A 200 μL sample from each treatment

A 200 μL sample from each treatment suspension
was incubated with an equal volume of TALP-HEPES
(HEPES 10 mM, NaCl 127 mM, KCl 3.16 mM, CaCl2.2H2O
2.0 mM, MgCl2.6H2O 0.5 mM, Na lactate 10 mM, NaH2PO4.
H2O 0.35 mM, NaHCO3 2.0 mM, Glucose 5.0 mM) containing
2% Trypan Blue at 37 °C for 10 min, and then centrifuged
at 200 g for 10 min. The pellet was resuspended
with 0.5 mL of TALP- HEPES. Three smears were made
from each sample and fi xed with 2.5% glutaraldehyde for 1
h. The fi xed sperm was air-dried and stained overnight with
0.8% Bismark Brown for 5 min at 40 °C, and 0.8% Rose
Bengal for 30 min at 24 °C. Live and dead sperm were distinguished
in this procedure by staining with Trypan Blue,
in the presence of acrosome on the sperm head resulting in
uptake of Rose Bengal at the sperm tip. Slides were evaluated
by counting 400 cells, using bright fi eld microscopy,
and results were expressed as percentage of sperm with an
intact acrosome

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่าง 200 μL จากหยุดการรักษาแต่ละมี incubated กับปริมาตรการเท่ากันของ TALP HEPES(HEPES 10 mM, NaCl 127 มม. KCl 3.16 มม. CaCl2.2H2O2.0 mM, 0.5 mM, lactate นา 10 มม. NaH2PO4 MgCl2.6H2Oประกอบด้วย H2O 0.35 มม. NaHCO3 2.0 มม. กลูโคส 5.0 mM)2% Trypan Blue ที่ 37 ° C สำหรับ 10 นาที และ centrifuged แล้วที่ 200 กรัมสำหรับ 10 นาที เม็ดถูก resuspendedกับ 0.5 มล.ของ TALP - HEPES ทำสาม smearsจาก xed แต่ละอย่างและไร้สายด้วย 2.5% glutaraldehyde ใน 1h. อสุจ๊าก xed ไร้สาย air-dried และสีค้างคืนด้วยน้ำตาล Bismark 0.8% ใน 5 นาทีที่ 40 ° C และ 0.8% โรสเบงกอลใน 30 นาทีที่ 24 องศาเซลเซียส อสุจิอยู่ และตายแตกต่างในขั้นตอนนี้โดยการย้อมสีด้วย Trypan Blueในต่อหน้าของอะโครโซมในตัวอสุจิใหญ่เกิดดูดซับของโรสเบงกอลที่แนะนำอสุจิ มีประเมินภาพนิ่งโดยการนับเซลล์ 400 ใช้สว่าง fi eld microscopyและผลลัพธ์ที่แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของสเปิร์มด้วยการอะโครโซมเหมือนเดิม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่าง 200
ไมโครลิตรจากการระงับการรักษาแต่ละถูกบ่มกับปริมาณที่เท่ากันของTALP-HEPES
(HEPES 10 มิลลิ, โซเดียมคลอไรด์ 127 มิลลิ, โพแทสเซียมคลอไรด์ 3.16 มิลลิ, CaCl2.2H2O
2.0 มิลลิ, MgCl2.6H2O 0.5 มิลลิ, แลคเตทนา 10 มิลลิ, NaH2PO4
H2O 0.35 มิลลิ, NaHCO3 2.0 มิลลิกลูโคส 5.0 มิลลิ) ที่มี
2% Trypan สีฟ้าที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10
นาทีและปั่นแล้วที่200 กรัมเป็นเวลา 10 นาที เม็ดถูก resuspended
0.5 มิลลิลิตร TALP- HEPES สามรอยเปื้อนที่ทำจากแต่ละตัวอย่างและคงที่กับ glutaraldehyde 2.5% เป็นเวลา 1 ชั่วโมง สเปิร์มได้คงที่อากาศแห้งและสีค้างคืนกับ0.8% Bismark บราวน์เป็นเวลา 5 นาทีที่ 40 องศาเซลเซียสและ 0.8% โรสเบงกอลเป็นเวลา30 นาทีที่ 24 ° C สเปิร์มที่อยู่อาศัยและตายโดดเด่นในขั้นตอนนี้โดยการย้อมสีที่มี Trypan สีฟ้าในการปรากฏตัวของacrosome บนหัวสเปิร์มที่เกิดขึ้นในการดูดซึมของโรสเบงกอลที่ปลายสเปิร์ม สไลด์ได้รับการประเมินโดยการนับจำนวน 400 เซลล์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ ELD ไฟสว่างและผลการวิจัยแสดงเป็นร้อยละของสเปิร์มที่มีacrosome เหมือนเดิม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

200 μ l ตัวอย่างจากการรักษาแต่ละระงับ
ถูกบ่มด้วยปริมาณเท่ากัน talp-hepes
( ฮีเปส 127 มม. 10 มม. NaCl KCl 3.16 มม. cacl2.2h2o
2.0 มม. mgcl2.6h2o 0.5 มม. , นา และ 10 มม. nah2po4 .
H2O 0.35 มม. , โซเดี่ยม 2.0 มม. , กลูโคส 5.0 mm
2 ) ที่มี % ไตรแพนสีฟ้าที่ 37 °องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที จากนั้นไฟฟ้า
ที่ 200 กรัม นาน 10 นาที เม็ดก็ resuspended
0.5 มิลลิลิตร talp - ฮีเปส .สามละเลงา
จากแต่ละตัวอย่างและ Fi xed ด้วยกลูตารัลดีไฮด์ 2.5% 1
H . fi xed อสุจิเป็นอากาศแห้งและเปื้อนค้างคืนกับ
0.8% bismark สีน้ำตาลสำหรับ 5 นาทีที่ 40 ° C และ 0.8% เพิ่มขึ้น
เบงกอลสำหรับ 30 นาทีที่ 24 องศา อยู่และตายมีความโดดเด่น
ในสเปิร์ม ขั้นตอนนี้โดยการย้อมด้วยไตรแพนสีฟ้า
ต่อหน้าที่มีบนหัวสเปิร์มที่เกิดใน
การดูดซึมของโรสเบงกอลในสเปิร์มที่ปลาย ภาพนิ่งจำนวน
โดยนับ 400 เซลล์โดยใช้กล้องจุลทรรศน์และสดใส , ละมั่ง , ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นค่า

ปกติของอสุจิที่มีอะโครโซม