Total intracellular lipids were est

Total intracellular lipids were estimated as total fatty acids. The fatty acids of the yeast strains were extracted from the lyophilized cells using a hydrochloric acid-catalysed direct methylation (Ichihara and Fukubayashi, 2010). In brief, after cultivation, the yeast cells were harvested by centrifugation and lyophilization. The lyophilized cells were dissolved in toluene and methanol, then directly transmethylated with 8% methanolic HCl at 45 °C overnight. The resultant fatty acid methyl esters (FAMEs) were extracted with n-hexane and analysed using gas chromatography (GC-2010 Plus; Shimadzu, Kyoto, Japan) equipped with a flame ionization detector (FID) and an autosampler (AOC20; Shimadzu). A DB-23 capillary column (30 m × 0.25 mm ID and 0.25 μm film thickness) (Agilent Technologies, Palo Alto, California, USA) was used. The column temperature was programmed to start at 50 °C for 2 min and then increased by 10 °C/min up to 180 °C where it remained for 5 min, it was then increased at a rate of 5 °C/min to 240 °C, which was held for 3 min. Helium was the carrier gas, which was pumped at 1.0 mL/min, and nitrogen was used as the make-up gas. The injector temperature was 250 °C, the detector temperature was 300 °C, with a split ratio of 50:1. The identification of major peaks was performed based on retention time using controls obtained from Sigma–Aldrich (Saint Louis, MO, USA). The fatty acid concentrations were determined using a standard curve generated by a series of external standards.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีประเมินโครงการรวม intracellular เป็นกรดไขมันที่รวม กรดไขมันของยีสต์มีสกัดจากเซลล์ lyophilized ที่ใช้เป็นกรดไฮโดรคลอริก catalysed ตรงปรับ (Ichihara และ Fukubayashi, 2010) สังเขป หลังจากการเพาะปลูก เซลล์ยีสต์ได้เก็บเกี่ยวโดย centrifugation lyophilization เซลล์ lyophilized ถูกละลายในโทลูอีน และเมทานอล แล้วตรง transmethylated 8% HCl methanolic ที่ 45 ° C ค้างคืน กรดไขมันผลแก่ methyl esters (FAMEs) ที่สกัด ด้วยเอ็นเฮกเซน และใช้แก๊ส chromatography (GC 2010 บวก analysed Shimadzu เกียวโต ญี่ปุ่น) พร้อมกับตรวจจับ ionization เปลวไฟ (FID) และมี autosampler (AOC20 Shimadzu) DB 23 เส้นเลือดฝอยคอลัมน์ (รหัส 30 m × 0.25 มม.และความหนาของฟิล์ม μm 0.25) ใช้ (Agilent เทคโนโลยี ดัลลัส แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) อุณหภูมิคอลัมน์โปรแกรมจะเริ่มต้นที่ 50 ° C สำหรับ 2 นาที และเพิ่มขึ้น 10 ° C/นาที แล้ว ค่าถึง 180 ° C ซึ่งมันยังคงสำหรับ 5 นาที มันแล้วเพิ่มขึ้นในอัตรา 5 ° C/นาที ถึง 240 ° C ซึ่งจัดขึ้นสำหรับ 3 นาทีฮีเลียมเป็นก๊าซผู้ขนส่ง ซึ่งถูกสูบที่ 1.0 mL/minและมีใช้ไนโตรเจนเป็นแก๊สแต่งหน้า 250 ° C อุณหภูมิเครื่องทำบุหรี่ เครื่องตรวจจับอุณหภูมิ 300 ° C มีการแบ่งอัตราส่วนของ 50:1 ได้ การระบุของยอดเขาที่สำคัญที่ดำเนินการตามเวลาคงที่โดยใช้ตัวควบคุมที่ได้รับจากซิก-Aldrich (Louis เซนต์ MO สหรัฐอเมริกา) ความเข้มข้นกรดไขมันถูกกำหนดโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานที่สร้างขึ้น โดยชุดของมาตรฐานภายนอก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไขมันภายในเซลล์รวมอยู่ที่ประมาณเป็นกรดไขมันทั้งหมด กรดไขมันสายพันธุ์ยีสต์สกัดจากเซลล์แห้งโดยใช้กรดไฮโดรคลอริกตัวเร่งปฏิกิริยา methylation โดยตรง (Ichihara และ Fukubayashi 2010) ในช่วงสั้น ๆ หลังจากการเพาะปลูกเซลล์ยีสต์ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงและ lyophilization เซลล์แห้งถูกละลายในโทลูอีนและเมทานอลแล้ว transmethylated โดยตรงกับ 8% HCl เมทานอล 45 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืน กรดไขมันผลเมทิลเอสเตอร์ (FAMEs) ถูกสกัดด้วยเฮกเซนและวิเคราะห์โดยใช้แก๊ส chromatography (GC-2010 พลัส; Shimadzu, เกียวโต, ญี่ปุ่น) พร้อมกับเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออนไนซ์ (FID) และ autosampler (AOC20; Shimadzu) DB-23 คอลัมน์ฝอย (30 เมตร× 0.25 มมประชาชนและ 0.25 ไมโครเมตรความหนาของฟิล์ม) (Agilent Technologies, พาโลอัลโต, แคลิฟอร์เนียสหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้ อุณหภูมิคอลัมน์เป็นโปรแกรมที่จะเริ่มต้นที่ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 นาทีและเพิ่มขึ้นแล้วโดย 10 ° C / นาทีถึง 180 ° C ที่มันยังคงอยู่เป็นเวลา 5 นาทีมันก็เพิ่มขึ้นในอัตรา 5 องศาเซลเซียส / นาที 240 ° C ซึ่งจัดขึ้นเป็นเวลา 3 นาที ฮีเลียมถูกก๊าซซึ่งได้รับการสูบที่ 1.0 มิลลิลิตร / นาที, และไนโตรเจนที่ใช้เป็นก๊าซแต่งหน้า อุณหภูมิหัวฉีดเป็น 250 ° C อุณหภูมิเครื่องตรวจจับได้ 300 องศาเซลเซียสโดยมีอัตราส่วนแบ่ง 50: 1 บัตรประจำตัวของยอดเขาที่สำคัญที่ได้ดำเนินการอยู่บนพื้นฐานของการเก็บรักษาเวลาโดยใช้การควบคุมที่ได้รับจาก บริษัท Sigma-Aldrich (Sai​​nt Louis, MO, USA) ความเข้มข้นของกรดไขมันที่ได้รับการพิจารณาโดยใช้กราฟมาตรฐานที่สร้างขึ้นโดยชุดของมาตรฐานภายนอก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทั้งหมดภายในเซลล์ไขมันถูกประเมินเป็นกรดไขมันทั้งหมด กรดไขมันของสายพันธุ์ยีสต์สกัดจากไลโอเซลล์โดยใช้กรด catalysed methylation โดยตรง ( Ichihara และ fukubayashi , 2010 ) ในช่วงสั้นๆ หลังการปลูกเซลล์ยีสต์ถูกเก็บเกี่ยวโดยการเหวี่ยงแยก และเอนไซม์ เซลล์แห้งละลายในโทลูอีนกับเมทานอลแล้วตรง transmethylated 8 % เมทานอล HCl ที่ 45  ° C ในชั่วข้ามคืน ซึ่งเป็นกรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ ( FAMEs ) สกัดด้วยการบีบและวิเคราะห์โดยใช้แก๊สโครมาโตกราฟี ( gc-2010 บวก ; Shimadzu , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) พร้อมกับเฟลมไอออไนเซชันตรวจจับ ( FID ) และ autosampler ( aoc20 ; Shimadzu ) เป็น db-23 หลอดเลือดฝอยคอลัมน์ ( M  ×  0.25 มม. 30    ID และ 025  μ M ฟิล์มหนา ) ( Agilent Technologies , พาโลอัลโต , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) คือใช้ คอลัมน์อุณหภูมิถูกโปรแกรม ให้ เริ่มต้นที่ 50  ° C 2 มั้ย มินและเพิ่มขึ้นแล้ว โดย 10  °องศาเซลเซียส / นาทีถึง 180  ° C ที่มันยังคง 5 มั้ย มินมันก็เพิ่มขึ้นในอัตรา 5  °องศาเซลเซียส / นาที 240  ° C ซึ่งจัดขึ้นเป็นเวลา 3 นาที ฮีเลียมถูกไหมผู้ให้บริการก๊าซซึ่งถูกสูบที่ 1.0 รึเปล่ามิลลิลิตร / นาทีและไนโตรเจนที่ใช้ในการแต่งหน้าของแก๊ส หัวฉีด °อุณหภูมิ 250 C , ตรวจจับอุณหภูมิ 300  ° C กับแยกอัตราส่วน 50 : 1 . กำหนดยอดการยึดในหลักโดยใช้การควบคุมได้จาก Sigma –ดิช ( นักบุญหลุยส์ โม สหรัฐอเมริกา ) ความเข้มข้นของกรดไขมันพบว่าใช้มาตรฐานโค้งที่สร้างขึ้นโดยชุดของมาตรฐานภายนอก