To define the minimal cell count th

To define the minimal cell count that was detectable by this multiplex PCR system, different numbers of bacterial cells from pure cultures were adjusted in sterile filtered wine. Furthermore, pasteurised musts were spiked by different LAB species varying in cell count. Cell concentrations were checked by counting cells in a counting chamber, as well as by plating on MRS agar. One ml of must or wine containing 108–100 cells/ml was used for DNA extraction, which was performed as described in section 2.3. In some cases a further purification step was carried out: the eluted DNA was precipitated and washed a second time to remove potential PCR inhibitors. To increase the DNA concentration the amount of the elution buffer was reduced to 60 μl. For multiplex PCR 5 μl template DNA was used.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์น้อยที่สุดที่ถูกตรวจพบโดยระบบนี้ multiplex PCR ตัวเลขที่แตกต่างกันของเซลล์แบคทีเรียจากวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์ได้รับการปรับในไวน์กรองผ่านการฆ่าเชื้อ นอกจากนี้น้ำลิ้นจี่พาสเจอร์ไรส์ได้ถูกแทงโดยห้องปฏิบัติการที่แตกต่างกันชนิดที่แตกต่างกันในการนับเซลล์ ความเข้มข้นของเซลล์ถูกตรวจสอบโดยการนับจำนวนเซลล์ในห้องนับเป็นโดยชุบกับวุ้น mrsหนึ่งมิลลิลิตรต้องหรือไวน์ที่มี 108-100 เซลล์ / ml ถูกนำมาใช้ในการสกัดดีเอ็นเอซึ่งได้รับการดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในส่วน 2.3 ในบางกรณีขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์อีกถูกหามออก: dna ชะได้รับการตกตะกอนและล้างครั้งที่สองเพื่อเอา​​สารยับยั้ง PCR ที่มีศักยภาพ เพื่อเพิ่มความเข้มข้นของดีเอ็นเอปริมาณของบัฟเฟอร์ elution ลดลงถึง 60 ไมโครลิตรเพื่อ multiplex PCR 5 แม่ไมโครลิตรดีเอ็นเอถูกนำมาใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อกำหนดจำนวนเซลล์น้อยที่สุดที่สามารถตรวจสอบได้ โดยระบบนี้ PCR ต่าง ๆ ๅ หมายเลขที่แตกต่างกันของเซลล์แบคทีเรียจากวัฒนธรรมบริสุทธิ์ถูกปรับปรุงในกระบอกกรองไวน์ นอกจากนี้ มี spiked pasteurised musts โดยสายพันธุ์ห้องปฏิบัติการต่าง ๆ ที่แตกต่างกันในเซลล์ ความเข้มข้นของเซลล์ถูกตรวจสอบ โดยการนับเซลล์ในหอนับ เป็นชุบบน MRS agar Ml หนึ่งของไวน์ประกอบด้วย 108–100 เซลล์/มล.หรือต้องใช้การสกัดดีเอ็นเอ ที่ทำการตามที่อธิบายไว้ในหัวข้อ 2.3 ในบางกรณี ขั้นตอนฟอกเพิ่มเติมถูกดำเนินการ: eluted DNA ได้ตกตะกอน และล้างครั้งสองเพื่อเอา PCR inhibitors อาจเกิดขึ้น เพื่อเพิ่มความเข้มข้นของดีเอ็นเอ จำนวนบัฟเฟอร์ elution ถูกลดลงเป็น 60 μl มีใช้ดีเอ็นเอแม่แบบสำหรับ multiplex PCR 5 μl

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการกำหนดจำนวนเซลล์น้อยที่สุดที่สามารถตรวจพบได้โดยระบบ pcr แบบมัลติเพล็กซ์หมายเลขนี้แตกต่างกันของเซลล์เกิดจากเชื้อแบคทีเรียจากวัฒนธรรมบริสุทธิ์ปรับในไวน์ที่กรองแล้วฆ่าเชื้อขวดนม ยิ่งไปกว่านั้นยังเป็นเครื่องเซ่นไหว้ musts pasteurised โดยสายพันธุ์จากห้องปฏิบัติการที่แตกต่างกันในจำนวนเซลล์ การตรวจสอบความเข้มข้นเซลล์เป็นเซลล์โดยการนับในช่องเก็บเศษหนวดนับเป็นสัดส่วนครึ่งต่อครึ่งโดยในสาหร่ายทะเลนางหนึ่งมล.ของไวน์หรือจะต้องประกอบด้วย 108-100 เซลล์/มิลลิลิตรได้ถูกใช้สำหรับการขุดเจาะดีเอ็นเอซึ่งได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ในหัวข้อ 2.3 ในบางกรณีขั้นตอนที่ทำน้ำบริสุทธิ์ได้อีกที่เป็นการกระทำดีเอ็นเอ eluted นั้นตกตะกอนและล้างในครั้งที่สองที่จะลบผลลัพธ์โรคหลอดเลือดสมองแตก pcr ที่อาจเกิดขึ้น ในการเพิ่มความเข้มข้นดีเอ็นเอซึ่งจำนวนดังกล่าวของบัฟเฟอร์ elution ที่ลดลงถึง 60 μl.สำหรับดีเอ็นเอแบบมัลติเพล็กซ์ pcr 5 μl เทมเพลตถูกใช้