2.4. Optimization of ALA production in RSW by PNSB strains
A Box–Behnken Design (BBD) was used to determine the optimum
conditions for ALA production in RSW by the three
independent variables; pH (X1), inoculum size (X2), and initial
COD (X3) at 3 levels (Table 1). In our previous works with
other strains of PNSB as inoculants, it was found that inoculum
sizes in a range of 3–10% showed a high efficiency to
reduce COD; however, a low ALA production resulted at 3–
4% inoculum sizes (unpublished data). Based on the preliminary
works and ALA production cost, inoculum sizes were
designed from 5.00% to 7.00% while initial pH (5.50–7.50)
and COD levels (2000–4000 mg/L) were designed by considering
the optimal growth range of PNSB and the most likely
variation of COD levels in RSW. In order to describe the nature
of the response surface methodology in the experimental
region, BBD was entered into the Design-Expert Software
Trial Version (Stat-Ease, Minneapolis, MN, USA). This represents
the design matrix of a 17 set experiment and the experimental
sequence was randomized in order to minimize the
effect of light intensity and temperature by the distance from
the tungsten light source, and each run was conducted in triplicate.
For predicting the optimal point, a second order polynomial
function was fitted to correlate the relationship
between the independent variables and the response (ALA
content). The optimum conditions for ALA production in
RSW by PNSB were obtained by solving the regression equations
and also by analyzing the response surface contour plots
using the same software. The quality of the fit of the model
equations was expressed by the coefficient of determination R2
.
In order to correlate the relationship between the variables
and the response, a quadratic polynomial equation was used
for fitting such as that in Eq. (1)
Yi ¼ b0 þ b1X1 þ b2X2 þ b3X3 þ b12X1X2 þ b13X1X3
þ b23X2X3 þ b11X2
1 þ b22X2
2 þ b33X2
3
ð1Þ
where Yi is the dependent variable, b0 is the intercept, b1 to b33
are the regression coefficient and X1, X2, X3 are the three independent
variables.
All runs were conducted in 120 ml serum bottles containing
80 ml RSW in each bottle and incubated under microaerobiclight
conditions as previously described for 96 h. RSW with
undiluted and tap water diluted samples required to meet the
design of the BBD were used. The inoculum used was a single
culture of TN114 or PP803 and a mixed culture between both
strains at a ratio of 1:1. The following parameters; pH, ORP,
extracellular ALA, COD and viable PNSB cells were monitored
at the start and the end of experiment at 96 h. The viable
PNSB cells at the start point were calculated from PNSB population
in the inoculums at 5.00%, 6.00% and 7.00% as previously
described, while the viable PNSB cell counts at 96 h were
performed only in the experiments that produced maximal
ALA contents. Viable PNSB cells were counted using the
spread plate technique and incubated in an anaerobic jar under
the light for 96 h. The optimal conditions for TN114, PP803
and a mixed culture were then used to confirm them in a verification
test, and uninoculated PNSB was also included as a
control set as native populations of PNSB developed. All
parameters as previously mentioned were also determined in
the verified test.
2.4. การเพิ่มประสิทธิภาพของการผลิต ALA ใน RSW โดยสายพันธุ์ PNSBการออกแบบกล่อง – Behnken (BBD) ถูกใช้เพื่อกำหนดว่ามีประสิทธิภาพสูงสุดเงื่อนไขสำหรับการผลิต ALA ใน RSW โดยสามตัวแปรอิสระ pH (X1) ขนาด inoculum (X2) และการเริ่มต้นCOD (X3) 3 ระดับ (ตารางที่ 1) ในการทำงานของเราก่อนหน้านี้ด้วยสายพันธุ์อื่น ๆ ของ PNSB เป็น inoculants พบ inoculum ที่ขนาดในช่วง 3 – 10% แสดงให้เห็นว่าประสิทธิภาพการลด COD อย่างไรก็ตาม การผลิต ALA ต่ำผลที่ 3 –4% inoculum ขนาด (ไม่เปิดเผยข้อมูล) อิงจากเบื้องต้นทำงานและต้นทุนการผลิต ALA ขนาด inoculum ได้ออกแบบจาก 5.00% 7.00% ขณะที่ค่า pH เริ่มต้น (5.50 – 7.50)และออกแบบ โดยพิจารณาระดับ COD (2000 – 4000 mg/L)ช่วงที่เหมาะสมเจริญเติบโตของ PNSB และมีแนวโน้มมากที่สุดความผันแปรของระดับ COD ใน RSW เพื่ออธิบายลักษณะของวิธีการพื้นผิวตอบสนองในการทดลองภูมิภาค BBD ป้อนเข้าไปกับซอฟต์แวร์ออกแบบผู้เชี่ยวชาญรุ่นทดลองใช้ (ง่ายสถิติ นนี MN สหรัฐอเมริกา) นี้แทนเมตริกซ์การออกแบบการทดลองชุดที่ 17 และการทดลองลำดับเป็นแบบสุ่มเพื่อลดการผลของความเข้มแสงและอุณหภูมิ โดยระยะห่างจากแหล่งกำเนิดแสงทังสเตน และเรียกใช้แต่ละดำเนินการลข้อทำนายจุดที่ดีที่สุด ใบสั่งสองพหุนามฟังก์ชั่นถูกติดตั้งเพื่อเชื่อมโยงความสัมพันธ์ระหว่างตัวแปรอิสระและการตอบสนอง (ALAเนื้อหา) เหมาะสำหรับการผลิต ALA ในRSW โดย PNSB ได้รับ โดยการแก้สมการถดถอยและนอกจากนี้ โดยการวิเคราะห์การตอบสนอง ผิวแปลงใช้ซอฟต์แวร์เดียวกัน ความพอดีของรูปแบบสมการที่ได้แสดงออก โดยค่าสัมประสิทธิ์ของความมุ่งมั่น R2.เพื่อเชื่อมโยงความสัมพันธ์ระหว่างตัวแปรและใช้การตอบสนอง สมการพหุนามกำลังสองทางอุปกรณ์เช่นใน Eq. (1)Yi ¼ b0 þ b1X1 þ b2X2 þ b3X3 þ b12X1X2 þ b13X1X3þ b23X2X3 þ b11X2þ 1 b22X22 þ b33X23ð1Þยี่เป็น ตัวแปร b0 คือ ตัด b1 ถึง b33มีค่าสัมประสิทธิ์การถดถอยและ X1, X 2, X3 มีอิสระสามตัวแปรได้ดำเนินการเรียกใช้ทั้งหมดใน 120 มล.ซีรั่มขวดที่ประกอบด้วย80 ml RSW ในแต่ละขวด และรับการกกภายใต้ microaerobiclightเงื่อนไขที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ สำหรับ 96 RSW ด้วยขจัด และเจือจางน้ำตัวอย่างต้องเป็นไปตามการออกแบบของ BBD การใช้ Inoculum ใช้แก้ไขเดียววัฒนธรรมของ TN114 หรือ PP803 และมีวัฒนธรรมแบบผสมระหว่างทั้งสองสายพันธุ์ที่อัตราส่วน 1:1 พารามิเตอร์ต่อไปนี้ วัดค่า pH, ORPสาร ALA, COD และเซลล์ PNSB ทำงานได้ถูกตรวจสอบเวลาเริ่มต้นและจุดสิ้นสุดของการทดลองที่ 96 h การทำงานได้PNSB เซลล์ที่จุดเริ่มต้นคำนวณจากประชากร PNSBใน inoculums ที่ 5.00%, 6.00% และ 7.00% ก่อนหน้านี้อธิบาย ในขณะที่จำนวนเซลล์ PNSB ทำงานได้ที่ 96 ชั่วโมงดำเนินการเฉพาะในการทดลองที่ผลิตสูงสุดALA เนื้อหา นับได้ PNSB เซลล์โดยใช้การแผ่แผ่นเทคนิค และรับการกกในโถไม่ใช้ออกซิเจนภายใต้แสงสำหรับ 96 h สภาวะที่เหมาะสมสำหรับ TN114, PP803และวัฒนธรรมที่ผสมแล้วนำมายืนยันพวกเขาในการตรวจสอบทดสอบ และ uninoculated PNSB ถูกรวมยังเป็นการตั้งค่าการควบคุมประชากรพื้นเมืองของ PNSB พัฒนา ทั้งหมดพารามิเตอร์ที่กล่าวถึงก่อนหน้านี้ ถูกกำหนดในการทดสอบตาม
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.4 การเพิ่มประสิทธิภาพของการผลิต ALA ใน RSW โดย PNSB สายพันธุ์
กล่อง Behnken ออกแบบ (BBD) ถูกใช้ในการตรวจสอบที่เหมาะสม
เงื่อนไขสำหรับการผลิต ALA ใน RSW โดยสาม
ตัวแปรอิสระ; พีเอช (X1) ขนาดหัวเชื้อ (x2) และเริ่มต้น
COD (X3) 3 ระดับ (ตารางที่ 1) ในผลงานก่อนหน้านี้ของเรากับ
สายพันธุ์อื่น ๆ ของ PNSB เป็นจุลินทรีย์มันก็พบว่าเชื้อ
ขนาดอยู่ในช่วง 3-10% แสดงให้เห็นว่ามีประสิทธิภาพสูงในการ
ลดซีโอดี; อย่างไรก็ตามการผลิต ALA ต่ำส่งผลให้ที่ 3-
4% ขนาดหัวเชื้อ (ข้อมูลที่ไม่ถูกเผยแพร่) บนพื้นฐานเบื้องต้น
ผลงานและค่าใช้จ่ายการผลิต ALA ขนาดหัวเชื้อที่ได้รับ
การออกแบบจาก 5.00% เป็น 7.00% ในขณะที่เริ่มต้นค่า pH (5.50-7.50)
และระดับ COD (2000-4000 mg / L) ได้รับการออกแบบโดยคำนึงถึง
ช่วงการเจริญเติบโตที่ดีที่สุดของ PNSB และ ส่วนใหญ่มีแนวโน้ม
การเปลี่ยนแปลงของค่า COD ใน RSW เพื่อที่จะอธิบายธรรมชาติ
ของผิววิธีการตอบสนองในการทดลอง
ภูมิภาค BBD ถูกป้อนเข้าสู่การออกแบบ-Expert ซอฟแวร์
รุ่นทดลอง (Stat ง่ายดาย Minneapolis, MN, USA) นี้แสดง
เมทริกซ์ออกแบบการทดลองชุดที่ 17 และการทดลอง
ลำดับถูกสุ่มเพื่อลด
ผลกระทบของความเข้มของแสงและอุณหภูมิโดยห่างจาก
แหล่งกำเนิดแสงทังสเตนและแต่ละวิ่งได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า.
ในการทำนายจุดที่ดีที่สุด พหุนามลำดับที่สอง
ฟังก์ชั่นได้รับการติดตั้งจะมีความสัมพันธ์กับความสัมพันธ์
ระหว่างตัวแปรอิสระและการตอบสนอง (ALA
เนื้อหา) สภาวะที่เหมาะสมสำหรับการผลิต ALA ใน
RSW โดย PNSB ที่ได้รับโดยการแก้สมการถดถอย
และโดยการวิเคราะห์แปลงรูปร่างพื้นผิวตอบสนอง
การใช้ซอฟต์แวร์เดียวกัน คุณภาพของความเหมาะสมของรูปแบบ
สมการได้แสดงออกโดยค่าสัมประสิทธิ์การตัดสินใจ R2 เรียก
.
เพื่อที่จะมีความสัมพันธ์ความสัมพันธ์ระหว่างตัวแปร
และการตอบสนองที่สมการพหุนามกำลังสองถูกนำมาใช้
สำหรับการที่เหมาะสมเช่นว่าในสมการ (1)
ยี่¼ B0 Þ b1X1 Þ b2x2 Þ b3X3 Þ b12X1X2 Þ b13X1X3
Þ b23X2X3 Þ b11X2
1 Þ b22X2
2 Þ b33X2
3
ð1Þ
ที่ยี่เป็นตัวแปรตาม B0 คือตัด, B1 เพื่อ B33
มีค่าสัมประสิทธิ์การถดถอยและ X1, X2, X3 เป็นสามอิสระ
ตัวแปร.
วิ่งทั้งหมดถูกดำเนินการใน 120 มล. ขวดเซรั่มที่มี
80 มล. RSW ในแต่ละขวดและบ่มภายใต้ microaerobiclight
เงื่อนไขตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้สำหรับ 96 ชั่วโมง RSW กับ
น้ำเจือจางเจือปนและแตะตัวอย่างที่จำเป็นเพื่อตอบสนอง
การออกแบบของ BBD ถูกนำมาใช้ หัวเชื้อที่ใช้เป็นเดี่ยว
วัฒนธรรมของ TN114 หรือ PP803 และวัฒนธรรมผสมระหว่างทั้งสอง
สายพันธุ์ในอัตราส่วน 1: 1 พารามิเตอร์ต่อไปนี้; วัดค่า pH, ORP,
สาร ALA, ซีโอดีและเซลล์ PNSB ทำงานได้ถูกตรวจสอบ
ที่จุดเริ่มต้นและสิ้นสุดการทดลองที่ 96 ชั่วโมง ทำงานได้
เซลล์ PNSB ที่จุดเริ่มต้นจะถูกคำนวณจากประชากร PNSB
ในหัวเชื้อแบคทีเรียที่ 5.00%, 6.00% และ 7.00% ในขณะที่ก่อนหน้านี้
ได้อธิบายไว้ในขณะที่ทำงานได้จำนวนเซลล์ PNSB ที่ 96 ชั่วโมงได้รับการ
ดำเนินการเฉพาะในการทดลองที่ผลิตสูงสุด
เนื้อหา ALA เซลล์ PNSB ทำงานได้นับโดยใช้
เทคนิคการแพร่กระจายแผ่นและบ่มในขวดแบบไม่ใช้ออกซิเจนภายใต้
แสง 96 ชั่วโมง สภาวะที่เหมาะสมสำหรับ TN114, PP803
และวัฒนธรรมที่ผสมแล้วถูกนำมาใช้เพื่อให้ยืนยันในการตรวจสอบ
การทดสอบและการ uninoculated PNSB ยังถูกรวมเป็น
ควบคุมการตั้งค่าเป็นประชากรชาว PNSB พัฒนา ทุก
พารามิเตอร์ตามที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้นอกจากนี้ยังได้รับการพิจารณาใน
การทดสอบการตรวจสอบแล้ว
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.4 . การเพิ่มประสิทธิภาพการผลิต ALA ใน rsw pnsb สายพันธุ์โดยกล่อง และ เบน เค่นออกแบบ ( BBD ) ถูกใช้เพื่อตรวจสอบที่เหมาะสมเงื่อนไขสำหรับการผลิต ALA ใน rsw โดยสามตัวแปรอิสระคือ pH ( x1 ) โดยขนาด ( X2 ) และเริ่มต้นซีโอดี ( x3 ) ใน 3 ระดับ ( ตารางที่ 1 ) ในผลงานของเราที่ผ่านมากับสายพันธุ์อื่น ๆของ pnsb เป็นหัวเชื้อ พบว่าเชื้อขนาดในช่วง 3 - 10 % พบว่า ประสิทธิภาพสูงการลดซีโอดี อย่างไรก็ตาม การผลิตผลที่ 3 –เอ๋น้อยขนาด 3 4 % ( ข้อมูลเผยแพร่ ) โดยเบื้องต้นงานและต้นทุนการผลิตกล้าเชื้อขนาดได้อ๊ะออกแบบจาก 5.00 % 7.00 % ในขณะที่ pH เริ่มต้น ( 5.50 ) 7.50 )และระดับซีโอดี ( 2000 - 4000 mg / L ) ได้รับการออกแบบโดยพิจารณาการเติบโตในช่วง pnsb และมากที่สุดการเปลี่ยนแปลงของซีโอดีในระดับ rsw . ในการอธิบายธรรมชาติของพื้นผิวตอบสนองวิธีการในการทดลองภูมิภาค , BBD เข้าไปในผู้เชี่ยวชาญด้านการออกแบบซอฟต์แวร์รุ่นทดลอง ( stat ง่าย , Minneapolis , MN , USA ) นี้ หมายถึงการออกแบบเมทริกซ์ของ 17 ชุดทดลองและทดลองลำดับถูกสุ่มเพื่อลดผลของความเข้มแสง และอุณหภูมิ โดยระยะทางจากทังสเตน แสง และเรียกใช้แต่ละดำเนินการทั้งสามใบในจุดที่เหมาะสม , พหุนามลำดับที่สองฟังก์ชันที่ถูกติดตั้งกับสัมพันธ์ความสัมพันธ์ระหว่างตัวแปรอิสระและการตอบสนอง ( ลาเนื้อหา ) สภาวะที่เหมาะสมสำหรับการผลิต ALA ในrsw โดย pnsb ได้โดยการแก้สมการและจากการวิเคราะห์พื้นผิวผลตอบสนองรูปแปลงใช้โปรแกรมเดียวกัน คุณภาพของแบบพอดีสมการแสดงโดยค่าสัมประสิทธิ์การตัดสินใจอาร์ทู.เพื่อหาความสัมพันธ์ระหว่างตัวแปรและการตอบสนอง การใช้สมการพหุนามกำลังสองกระชับเช่นในอีคิว ( 2 )อี¼ B0 þ b1x1 þ b2x2 þ b3x3 þ b12x1x2 þ b13x1x3þ b23x2x3 þ b11x21 þ b22x22 þ b33x23 .ð 1 Þที่ อี คือ ตัวแปรตาม คือ สกัดกั้น B0 , B1 เพื่อ b33เป็นค่าสัมประสิทธิ์ถดถอย x1 , x2 , x3 เป็นสามอิสระตัวแปรทั้งหมดวิ่งทดสอบในเซรั่มขวดบรรจุ 120 มล.80 ml rsw ในแต่ละขวด บ่มได้ที่ microaerobiclightเงื่อนไขตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้าใน rsw 96 ชั่วโมงกับเจือปนและน้ำเจือจางตัวอย่างต้องตอบสนองการออกแบบของ BBD มาใช้ เชื้อที่ใช้เป็นเดี่ยววัฒนธรรมของ tn114 หรือ pp803 และเป็นวัฒนธรรมผสมระหว่างทั้งสองสายพันธุ์ในอัตราส่วน 1 : 1 พารามิเตอร์ต่อไปนี้ ; pH , ORP ,และเอ๋ ซีโอดี และได้ถูก pnsb เซลล์ที่เริ่มต้นและสิ้นสุดการทดลองที่ 96 ชั่วโมงได้pnsb เซลล์ที่จุดเริ่ม pnsb คำนวณจากประชากรใน 18 ชั่วโมงที่ 5.00 % 6.00 % 7.00 % ก่อนหน้านี้เป็นอธิบาย ในขณะที่เซลล์นับได้ pnsb 96 ชั่วโมงคือแสดงเฉพาะในการทดลองผลิตสูงสุดอ้าวเนื้อหา ได้ pnsb cells นับใช้แผ่แผ่นเทคนิคและบ่มในขวดอากาศใต้ไฟ 96 ชั่วโมง สภาวะที่เหมาะสม tn114 pp803 ,และเป็นวัฒนธรรมที่ผสมแล้วใช้เพื่อยืนยันในการตรวจสอบการทดสอบและการ pnsb ก็รวมเป็นชุดควบคุมเป็นประชากรพื้นเมืองของ pnsb พัฒนา ทั้งหมดพารามิเตอร์ตามที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้ยังมุ่งมั่นในตรวจสอบทดสอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
