้นการลาจิก กรดแกลลิคและ
หรือ punicalagins A และ B , แต่ไม่ทั้งหมดสี่ของ
หลายชนิดในการวิเคราะห์ HPLC เดียว วิธีการนี้แบ่งได้
ส่วนใหญ่เป็นผลมาจากความแตกต่างในคุณสมบัติของสารประกอบเหล่านี้สี่และ
-
) เมื่อเปรียบเทียบกับระยะ กอลลาจิกและกรดแทนสุดขั้วในแง่
ของการเก็บรักษาและค่อนข้างง่ายที่จะแยกว่า โอลิโก
hydrolyzable โพลีฟีนที่ elute ระหว่างพวกเขาจะถูกละเว้น .
ในความคมชัดpunicalagins A และ B เป็นส่วนหนึ่งของโอลิโก hydrolyzable
โพลีฟีนที่ elute ในระหว่าง extremes และ
ต้องยาวและวิ่งเน้นที่ภูมิภาค
เพื่อแก้ไข เราเลือก LM - 2.6 kinetex คอลัมน์ด้วย
หวังว่าเพิ่มเติมมติ afforded โดยอนุภาคขนาดเล็กจะช่วย
ความละเอียดของชิ้นงาน ซึ่งในขณะที่
ลดเวลาเรียกใช้ตัวอย่าง
เราเริ่มใช้พารามิเตอร์ก้าวร้าวแนะนำ
โดยผู้ผลิตสำหรับคอลัมน์ HPLC UV และการวิเคราะห์ผล
ในชาเขียวเพื่อการวิเคราะห์สารสกัดทับทิมมาร์ค แต่ได้เรียนรู้ได้อย่างรวดเร็วว่าแนะนำ

ไม่ได้อย่างเพียงพอและเงื่อนไขแก้ไขเป้าหมายที่มีผล
ใน hexane เพิ่มขึ้นในโมฆะคอลัมน์ปริมาณ ตั้งแต่
วัตถุประสงค์ของเราเพื่อลดหรือขจัดใด ๆขั้นตอนการเลือกที่จะปรับเปลี่ยนเงื่อนไขเรา

และรวมถึงเวลาวิ่งโดยความชันของความลาดชัน และ กรดฟอสฟอริค องค์ประกอบ
ของเฟสเคลื่อนที่ ในหลักสูตรของวิธีการของเรา