2. Materials and methods2.1. Chemic

2. Materials and methods
2.1. Chemicals
Menhaden oil, tannic acid (99.5% purity), cumene hydroperoxideand osmium were purchased from Sigma Chemical Co. Sodium chloride, sodium bicarbonate, potassiumiodide, trichloroacetic acid and glutaraldehyde were obtained from Merck . Disodium hydrogen phosphate,sodiumtripolyphosphate, soy protein isolate, 2-thiobarbituric acid,ammonium thiocyanate and ferrous chloride were purchased fromFluka Chemical Co. All chemicals used wereof analytical grade.
2.2. Preparation of kiam wood extract
2.2.1. Collection and preparation of kiam wood
The kiam wood was obtained from the forest of the Phattalung province in the Southern Thailand. The tree was about 15–20 yearsold and harvested in May, 2010. The tree was cut by using a sawing machine; the leaves and branches were separated manually by cutting and the trunk was kept for sun drying for 3 months. The trunk was chopped into smaller flakes of wood and then dried in an oven at 70 C for 8 h and cut into pieces with an average size of1.5 -1.5 cm2, until the moisture content reached 4–5% (wet weight basis). Those pieces were ground using a portable grinding machine (Spong-90, Leeds, UK) and sieved with a sieve size of 6 mm and was then subjected to size reduction using a blender and finally sieved using a stainless steel sieve of 80 mesh size (with the diameter of0.177 mm). The obtained powder was placed in a polythene bag,sealed and kept at room temperature until use.
2.2.2. Extraction of phenolic compounds from kiam wood
Kiam wood powder was subjected to extraction according to the method of Santoso, Yoshie-stark, and Suzuki with slight modifications. The powder (10 g) was mixed with 150 ml of absolute ethanol. The mixture was stirred at room temperature (28–30 C) using a magnetic stirrer for 6 h. The mixture was then centrifuged at 5000g for 10 min at room temperature using a RC-5B plus centrifuge. The supernatant was filtered using a Whatman filter paper No. 1 . The filtrate was then evaporated at 40 C using an Eyela rotary evaporator. To remove the residual ethanol, the extract was purged with nitrogen gas. The extract was then dried using a freeze dryerto obtain the dry extract. Dried extract was powdered using a mortar and pestle and was kept in an amber bottle and stored in a desiccator until use. The dried powderised extract was referred to as‘‘ethanolic kiam wood extract; EKWE’’. EKWE had the total phenolic content of 602.61 mg tannic acid equivalent/g and consisted of tannic acid at a concentration of 545.57 mg/g.
2.3. Preparation of fish emulsion sausages containing tannic acid and EKWE
Striped catfish (Pangasius hypophthalamus) weighing 3–4 kg, off-loaded 24 h after capture and stored in ice, were purchased from the fish market in Hat Yai, Songkhla, Thailand. The fish were kept in ice during transportation to the Department of Food Technology, Prince of Songkla University. Upon arrival, fish were washed with tap water, filleted, deskinned and minced using a mincer with a hole diameter of 5 mm. Moisture content of the mince was adjusted to 86%. Fish emulsion sausages were prepared following the method described by Panpipat and Yongsawatdigul with slight modifications. Fish mince (85 g) was added with sodium chloride (2 g), sodium tripolyphosphate (1.5 g) and soy protein isolate (1.5 g) and menhaden oil (10 g). The mixture was ground for 3 min using a Panasonic Food Processor.To study the effect of tannic acid or EKWE on lipid oxidation and textural properties of emulsion sausages, tannic acid and EKWE with total phenolic content of 602.6 mg tannic acid equivalent/g dry powder and tannic acid content of 545.57 mg/g dry powder was added to obtain the designated final concentration. Tannic acid (0.02% and 0.04% w/w) or EKWE (0.04% and 0.08% w/w) dissolved in distilled water were added to the mixture along with menhaden oil (10% v/w). Subsequently, the mixture was further ground thoroughly for 5 min in order to obtain a homogenous paste. The paste was stuffed into a cellophane casing (diameter of 22 mm) and pre-incubated at 55 C for 40 min prior to cooking at 80 C for 15 min in a temperature controlled water bath.The samples added with tannic acid at a level of 0.02% and0.04% were referred to as ‘TA-0.02’ and ‘TA-0.04’ respectively and those added with EKWE at a level of 0.04% and 0.08% were referred to as ‘EKWE-0.04’ and ‘EKWE-0.08’, respectively. The control samples(C) were prepared in the similar manner but distilled water was added instead of tannic acid or EKWE solution. Samples were cooled for about 30 min in iced water and stored at 4 C. Samples were randomly taken at day 0, 4, 8, 12, 16 and 20 of storage for analysis of lipid oxidation products. Sensory analysis was conducted at day 0, 12 and 20, while samples were subjected to textural analysis at day 0 and 20.
2.4. Analyses
2.4.1. Determination of peroxide value
Peroxide value (PV) was determined as per the method of Richards and Hultin (2002) with a slight modification. Samples (1 g) were mixed with 11 ml of chloroform/methanol (2:1, v/v). The mixtures were homogenised at a speed of 13,500 rpm for 2 min. Homogenates were then filtered using a Whatman No. 1 filter paper. Two millilitres of 0.5% NaCl were then added to 7 ml of the filtrate.
The mixtures were vortexed at a moderate speed for 30 s using a Vortex-Genie2 mixer 4 and then centrifuged at 3000g for 3 min to separate the sample into two phases.Two millilitres of cold chloroform/methanol (2:1, v/v) were added to 3 ml of the lower phase. Twenty-five microlitres of 30% ammonium thiocyanate and 25 ll of 20 mM iron (II) chloride were added to the mixture. Reaction mixtures were allowed to stand for 20 min at room temperature and the absorbance was read at 500 nm. A standard curve was prepared using cumene hydroperoxide with the concentration range of 0.5–2 ppm.
2.4.2. Determination of thiobarbituric acid-reactive substances
(TBARS)
Thiobarbituric acid-reactive substances (TBARS) were determined as described by Buege and Aust (1978). Samples (0.5 g) were mixed with 2.5 ml of a TBA solution containing 0.375% thiobarbituric
acid, 15% trichloroacetic acid and 0.25 N HCl. The mixtures were heated in a boiling water for 10 min to develop a pink colour,cooled with running tap water and then sonicated for 30 min using an Elma (S 30 H) sonicator. The mixture was then centrifuged at 5000g at 25 C for 10 min. The absorbance of the supernatant was measured at 532 nm. A standard curve was prepared using 1,1,3,3-tetramethoxypropane (MAD) at the concentration ranging from 0 to 10 ppm and TBARS were expressed as mg of MAD equivalents/kg sample.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. เคมีภัณฑ์Menhaden น้ำมัน (ความบริสุทธิ์ 99.5%) กรด tannic ออสเมียม cumene hydroperoxideand ซื้อจากซิกเคมีจำกัดโซเดียมคลอไรด์ โซเดียมไบคาร์บอเนต potassiumiodide กรด trichloroacetic และ glutaraldehyde ได้รับมาจากบริษัทเมอร์ค หัวไฮโดรเจนฟอสเฟต sodiumtripolyphosphate โปรตีนถั่วเหลือง กรด 2-thiobarbituric, thiocyanate แอมโมเนีย และคลอไรด์เหล็กซื้อ fromFluka เคมี จำกัด สารเคมีทั้งหมดใช้เกรดวิเคราะห์ wereof2.2 การเตรียมไม้ kiam แยก2.2.1 การเก็บและเตรียมไม้ kiamไม้ kiam ได้รับจากป่าจังหวัดพัทลุงภาคใต้ของไทย แผนภูมิที่เกี่ยวกับ yearsold 15 – 20 และเก็บเกี่ยวในพฤษภาคม 2010 ต้นไม้ถูกตัดโดยเครื่อง sawing ใบไม้และสาขาถูกคั่นด้วยตนเอง โดยตัด และลำต้นเก็บไว้อาทิตย์แห้ง 3 เดือน ลำต้นถูกสับเป็น flakes ขนาดเล็กไม้แล้วอบแห้งในเตาอบที่ 70 C สำหรับ 8 h และตัดเป็นชิ้นมีขนาดเฉลี่ย of1.5 -1.5 cm2 จนชื้นถึง 4-5% (น้ำหนักเปียกพื้นฐาน) ชิ้นที่ถูกพื้นดินโดยใช้เครื่องบดแบบพกพา (Spong-90 ลีดส์ สหราชอาณาจักร) และ sieved ตะแกรงขนาด 6 มม.ถูกแล้วต้องลดขนาดใช้เบลนเดอร์เป็น และสุดท้าย sieved ใช้ตะแกรงสเตนเลสขนาดตาข่าย 80 (มี mm of0.177 เส้นผ่าศูนย์กลาง) ผงได้รับถูกวางในถุง polythene ปิดสนิท และเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องจนกว่าจะใช้2.2.2 การสกัดสารฟีนอจากไม้ kiamผงไม้ Kiam ถูกต้องแยกตามวิธีการ Santoso, Yoshie สิ้นเชิง และ Suzuki มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ผง (10 g) ถูกผสมกับ 150 ml ของแอบโซลูทเอทานอล ส่วนผสมที่กวนที่อุณหภูมิห้อง (28 – 30 C) โดยใช้ช้อนคนแม่เหล็กสำหรับ 6 h ส่วนผสมมี centrifuged แล้วที่ 5000g ใน 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องใช้ RC-5B บวกเครื่องหมุนเหวี่ยง Supernatant ที่ถูกกรองโดยใช้กระดาษกรอง Whatman No. 1 สารกรองมีแล้วหายไปที่ใช้การ Eyela โรตารี่ evaporator C 40 การเอาเอทานอลเหลือ การดึงข้อมูลถูกลบ ด้วยก๊าซไนโตรเจน การดึงข้อมูลได้ แล้วแห้งใช้ dryerto หยุดรับสารสกัดแห้ง สารสกัดแห้งเป็นผงใช้เป็นโกร่ง และถูกเก็บไว้ในขวดเป็นสีเหลืองอำพัน และเก็บไว้ใน desiccator การจนใช้ สารสกัดจาก powderised แห้งถูกเรียกว่า '' ไม้ ethanolic kiam แยก EKWE'' EKWE มีฟีนอเนื้อหารวมของเทียบเท่ากรด tannic 602.61 mg/g และประกอบด้วยกรด tannic ที่ความเข้มข้นของ 545.57 mg/g2.3. เตรียมปลาไส้กรอกอิมัลชันที่ประกอบด้วยกรด tannic และ EKWEลายปลา (Pangasius hypophthalamus) 3 – 4 กิโลกรัม off-loaded 24 ชมหลังจากจับภาพ และเก็บไว้ในน้ำแข็ง เครื่องชั่งถูกซื้อจากตลาดปลาในหาดใหญ่ สงขลา ไทย ปลาถูกเก็บไว้ในน้ำแข็งในระหว่างขนส่งไปแผนกอาหารเทคโนโลยี มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ เมื่อมาถึง ปลาขึ้นล้าง ด้วยน้ำประปา filleted, deskinned และสับด้วยสับเป็นเส้นผ่าศูนย์กลางรูของ 5 mm. มีการปรับปรุงเนื้อหาของไส้ 86% ความชื้น ปลาไส้กรอกอิมัลชันได้เตรียมทำตามวิธีที่อธิบายไว้ โดย Panpipat และ Yongsawatdigul มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย เพิ่มไส้ปลา (85 กรัม) กับโซเดียมคลอไรด์ (2 กรัม), โซเดียม tripolyphosphate (1.5 g) และโปรตีนถั่วเหลืองแยก (1.5 g) และ menhaden น้ำมัน (10 กรัม) ส่วนผสมมีดินใน 3 นาทีโดยใช้การศึกษาพานาโซนิค Processor.To อาหารผลของกรด tannic หรือ EKWE เกิดออกซิเดชันของไขมันและสมบัติ textural ของไส้กรอกอิมัลชัน กรด tannic และ EKWE มีเนื้อหารวมฟีนอ 602.6 มิลลิกรัมกรด tannic เทียบ เท่า/g แห้งผงและกรด tannic เนื้อหาผงแห้ง 545.57 mg/g ถูกเพิ่มเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายกำหนด กรด tannic (0.02% และ 0.04% w/w) หรือ EKWE (0.04% และ 0.08% w/w) ละลายในน้ำกลั่นถูกเพิ่มเพื่อผสมกับน้ำมัน menhaden (10% v/w) ในเวลาต่อมา ส่วนผสมได้เพิ่มเติมล่างอย่างใน 5 นาทีเพื่อรับวางให้ วางไส้ลงในปลอก cellophane (เส้นผ่านศูนย์กลาง 22 มม.) และ incubated ก่อนที่ C 55 สำหรับ 40 นาทีก่อนอาหาร 80 C สำหรับ 15 นาทีในอ่างน้ำควบคุมอุณหภูมิตัวอย่างเพิ่ม มีกรด tannic ระดับ 0.02% and0.04% ถูกเรียกว่า ' TA-0.02' และ ' TA-0.04' ตามลำดับ และที่เพิ่มกับ EKWE ที่ระดับ 0.04% และ 0.08% ถูกเรียกว่า ' EKWE-0.04' และ ' EKWE-0.08', ตามลำดับ Samples(C) ควบคุมถูกจัดทำในลักษณะคล้ายกัน แต่เพิ่มน้ำกลั่นแทนกรด tannic หรือโซลูชั่น EKWE ตัวอย่างระบายความร้อนด้วยสำหรับในน้ำเย็นประมาณ 30 นาที และเก็บไว้ที่ 4 C. ตัวอย่างสุ่มที่ถ่ายในวันที่ 0, 4, 8, 12, 16 และ 20 ของการจัดเก็บสำหรับการวิเคราะห์ของผลิตภัณฑ์ออกซิเดชันของไขมัน การวิเคราะห์ทางประสาทสัมผัสได้ดำเนินวันที่ 0, 12 และ 20 ในขณะที่ตัวอย่างถูกต้องวิเคราะห์ textural วันที่ 0 และ 202.4 การวิเคราะห์2.4.1 การกำหนดค่าเปอร์ออกไซด์ค่าเปอร์ออกไซด์ (PV) ที่ถูกกำหนดตามวิธีการของริชาร์ดและ Hultin (2002) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ตัวอย่าง (1 g) ถูกผสมกับ 11 ml ของคลอโรฟอร์ม/เมทานอล (2:1, v/v) น้ำยาผสมจะถูก homogenised ที่ความเร็วรอบต่อนาที 13,500 สำหรับ 2 นาที Homogenates แล้วถูกกรองโดยใช้กระดาษกรอง Whatman No. 1 Millilitres สองของ NaCl ได้เพิ่มไป 7 ml ของสารกรอง 0.5%น้ำยาผสมจะถูก vortexed ที่ความเร็วปานกลางสำหรับ 30 s ใช้เครื่องผสม Vortex Genie2 4 และ centrifuged แล้ว ที่ 3000g สำหรับ 3 นาทีตัวอย่างที่แบ่งระยะที่สองMillilitres สองของคลอโรฟอร์มเย็นเม (2:1, v/v) ถูกเพิ่มเข้าไป 3 ml ของระยะต่ำ ยี่สิบห้า microlitres thiocyanate แอมโมเนีย 30% และ 25 จะ 20 มม.เหล็ก (II) คลอไรด์ได้เพิ่มส่วนผสม ส่วนผสมของปฏิกิริยาได้รับอนุญาตให้ยืนสำหรับ 20 นาทีที่อุณหภูมิห้อง และ absorbance ที่ถูกอ่าน 500 nm เส้นโค้งมาตรฐานถูกเตรียมด้วย cumene hydroperoxide ช่วงความเข้มข้น 0.5-2 ppm2.4.2 การกำหนด thiobarbituric กรดปฏิกิริยาสาร(TBARS)Thiobarbituric กรดปฏิกิริยาสาร (TBARS) ถูกกำหนดเป็นโดย Buege และบริษัท (1978) ตัวอย่าง (0.5 กรัม) ถูกผสมกับ 2.5 ml ของโซลูชัน TBA thiobarbituric 0.375% ประกอบด้วยกรด กรด trichloroacetic 15% และ 0.25 N HCl ส่วนผสมมีความร้อนในน้ำเดือด 10 นาทีสำหรับพัฒนาสีชมพู ระบายความร้อนด้วย ด้วยการใช้น้ำประปา และ sonicated สำหรับใช้เป็น sonicator Elma (S 30 H) 30 นาทีแล้ว ส่วนผสมมี centrifuged แล้วที่ 5000g ที่ 25 C สำหรับ 10 นาที มีที่วัด absorbance ของ supernatant 532 nm เส้นโค้งมาตรฐานถูกเตรียมการใช้ 1,1,3,3-tetramethoxypropane (MAD) ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0 ถึง 10 ppm และ TBARS ถูกแสดงเป็นมิลลิกรัมของกิโลกรัมเทียบเท่าบ้าอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สารเคมี
น้ำมัน menhaden, กรดแทนนิค (99.5% ความบริสุทธิ์), คิวมีน hydroperoxideand ออสเมียมที่ซื้อมาจากซิกม่า จำกัด เคมีโซเดียมคลอไรด์, โซเดียมไบคาร์บอเนต potassiumiodide กรดไตรคลอโรและ glutaraldehyde ที่ได้รับจากเมอร์ ไดโซเดียมฟอสเฟตไฮโดรเจน sodiumtripolyphosphate, สารสกัดโปรตีนจากถั่วเหลืองกรดด่างทั้งหมดที่ระเหย 2, thiocyanate แอมโมเนียมคลอไรด์และเหล็กกำลังซื้อ fromFluka จำกัด เคมีสารเคมีที่ใช้ในการวิเคราะห์ wereof เกรด.
2.2 การเตรียมสารสกัดจากไม้ Kiam
2.2.1 การเก็บและการจัดเตรียมไม้ Kiam
ไม้ Kiam ที่ได้รับจากป่าของจังหวัดพัทลุงในภาคใต้ของประเทศไทย ต้นไม้ก็ประมาณ 15-20 ปีขึ้นไปและเก็บเกี่ยวในเดือนพฤษภาคมปี 2010 ต้นไม้ถูกตัดโดยใช้เครื่องเลื่อย; ใบและกิ่งไม้ที่ถูกแยกออกด้วยตนเองโดยการตัดและลำตัวถูกเก็บไว้สำหรับการอบแห้งดวงอาทิตย์เป็นเวลา 3 เดือน ลำต้นถูกหั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ จากไม้และแห้งในเตาอบที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 ชั่วโมงและหั่นเป็นชิ้นที่มีขนาดเฉลี่ย of1.5 -1.5 cm2 จนกระทั่งความชื้นถึง 4-5% (โดยน้ำหนักเปียก) . ผู้ที่ได้รับชิ้นส่วนพื้นดินโดยใช้เครื่องบดแบบพกพา (เปียก-90, ลีดส์, สหราชอาณาจักร) และร่อนด้วยตะแกรงขนาด 6 มิลลิเมตรและถูกยัดเยียดจากนั้นก็จะลดขนาดการใช้เครื่องปั่นและในที่สุดก็ใช้ร่อนตะแกรงสแตนเลสขนาด 80 ตาข่าย ( ที่มีเส้นผ่าศูนย์กลาง of0.177 มม) ผงที่ได้มาวางไว้ในถุงพลาสติกปิดผนึกและเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องจนใช้.
2.2.2 การสกัดสารฟีนอลจาก Kiam ไม้
Kiam ไม้ผงก็ยังถูกสกัดตามวิธีการของ Santoso, Yoshie-สิ้นเชิงและอีกแห่งหนึ่งที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ผง (10 กรัม) ผสมกับ 150 มิลลิลิตรของเอทานอลแน่นอน ส่วนผสมที่ถูกกวนที่อุณหภูมิห้อง (28-30 C) โดยใช้เครื่องกวนแม่เหล็ก 6 ชั่วโมง ส่วนผสมที่ถูกปั่นแล้วที่ 5000g เป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องโดยใช้ RC-5B บวก centrifuge ใสถูกกรองโดยใช้กระดาษกรอง Whatman ที่ 1 กรองถูกระเหยแล้วที่ 40 C โดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุน Eyela ในการลบเอทานอลที่เหลือสารสกัดจากได้รับการชำระด้วยก๊าซไนโตรเจน สารสกัดจากนั้นก็แห้งโดยใช้แช่แข็ง dryerto ได้รับสารสกัดแห้ง สารสกัดจากผงแห้งโดยใช้ครกและสากและถูกเก็บไว้ในขวดสีเหลืองอำพันและเก็บไว้ในเดซิจนกว่าจะใช้ สารสกัดจาก powderised แห้งก็จะเรียกว่าสารสกัดจาก as''ethanolic ไม้ Kiam; Ekwe '' Ekwe มีปริมาณฟีนอลรวมทั้งสิ้น 602.61 มิลลิกรัมกรดแทนนิคเทียบเท่า / กรัมและมีกรดแทนนิคที่มีความเข้มข้นของ 545.57 mg / g.
2.3 การเตรียมความพร้อมของไส้กรอกอิมัลชันปลาที่มีกรดแทนนิคและ Ekwe
ปลาดุกลาย (Pangasius hypophthalamus) ชั่งน้ำหนัก 3-4 กิโลกรัมที่ขน 24 ชั่วโมงหลังจากการจับกุมและเก็บไว้ในน้ำแข็งที่ซื้อมาจากตลาดปลาในหาดใหญ่, สงขลา ปลาถูกเก็บไว้ในน้ำแข็งในระหว่างการขนส่งไปยังภาควิชาเทคโนโลยีอาหาร, มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ เมื่อมาถึงปลาถูกล้างด้วยน้ำประปาเสา, deskinned และสับโดยใช้เนื้อหลุมที่มีเส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มม ปริมาณความชื้นของสับปรับถึง 86% ไส้กรอกอิมัลชันปลาได้จัดทำต่อไปนี้วิธีการที่อธิบายโดย Panpipat Yongsawatdigul และมีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ปลาสับ (85 กรัม) ที่เติมโซเดียมคลอไรด์ (2 กรัม), โซเดียม (1.5 กรัม) และสารสกัดโปรตีนจากถั่วเหลือง (1.5 กรัม) และน้ำมัน menhaden (10 กรัม) ส่วนผสมเป็นพื้นดินเป็นเวลา 3 นาทีโดยใช้อาหารพานาโซนิค Processor.To ศึกษาผลของกรดแทนนิคหรือ Ekwe บนออกซิเดชันของไขมันและเนื้อสัมผัสของไส้กรอกอิมัลชันกรดแทนนิคและ Ekwe ฟีนอลที่มีเนื้อหาโดยรวมของ 602.6 มิลลิกรัมกรดแทนนิคเทียบเท่า / กรัมผงแห้ง และเนื้อหาของกรดแทนนิค 545.57 มิลลิกรัม / กรัมผงแห้งถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายที่กำหนด กรดแทนนิค (0.02% และ 0.04% w / W) หรือ Ekwe (0.04% และ 0.08% w / W) ละลายในน้ำกลั่นมีการเพิ่มส่วนผสมพร้อมกับน้ำมัน menhaden (10% ปริมาตร / w) ต่อจากนั้นส่วนผสมที่ถูกเพิ่มเติมพื้นดินอย่างละเอียดเป็นเวลา 5 นาทีเพื่อให้ได้วางเป็นเนื้อเดียวกัน วางถูกยัดลงไปในท่อกระดาษแก้ว (ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 22 มม) และก่อนการบ่มที่อุณหภูมิ 55 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 40 นาทีก่อนที่จะมีการปรุงอาหารที่ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาทีในการควบคุมอุณหภูมิตัวอย่าง bath.The น้ำเพิ่มด้วยกรดแทนนิคในระดับของ 0.02% and0.04% ถูกเรียกว่า 'TA-0.02' และ 'TA-0.04' ตามลำดับและผู้ที่เพิ่มเข้ามาด้วย Ekwe ที่ระดับ 0.04% และ 0.08% ถูกเรียกว่า 'Ekwe-0.04' และ 'Ekwe-0.08 'ตามลำดับ ตัวอย่างการควบคุม (C) ได้จัดทำในลักษณะที่คล้ายกัน แต่น้ำกลั่นถูกเพิ่มเข้ามาแทนกรดแทนนิคหรือสารละลาย Ekwe ตัวอย่างที่ถูกระบายความร้อนประมาณ 30 นาทีในน้ำเย็นและเก็บไว้ที่ 4 ตัวอย่าง C. ถูกถ่ายโดยการสุ่มในวันที่ 0, 4, 8, 12, 16 และ 20 ของการจัดเก็บสำหรับการวิเคราะห์ของผลิตภัณฑ์ออกซิเดชันของไขมัน การวิเคราะห์ทางประสาทสัมผัสได้ดำเนินการในวันที่ 0, 12 และ 20 ขณะที่กลุ่มตัวอย่างที่ถูกยัดเยียดให้การวิเคราะห์เนื้อสัมผัสในวันที่ 0 และ 20.
2.4 การวิเคราะห์
2.4.1 การกำหนดค่าเปอร์ออกไซด์
ค่าเปอร์ออกไซด์ (PV) ถูกกำหนดตามวิธีการของริชาร์ดและ Hultin (2002) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ตัวอย่าง (1 กรัม) ได้รับการผสมกับ 11 มิลลิลิตรคลอโรฟอร์ม / เมทานอล (2: 1, v / v) ถูกผสมเข้ากันที่ความเร็ว 13,500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 นาที homogenates ถูกกรองแล้วใช้เบอร์ที่ 1 กระดาษกรอง สองมิลลิลิตร 0.5% NaCl ถูกเพิ่มแล้วถึง 7 มลกรอง.
ผสมได้รับการ vortex ที่ความเร็วปานกลาง 30 วินาทีโดยใช้ผสม Vortex-Genie2 4 และปั่นแล้วที่ 3000g เป็นเวลา 3 นาทีในการแยกตัวอย่างเป็นสองขั้นตอน สองมิลลิลิตรของคลอโรฟอร์มเย็น / เมทานอล (2: 1, v / v) ถูกเพิ่มเข้าไปใน 3 มลของเฟสที่ต่ำกว่า ยี่สิบห้า microlitres ของ thiocyanate 30% แอมโมเนียมและ 25 LL เหล็ก 20 มิลลิ (II) คลอไรด์ถูกเพิ่มเข้าไปในส่วนผสม ผสมปฏิกิริยาได้รับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 20 นาทีที่อุณหภูมิห้องและการดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 500 นาโนเมตร กราฟมาตรฐานได้รับการจัดทำขึ้นโดยไฮโดรคิวมีนที่มีช่วงความเข้มข้นของ 0.5-2 พีพีเอ็ม.
2.4.2 การวิเคราะห์หาปริมาณกรดด่างทั้งหมดที่ระเหยสารปฏิกิริยา
(TBARS)
สารกรดด่างทั้งหมดที่ระเหยปฏิกิริยา (TBARS) ได้รับการพิจารณาตามที่อธิบายไว้โดย Buege และ Aust (1978) ตัวอย่าง (0.5 กรัม) ได้รับการผสมกับ 2.5 มล. ของการแก้ปัญหาที่มี TBA 0.375% ด่างทั้งหมดที่ระเหย
กรด 15% กรดไตรคลอโรและไป 0.25 N HCl ผสมถูกความร้อนในน้ำเดือด 10 นาทีเพื่อพัฒนาสีชมพูระบายความร้อนด้วยการใช้น้ำประปาและ sonicated แล้วเป็นเวลา 30 นาทีโดยใช้ Elma (S 30 H) Sonicator ส่วนผสมที่ถูกปั่นแล้วที่ 5000g ที่ 25 C เป็นเวลา 10 นาที การดูดกลืนแสงของสารละลายวัดที่ 532 นาโนเมตร กราฟมาตรฐานได้รับการจัดทำขึ้นโดย 1,1,3,3-tetramethoxypropane (MAD) ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0 ถึง 10 ppm และ TBARS ถูกแสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่า MAD / กิโลกรัมตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . สารเคมี
เมนแฮเดนเทิร์นคีย์ ( น้ำมัน , ความบริสุทธิ์ 99.5% ) , คิวมีน hydroperoxideand ออสเมียมซื้อมาจาก Sigma co เคมีโซเดียมคลอไรด์ , โซเดียมไบคาร์บอเนต , potassiumiodide , กรดไตรคลอโรอะซิติก และกลูตาราลดีไฮด์ ได้จากบริษัทเมอร์ค โซเดียมไฮโดรเจนฟอสเฟต sodiumtripolyphosphate 2-thiobarbituric กรด , แยก , โปรตีนถั่วเหลืองแอมโมเนียมไทโอไซยาเนตและเหล็กคลอไรด์ ซื้อ fromfluka เคมี . ทั้งหมดของสารเคมีเกรดวิเคราะห์
2.2 . การเตรียมสารสกัดจากไม้เคี่ยม
2.2.1 . การเก็บและเตรียมตัวไม้เคี่ยมไม้เคี่ยม
ได้มาจากป่าของพัทลุง เป็นจังหวัดในภาคใต้ของประเทศไทย ต้นไม้ประมาณ 15 - 20 ปี และเก็บเกี่ยวในเดือนพฤษภาคม 2553ต้นไม้ถูกตัดโดยใช้เครื่องเลื่อย ใบและกิ่งแยกได้ด้วยตนเอง โดยการตัดลำต้นที่ถูกเก็บไว้สำหรับการตากแดดเป็นเวลา 3 เดือน รถถูกสับเป็นเกล็ดขนาดเล็กของไม้และแห้งในเตาอบที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 8 ชั่วโมง และหั่นเป็นชิ้นขนาด of1.5 เฉลี่ย 1.5 cm2 จนกระทั่งความชื้นถึง 4 - 5 % ( น้ำหนักเปียก )ชิ้นนั้นพื้นดินโดยใช้เครื่องบดแบบพกพา ( spong-90 , Leeds , UK ) และขนาดด้วยตะแกรงขนาด 6 มม. และก็ต้องลดขนาดใช้เครื่องปั่นและสุดท้ายอีกครั้ง โดยใช้ตะแกรงสแตนเลสขนาด 80 mesh ( มีเส้นผ่าศูนย์กลาง of0.177 มิลลิเมตร ) นำผงใส่ในถุง polythene , ปิดผนึกและเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องจนกว่าจะใช้
2.2.2 .การสกัดสารประกอบฟีนอลจากผงไม้เคี่ยมไม้
เกี้ยมภายใต้การสกัดตามวิธีการของ ซานโตโซ โยชิเอะ สตาร์ค และ ซูซูกิ กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย แป้ง ( 10 กรัม ) ผสมกับ 150 ml ทั้งหมด เอทานอล ผสมส่วนผสมที่กวนที่อุณหภูมิห้อง ( 28 - 30 องศาเซลเซียส ) โดยใช้ stirrer แม่เหล็กสำหรับ 6 ชั่วโมงส่วนผสมที่เป็นระดับที่ 5000g สำหรับ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องโดยใช้ rc-5b บวกเหวี่ยง . และน่านถูกกรองโดยใช้กระดาษกรอง whatman หมายเลข 1 หนักก็ระเหยที่อุณหภูมิ 40 C ใช้ eyela rotary evaporator . เอาแอลกอฮอล์ที่ตกค้าง สกัด คือล้างด้วยแก๊สไนโตรเจน สารสกัดแห้งแล้วใช้ตรึง dryerto ได้รับสารสกัดแห้งสารสกัดจากผงแห้งใช้ครกและสาก และถูกเก็บไว้ในขวดสีชา และเก็บไว้ในเดซิกเคเตอร์จนใช้ powderised แห้งสารสกัดจากไม้เคี่ยมถูกเรียกว่า ''ethanolic สกัด ; ekwe ' ' ekwe มีเนื้อหาฟีนอลิกทั้งหมด 602.61 มิลลิกรัม / กรัม และกรดแทนนิก เทียบเท่า ประกอบด้วย กรดแทนนิกในระดับความเข้มข้น 545.57 mg / g .
2.3การเตรียมปลาไส้กรอกอิมัลชันที่ประกอบด้วยกรดแทนนิค และ ekwe
ปลาสวาย ( Pangasius hypophthalamus ) ชั่ง 3 – 4 กิโลกรัม ปิด 24 ชั่วโมงหลังจากจับโหลดและเก็บไว้ในน้ำแข็ง ซื้อจากตลาดในหาดใหญ่ , สงขลา , ไทย ปลาที่ถูกเก็บไว้ในน้ำแข็งในระหว่างการขนส่งไปยังภาควิชาเทคโนโลยีอาหาร มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ เมื่อมาถึงปลาที่ถูกล้างด้วยน้ำประปา ถลก deskinned สับ , และการใช้สับกับหลุมขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มม. ความชื้นของสับปรับถึง 86 % ไส้กรอกปลาอิมัลชันที่เตรียมไว้โดยวิธี ดังนี้ panpipat และ yongsawatdigul กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ลาบปลา ( 85 กรัม ) เติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ ( 2 กรัม ) , โซเดียมไตรโพลีฟอสเฟต ( 15 G ) และโปรตีนถั่วเหลืองสกัด ( 1.5 กรัม ) และน้ำมันเมนแฮเดน ( 10 กรัม ) ส่วนผสมดินสำหรับ 3 นาทีโดยใช้หน่วยประมวลผลอาหารพานาโซนิค เพื่อศึกษาผลของกรดแทนนิก หรือ ekwe ต่อปฏิกิริยาออกซิเดชันไขมันและคุณสมบัติทางเนื้อสัมผัสของไส้กรอกอิมัลชัน กรดแทนนิค และ ekwe ที่มีปริมาณฟีนอลทั้งหมด 602.6 มก. กรดแทนนิกเทียบเท่า / กรัมผงแห้งและปริมาณกรดแทนนิค 545 .57 มก. / กรัมผงแห้งเพิ่มให้ได้เขตสุดท้ายที่ใช้ กรดแทนนิก ( 0.02 และ 0.04 % w / w ) หรือ ekwe ( 0.04 บาท และ 0.08 % w / w ) ละลายในน้ำกลั่นที่ถูกผสมด้วยน้ำมันเมนแฮเดน ( % V / W 10 ) โดยผสมดินเพิ่มเติมอย่างละเอียดสำหรับ 5 นาทีเพื่อให้ได้วางเนื้อเดียว .วางถูกยัดเข้าไปในปลอกกระดาษแก้ว ( เส้นผ่าศูนย์กลาง 22 มิลลิเมตร ) และก่อนบ่มที่ 55 C นาน 40 นาทีก่อนการปรุงอาหารที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที ในอุณหภูมิที่ควบคุมน้ำอาบ ตัวอย่างที่เติมกรดแทนนิกในระดับ 0.02 % and0.04 % ถูกเรียกว่า ' ' และ ' ' ta-0.02 ta-0.04 ตามลำดับและเพิ่มกับ ekwe ที่ระดับ 0.04 บาท และ 0.08 % ถูกเรียกว่า ' ekwe-0 .04 ' และ ' ekwe-0.08 ' ตามลำดับ ตัวอย่างควบคุม ( C ) เตรียมในลักษณะที่คล้ายกัน แต่น้ำกลั่นเติมแทนกรดแทนนิค หรือ ekwe โซลูชั่น จำนวนเย็นประมาณ 30 นาทีในน้ำเย็น และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส ทำการสุ่มถ่ายในวันที่ 0 , 4 , 8 , 12 , 16 และ 20 ของกระเป๋าสำหรับการวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาออกซิเดชันไขมัน การวิเคราะห์ทางประสาทสัมผัส ทำการศึกษาในวันที่ 0 ,12 และ 20 , ในขณะที่จำนวนภายใต้การวิเคราะห์เนื้อในวันที่ 0 และ 20 .
2.4 . วิเคราะห์
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . การหาค่าเปอร์ออกไซด์ค่า
เปอร์ออกไซด์ ( PV ) ถูกกำหนดตามวิธีการของ ริชาร์ด และ hultin ( 2002 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ตัวอย่าง ( 1 กรัม ) ผสมกับ 11 ml / เมทานอลคลอโรฟอร์ม ( 2 : 1 v / v ) ส่วนผสมมี homogenised ที่ความเร็ว 10 , 000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 2 นาทีhomogenates แล้วกรองโดยใช้ whatman 1 ไส้กรองกระดาษ 2 มิลลิลิตร 0.5% NaCl ) จากนั้นเพิ่ม 7 ml ของการกรอง .
ผสมเป็น vortexed ที่ความเร็วปานกลาง 30 s โดยใช้เครื่องผสมไฟฟ้าที่ 4 แล้ว vortex-genie2 3000g 3 มินแยกกลุ่มตัวอย่างออกเป็นสองส่วน สองมิลลิลิตรของเย็น / เมทานอลคลอโรฟอร์ม ( 2 : 1 v / v ) คือ เพิ่ม 3 มล. ของช่วงล่างยี่สิบห้า microlitres ของแอมโมเนียมไทโอไซยาเนตร้อยละ 30 และ 25 จะ 20 มม. เหล็ก ( II ) คลอไรด์มีการเพิ่มส่วนผสม ผสมปฏิกิริยาได้รับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 20 นาที ที่อุณหภูมิห้อง และการดูดกลืนแสงก็อ่านที่ 500 นาโนเมตร เส้นโค้งมาตรฐาน เตรียมใช้คิวมีนที่แยกได้ในประเทศไทยมีความเข้มข้นในช่วง 0.5 – 2 ppm .
2.4.2 . การหาปริมาณเท่ากับกรดสาร
รีแอคทีฟ( ปกติ )
เท่ากับกรดปฏิกิริยาสาร ( ปกติ ) ได้รับการพิจารณาตามที่อธิบายไว้โดยและ buege AUST ( 1978 ) ตัวอย่าง ( 0.5 กรัม ) ผสมกับ 2.5 มิลลิลิตรของสารละลายที่มี TBA )
% เท่ากับ 15 % กรด กรดไตรคลอโรอะซิติกและ 0.25 N HCl . ส่วนผสมก็อุ่นในน้ำเดือด 10 นาที เพื่อพัฒนาเป็นสี ชมพูระบายความร้อนด้วยน้ำ แล้ว sonicated วิ่ง 30 นาที โดยใช้ เอ็ลม่า ( 30 ชั่วโมง ) เครื่องเขย่าแบบเสียง . ส่วนผสมที่เป็นระดับที่ 5000g ที่ 25 C 10 นาทีมีการดูดกลืนแสงของน่านคือวัดที่ 532 นาโนเมตร เส้นโค้งมาตรฐานพร้อมใช้ 1,1,3,3-tetramethoxypropane ( บ้า ) ที่ความเข้มข้นตั้งแต่ 0 ถึง 10 ppm และปกติก็แสดงเป็นมิลลิกรัม / กิโลกรัมตัวอย่างบ้า > .