Results and discussionCloning and r

Results and discussion
Cloning and recombinant expression of amyA and glaA
Amplification of the A. tubingensis amyA cDNA yielded
a 1 860 base pair (bp) fragment with 99.8% DNA sequence
homology to the A. kawachii α-amylase gene [Genbank:
AB008370]. Amplification of the A. tubingensis glaA cDNA
yielded a 1 920 bp fragment with 99.3% DNA homology to
the A. shirousami glucoamylase cDNA [Genbank: D10460
and E02366], as well as 100% homology over 1 917 bp with
the A. tubingensis glucoamylase gene, glaA (GenBank:
AY528665). The cDNA sequence of the A. tubingensis α-
amylase gene (amyA) and predicted amino acid sequence
were deposited [GenBank: JF809672].
The amyA and glaA genes were subcloned individually
and combined in yBBH1-derived plasmids (Figure 1,
Table 1) and transformed into the laboratory strain S. cerevisiae
Y294. The S. cerevisiae strains expressing α-amylase
(AmyA) developed clearing zones on solid SC-URA media
containing 2% soluble starch (Figure 2), whilst zones were
neither expected nor observed for strains expressing
the exo-type glucoamylase. Similar results were obtained
when the corresponding plasmids were transformed in S.
cerevisiae Mnuα1 strain, a haploid strain derived from the
industrial MH1000 strain (Table 1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลลัพธ์และสนทนา
โคลน และ recombinant นิพจน์ของ amyA และ glaA
ผลขยายของ cDNA amyA A. tubingensis
ส่วนคู่ฐาน 1 860 (bp) กับลำดับดีเอ็นเอ 99.8%
homology กับยีนα-amylase A. kawachii [Genbank:
AB008370] ขยายของ cDNA glaA A. tubingensis
ผลส่วน bp 1 920 มี homology DNA 99.3% การ
cDNA glucoamylase A. shirousami [Genbank: D10460
E02366 และ], เป็น homology 100% กว่า 1 917 bp กับ
ยีน glucoamylase A. tubingensis, glaA (GenBank:
AY528665) ลำดับ cDNA ของα A. tubingensis การ-
amylase ยีน (amyA) และกรดอะมิโนคาดการณ์ลำดับ
ได้ฝาก [GenBank: JF809672] .
ยีน amyA และ glaA ได้ subcloned แต่ละ
และรวมในมา yBBH1 plasmids (รูปที่ 1,
ตารางที่ 1) และเปลี่ยนเป็นห้องปฏิบัติการต้องใช้ S. cerevisiae
Y294 พัฒนาสายพันธุ์ cerevisiae S. ที่แสดง α-amylase
(AmyA) ล้างโซนบนสื่อ SC URA ทึบ
ประกอบด้วยแป้งละลายน้ำ 2% (รูปที่ 2), ในขณะโซน
ไม่คาดหวัง หรือสังเกตสำหรับสายพันธุ์ที่แสดง
glucoamylase เอกโซชนิด ได้รับผลลัพธ์ที่คล้าย
เมื่อ plasmids สอดคล้องถูกแปลง S.
cerevisiae ที่ Mnuα1 ต้องใช้ ต้องใช้ haploid มา
ต้องใช้ MH1000 อุตสาหกรรม (ตารางที่ 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

และการอภิปรายผล
การโคลนและการแสดงออกของ recombinant amyA glaA และ
การขยายของเอ tubingensis amyA cDNA ผล
1 860 ฐานคู่ (bp) ส่วนที่มี 99.8% ลำดับดีเอ็นเอ
ที่คล้ายคลึงกันกับเอ kawachii α-อะไมเลสยีน [Genbank:
AB008370] การขยายของเอ tubingensis glaA cDNA
ผลส่วน bp 1 920 ด้วย 99.3% ที่คล้ายคลึงกันดีเอ็นเอ
glucoamylase A. shirousami cDNA [Genbank: D10460
และ E02366] เป็น 100% ที่คล้ายคลึงกันกว่า 1 917 bp ด้วย
glucoamylase A. tubingensis ยีน glaA (GenBank:
AY528665) ลำดับยีนของเอ tubingensis α-
อะไมเลสยีน (amyA) และที่คาดการณ์ไว้ลำดับกรดอะมิโนที่
ถูกนำไปฝาก [GenBank: JF809672]
amyA และ glaA ยีนถูก subcloned เป็นรายบุคคล
และการรวมกันในพลาสมิด yBBH1 มา (รูปที่ 1
ตารางที่ 1) และกลายเป็นสายพันธุ์ที่ห้องปฏิบัติการ S. cerevisiae
Y294 สายพันธุ์ S. cerevisiae แสดงα-อะไมเลส
(AmyA) การพัฒนาเขตการล้างในสื่อ SC-URA ของแข็ง
ที่มี 2% แป้งมันที่ละลายน้ำได้ (รูปที่ 2) ในขณะที่โซนที่ถูก
คาดว่ามิได้ปฏิบัติสำหรับสายพันธุ์แสดง
glucoamylase นอกประเภท ผลที่คล้ายกันที่ได้รับ
เมื่อพลาสมิดที่สอดคล้องถูกเปลี่ยนใน S.
cerevisiae สายพันธุ์Mnuα1, สายพันธุ์เดี่ยวที่ได้มาจาก
สายพันธุ์ MH1000 อุตสาหกรรม (ตารางที่ 1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลการอภิปรายและการแสดงออกของยีนและ amya

glaa แบบ A tubingensis amya cDNA จาก
คู่ 1 860 ฐาน ( BP ) ส่วนกับ 99.8% ดีเอ็นเอที่มีลำดับ
A kawachii แอลฟาอะไมเลสพบยีน [ :
ab008370 ] แบบ A tubingensis glaa cDNA
) ขนาด 1 920 BP กับลำดับดีเอ็นเอ 99.3 %

A shirousami ยีนกลูโคอะไมเลส [ ขนาด :และ d10460
e02366 ] เช่นเดียวกับ 100% ซึ่งมากกว่า 1 ถ้า BP ด้วย
A tubingensis ยีนกลูโคอะไมเลส , ( ขนาด glaa :
ay528665 ) วิธีดับ A tubingensis แอลฟา
ยีนอะไมเลส ( amya ) และคาดการณ์ลำดับกรดอะมิโน
ฝากเงิน [ ขนาด : jf809672 ] .
และยีนของแต่ละ amya glaa
และรวมกันใน ybbh1 ได้พลาสมิด ( รูปที่ 1
,ตารางที่ 1 ) และเปลี่ยนเป็นสายพันธุ์ที่ห้องปฏิบัติการของ S . cerevisiae
y294 . S . cerevisiae สายพันธุ์แสดงแอลฟาอะไมเลส
( amya ) พัฒนาโซนในการแข็ง sc-ura สื่อ
ที่มี 2 % ละลายแป้ง ( รูปที่ 2 ) ขณะที่โซนมี
ไม่คาดหวังหรือสังเกตสำหรับสายพันธุ์ที่แสดง
exo ประเภทดาลตัน ผลที่คล้ายกันได้รับ
เมื่อพลาสมิดที่ถูกเปลี่ยนใน S
โดย MNU α 1 สายพันธุ์ เป็นสายพันธุ์ที่ได้มาจากโครโมโซม
mh1000 อุตสาหกรรมสายพันธุ์ ( ตารางที่ 1 )