PCR amplification was accomplished in a 25 ll total volume containing
0.5U GoTaq Flexi DNA Polymerase (Promega, Madison,
USA), 5 ll of 5X GoTaq Flexi Buffer, 200 lM each of dNTP,
1.5 mM MgCl2, 0.2 lM primers and 0.5 ll (20 ng/ll) of total
DNA in ABI 96 Well verity thermal cycler (Applied Biosystems,
Foster city, CA) and the cycling parameters were initial denaturation
at 94 C for 3 min following 35 cycles of denaturation at
94 C for 30 s, annealing at 62, 62, 60, 62, 61 C for cat, dog,
pig, monkey and rat primers, respectively, for 30 s and elongation
at 72 C for 30 s and final elongation at 72 C for 5 min.
ขยาย PCR ก็ประสบความสำเร็จใน 25 ll จะมีปริมาณรวม
0.5U GoTaq Flexi ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ (Promega, Madison,
USA) 5 LL ของ 5X GoTaq Flexi บัฟเฟอร์ 200 LM แต่ละ dNTP,
1.5 มิลลิ MgCl2 0.2 ไพรเมอร์และ LM 0.5 LL ( 20 ng / LL)
จากทั้งหมดดีเอ็นเอในABI 96 ดีจริง Cycler ร้อน (Applied Biosystems,
เมืองฟอสเตอร์, CA) และพารามิเตอร์การขี่จักรยานเป็น denaturation
เริ่มต้นที่94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 นาทีต่อไป 35 รอบของการสูญเสียสภาพธรรมชาติที่
94? C เป็นเวลา 30 วินาที , การอบที่ 62, 62, 60, 62, 61
องศาเซลเซียสสำหรับแมวสุนัขหมูลิงและไพรเมอร์หนูตามลำดับสำหรับ30
วินาทีและการยืดตัวที่72? C เป็นเวลา 30 วินาทีและการยืดตัวสุดท้ายที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที .
การแปล กรุณารอสักครู่..

สามารถขยายได้ใน 25 จะปริมาณที่มี
0.5u gotaq Flexi DNA polymerase ( promega เมดิสัน สหรัฐอเมริกา 5
) จะถึง gotaq Flexi บัฟเฟอร์ , 200 โดยแต่ละ dntp
ชุด , 1.5 มม. , 0.2 และ 0.5 จะรองพื้น LM ( 20 กรัม / ll ) ของดีเอ็นเอทั้งหมดใน 96
อาบี แต่ความเป็นจริงความร้อนรอบ ( Applied Biosystems
, Foster City , CA ) และจักรยานค่า
( เริ่มต้นที่ 94 C เป็นเวลา 3 นาที 35 รอบต่อไป ( ที่
94 เป็นเวลา 30 วินาที annealing ที่ 62 , 62 , 60 , 62 , 61 C สำหรับ แมว สุนัข หมู ลิง และหนู
, ไพรเมอร์ , ตามลำดับ , 30 และยืดตัว
72 C 30 และการยืดตัว สุดท้ายที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
