Ovules and developing seeds were imaged using a confocal
laser scanning microscope (CLSM, Leica TCS SP II, Leica
Microsystems, Bensheim, Germany). For cell wall staining,
the plant material was incubated in 0.5% propidium iodide
for 10 min at room temperature and washed twice with
water. GFP was excited by 488-nm light produced by an
argon laser and observed using a detection window from
496 to 530 nm. Propidium iodide-stained cell walls were
detected with the argon laser 488-nm line and a detection
window from 595 to 640 nm. Chlorophyll autofluorescence
was detected at 640–730 nm. Optical sections of picture
stacks were made with the Leica Confocal Software 2.5
(Leica Microsystems, Bensheim, Germany) or with the
Amira 3D Visualization Software 3.1 (Indeed Visual
Concepts, Berlin, Germany).
Acknowledgements We thank Ingrid Schiessl and Gudrun
Steingraeber for excellent technical assistance and Norbert Sauer
for support and fruitful discussions. We also thank Magdalena
Weingaertner, Kathrin Wippel, and Elisabeth Truernit for discussions
and critical comments on the manuscript. We thank Uwe
Sonnewald for kindly providing p35S:MP17-GFP plants. This
work was supported by the Deutsche Forschungsgemeinschaft
(Grants STA 382/1 to R.S.).
Ovules and developing seeds were imaged using a confocallaser scanning microscope (CLSM, Leica TCS SP II, LeicaMicrosystems, Bensheim, Germany). For cell wall staining,the plant material was incubated in 0.5% propidium iodidefor 10 min at room temperature and washed twice withwater. GFP was excited by 488-nm light produced by anargon laser and observed using a detection window from496 to 530 nm. Propidium iodide-stained cell walls weredetected with the argon laser 488-nm line and a detectionwindow from 595 to 640 nm. Chlorophyll autofluorescencewas detected at 640–730 nm. Optical sections of picturestacks were made with the Leica Confocal Software 2.5(Leica Microsystems, Bensheim, Germany) or with theAmira 3D Visualization Software 3.1 (Indeed VisualConcepts, Berlin, Germany).Acknowledgements We thank Ingrid Schiessl and GudrunSteingraeber for excellent technical assistance and Norbert Sauerfor support and fruitful discussions. We also thank MagdalenaWeingaertner, Kathrin Wippel, and Elisabeth Truernit for discussionsand critical comments on the manuscript. We thank UweSonnewald for kindly providing p35S:MP17-GFP plants. Thiswork was supported by the Deutsche Forschungsgemeinschaft(Grants STA 382/1 to R.S.).
การแปล กรุณารอสักครู่..

ovules และเมล็ดการพัฒนาที่ถูกถ่ายภาพโดยใช้ confocal
กล้องจุลทรรศน์เลเซอร์สแกน (CLSM, Leica TCS SP II, Leica
Microsystems, เบนไชม์, เยอรมนี) สำหรับการย้อมสีผนังเซลล์พืชที่ถูกบ่มใน 0.5% ไอโอไดด์ propidium เป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องและล้างครั้งที่สองกับน้ำ GFP ตื่นเต้นด้วยแสง 488 นาโนเมตรผลิตโดยเลเซอร์อาร์กอนและสังเกตใช้หน้าต่างการตรวจสอบจาก496 530 นาโนเมตรที่จะ Propidium ผนังเซลล์ไอโอไดด์สีถูกตรวจพบด้วยอาร์กอนเลเซอร์สาย488 นาโนเมตรและตรวจสอบหน้าต่าง595-640 นาโนเมตร คลอโรฟิล Autofluorescence ถูกตรวจพบที่ 640-730 นาโนเมตร ส่วนแสงของภาพกองที่ทำกับ Leica Confocal ซอฟแวร์ 2.5 (Leica Microsystems, เบนไชม์, เยอรมนี) หรือกับซอฟแวร์การแสดง3D Amira 3.1 (ภาพอันที่จริงแนวคิด, เบอร์ลิน, เยอรมนี). กิตติกรรมประกาศเราขอขอบคุณอิงกริด Schiessl และ Gudrun Steingraeber สำหรับเทคนิคที่ยอดเยี่ยม ความช่วยเหลือและการ Norbert ซาวเออร์ที่ให้การสนับสนุนและการอภิปรายผลสำเร็จ นอกจากนี้เรายังขอขอบคุณ Magdalena Weingaertner, Kathrin Wippel และอลิซาเบ Truernit สำหรับการอภิปรายและแสดงความคิดเห็นที่สำคัญในต้นฉบับ เราขอขอบคุณเว่Sonnewald สำหรับความกรุณาให้ p35S: พืช MP17-GFP นี้ทำงานได้รับการสนับสนุนโดย Deutsche Forschungsgemeinschaft (แกรน STA 382/1 ไปอาร์เอส)
การแปล กรุณารอสักครู่..
