R. flavipes termite colonies were collected from West Lafayette,
IN and maintained in the laboratory with 24 h of darkness on a diet
of pine wood shims and brown paper towels. Three individual
colonies were used as biological replicates in all studies. Large
termite workers (third instar or later) were used in this study;
workers lacked wing-buds and large mandibles. Sixty termites
were placed in small, Petri dishes (Nunc, 33 mm) sanded with 200
grit sandpaper. Theywere fed with a ~1 cmdisk of diet consisting of
pine wood sawdust and shredded brown paper towel (50/50 w/w).
Initially, the dietwas treated with 200 mL of one of 5 solutions based
on treatment group: water (untreated group), 5% ampicillin (w/v),
5% kanamycin (w/v), 5% metronidazole (w/v), or 2.5% tetracycline
(w/v). These concentrations were determined to be sublethal to
termites based on extensive preliminary optimization studies. Diet
disks were rewetted every other day with 100 mL of the appropriate
solution for a total holding period of seven days. After the seven day
holding period, whole guts were dissected from the termites in
sodium phosphate buffer (0.05 M, pH 7.0).
2.2. Bacterial enumeration and culturing
To estimate bacterial abundance after antimicrobial treatment,
twenty-five whole termite guts from each treatment were
dissected, pooled, and homogenized in 750 mL of sodium phosphate
buffer (0.05 M, pH 7.0). Of this homogenate, 100 mL was used for
serial dilutions which were plated in sextuplicate onto brain heart
infusion agar and incubated at 37 C either aerobically or anaerobically
to determine the number of colony forming units (CFU) per
treatment. Anaerobic conditions were made using a glass containing
one BD GasPak EZ Anaerobe System with Indicator sealed
with modeling clay (Franklin Lakes, NJ). Raw CFU counts were
Log10 transformed prior to data analysis.
2.3. Protist cell counting
In order to estimate protist abundance, bioassays were repeated
as described
อาร์ flavipes ปลวกอาณานิคมถูกเก็บรวบรวมจากฮิลส์ใน และยังคงอยู่ในห้องปฏิบัติการด้วย 24 ชมของความมืดในอาหารใช้ไม้สนและผ้าขนหนูกระดาษสีน้ำตาล บุคคลที่สามอาณานิคมถูกใช้เป็นเหมือนกับชีวภาพในการศึกษาทั้งหมด ขนาดใหญ่ปลวกงาน (instar สาม หรืออื่น ๆ) ถูกใช้ในการศึกษานี้คนขาดอาหารปีกและ mandibles ขนาดใหญ่ ปลวกที่หกไว้ในขนาดเล็ก Petri อาหาร (Nunc, 33 มม.) เขียน ด้วย 200กระดาษทราย grit Theywere เลี้ยงกับ cmdisk ~ 1 ของอาหารประกอบด้วยขี้เลื่อยไม้สนและกระดาษสีน้ำตาลหั่นผ้า (แบบ w/w)เริ่มต้น dietwas รับ 200 มล.ของ 5 มัดรักษากลุ่ม: น้ำ (กลุ่มไม่ถูกรักษา) แอมพิซิลลิน 5% (w/v),กานามัยซิน 5% (w/v), metronidazole 5% (w/v), หรือเตตราไซคลีน 2.5%(w/v) ความเข้มข้นเหล่านี้ถูกกำหนด sublethal เพื่อปลวกตามศึกษาเพิ่มประสิทธิภาพเบื้องต้นอย่างละเอียด อาหารดิสก์ถูก rewetted ทุกวันกับ 100 mL ของงานโซลูชั่นโฮลดิ้งรวมระยะเวลาเจ็ดวัน หลังจากวันเจ็ดจับระยะเวลา ทั้งกึ๋นได้ dissected จากปลวกในโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.05 M, pH 7.0)2.2. แบคทีเรียการแจงนับและ culturingการประเมินความอุดมสมบูรณ์จากแบคทีเรียหลังการรักษาจุลินทรีย์มีกึ๋นปลวกทั้งยี่สิบห้าจากทรีตเมนท์dissected รวม และ homogenized เป็นกลุ่มใน 750 มิลลิลิตรมีโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.05 M, pH 7.0) นี้ homogenate, 100 mL ถูกใช้สำหรับdilutions ล็อตซึ่งถูกชุบใน sextuplicate ไปยังสมองหัวใจagar คอนกรีต และ incubated ที่ 37 C aerobically หรือ anaerobicallyการกำหนดจำนวนของโคโลนีที่เป็นหน่วย (CFU) ต่อรักษา ใช้กระจกที่ประกอบด้วยเงื่อนไขไม่ใช้ขึ้นBD GasPak EZ Anaerobe ระบบเดียวกับตัวบ่งชี้ที่ปิดสนิทด้วยแบบจำลองดินเหนียว (แฟรงคลินทะเลสาบ NJ) จำนวน CFU ดิบได้Log10 แปลงก่อนวิเคราะห์ข้อมูล2.3. โพรทิสต์เซลล์นับเพื่อประเมินความอุดมสมบูรณ์ของโพรทิสต์ bioassays ถูกทำซ้ำตามที่อธิบายไว้
การแปล กรุณารอสักครู่..

อาร์ flavipes ปลวกอาณานิคมถูกเก็บจาก West Lafayette
และรักษาในห้องปฏิบัติการด้วย 24 ชั่วโมงของความมืดในอาหาร
ของไม้สนไม้จีมและผ้าขนหนูกระดาษน้ำตาล สามอาณานิคมบุคคล
ถูกใช้เป็นแบบชีวภาพในการศึกษา ปลวกงาน ใหญ่
( ระยะที่สามหรือในภายหลัง ) สถิติที่ใช้ในการศึกษา ;
คนงานขาดตาวิง และขากรรไกรล่างขนาดใหญ่ หกสิบปลวก
อยู่ในขนาดเล็ก , จานเลี้ยงเชื้อ ( ขณะนี้ 33 มม. ) ขัดด้วยกระดาษทรายกรวด 200
. มีป้อนด้วย ~ 1 cmdisk อาหารประกอบด้วย
ขี้เลื่อยไม้สนและกระดาษฝอยผ้าเช็ดตัวสีน้ำตาล ( 50 / 50 w / w )
เริ่มต้น dietwas ได้รับ 200 ml ของหนึ่งในโซลูชั่นที่ใช้ในการรักษากลุ่ม 5
: น้ำ ( กลุ่มที่ไม่ได้รับการรักษา ) , 5% ( w / v ) , แอมพิซิลินน
5 % ( w / v ) , เมโทรนิดาโซล 5 % ( w / v ) หรือ 2.5% tetracycline
( w / v ) ความเข้มข้นเหล่านี้ตั้งใจจะศึกษาเพื่อ
ปลวกตามการศึกษาที่เหมาะสมในเบื้องต้นอย่างละเอียด ดิสก์อาหาร
ถูก rewetted วันเว้นวันด้วย 100 มิลลิลิตรของสารละลายที่เหมาะสมสำหรับทั้งหมดของ
ระยะเวลา 7 วัน หลังจากเจ็ดวัน
ระยะเวลาทั้งหมดก็ถูกตัดจากปลวกใน
( 0.05 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์พีเอช 7.0 ) .
2.2 .การเพาะเลี้ยงเชื้อและแบคทีเรียมากมาย
ประเมินหลังการรักษายาต้านจุลชีพทั้งความกล้าจากปลวก
25 , การรักษาแต่ละ pooled และชำแหละ )
, บดใน 750 มิลลิลิตรของสารละลายโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (
+ M , pH 7.0 ) จากแยกนี้ 100 ml ใช้
อนุกรมเจือจางซึ่งชุบลงใน sextuplicate
สมอง หัวใจวุ้นแช่บ่มที่ 37 C เหมือนกัน aerobically หรือพ
เพื่อกําหนดจํานวนหน่วยสร้างอาณานิคม ( CFU ) ต่อ
รักษา สภาวะอากาศให้ใช้แก้วที่มีลักษณะ gaspak
1 BD EZ ระบบด้วยตัวบ่งชี้ที่ปิดผนึก
กับการสร้างแบบจำลองดินเหนียว ( Franklin Lakes , NJ ) นับเซลล์ดิบ
LN เปลี่ยนก่อนการวิเคราะห์ข้อมูล .
2.3 นับเซลล์โพรทิสต์
เพื่อประเมินโพรทิสต์ความอุดมสมบูรณ์ ละเอียดเป็นซ้ำ
ตามที่อธิบายไว้
การแปล กรุณารอสักครู่..
