Materials and MethodsCloves of fiel

Materials and Methods
Cloves of field-grown garlic (Allium sativum L. cv. Howaito roppen)
were used as the starting material for the aseptic isolation of shoot
apices. Each shoot meristem (ca. 0.5 mm) was excised and cultured
under continuous light (5,000 lux) at 25 °C in LS medium (Linsmaier
and Skoog 1965) with rotation at 2 rpm. After two months of culturing,
primordia were induced according to the method of Tanaka and Ikeda
(1983) and were then subcultured every 2 weeks on MS medium (Murashige
and Skoog 1962) supplemented with 1mg · L–1 2,4-D, 3% sucrose,
and 0.8% agar.
Approximately 1g of small yellow globular, primordia-derived callus
was incubated with 8 mL of 0.55 mol/L mannitol solution containing
2% Cellulase Onozuka RS (Yakult Pharm. Co., Japan) and 0.2% Pectolyase
Y23 (Seishin Pharm. Co., Japan) at 25 °C for 4–5 hr at 90 rpm.
Protoplasts were cultured in an agarose bead (Shillito et al. 1983) consisting
of 1⁄2 MS medium supplemented with 1mg · L–1 BAP, 1mg · L–1
NAA, 0.1% casein hydrolysate, 1% glucose, and 0.55 mol/L mannitol.
One month after colony formation, calluses derived from the microcolonies
were transferred to MS medium supplemented with 2mg· L–1
BAP, 0.02mg· L–1 NAA, and 3% sucrose. Shoots were induced after
70 days of culturing and were transferred to LS medium lacking
growth regulators for rooting. Five to six months after protoplast isolation,
plantlets were obtained. The plantlets were acclimatized and
grown in a greenhouse in pots containing soil and vermiculite.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการกลีบของฟิลด์ที่มีปลูกกระเทียม (Allium sativum L. พันธุ์ Howaito roppen)ใช้เป็นวัสดุเริ่มต้นเพื่อแยกปลอดเชื้อของยิงapices แต่ละเนื้อเยื่อปลายยิง (ca. 0.5 mm) สรรพสามิต และล้างแสงต่อเนื่อง (5,000 lux) ที่ 25 ° C ใน LS (Linsmaierและ Skoog 1965) ด้วยการหมุนที่รอบต่อนาที 2 หลังจากสองเดือนของการนำไปเลี้ยงprimordia นำตามวิธีการของทานากะและอิเคดะ(1983) และมี subcultured ปานกลาง MS (Murashige ทุก 2 อาทิตย์แล้วและ Skoog 1962) เสริม ด้วย· 1 มก. 3% ซูโครส L-1 2, 4-Dและวุ้น 0.8%ขนาดเล็กสีเหลืองกระจุก primordia มาแคลลัสประมาณ 1 กรัมมี incubated มี 8 mL 0.55 mol/L mannitol โซลูชันที่ประกอบด้วยPectolyase 0.2% และ 2% cellulase Onozuka RS (บริษัท Pharm. ยาคูลท์ ประเทศญี่ปุ่น)Y23 (นอ Pharm. Co. ญี่ปุ่น) ที่ 25 ° C สำหรับ 4-5 ชั่วโมงที่ 90 rpmพลาสต์ถูกล้างในการ agarose ลูกปัด (Shillito et al. 1983) ซึ่งประกอบด้วยของกลาง MS และฟิตเสริม ด้วย· 1 มก. L-1 BAP, · 1 มก. L-1ราดหน้า ฉีด 0.1% เคซีน กลูโคส 1% และ mannitol 0.55 โมล/Lหนึ่งเดือนหลังจากอาณานิคมก่อ ตาปลาได้มาจากการ microcoloniesถ่ายโอน MS ปานกลางเสริม ด้วย 2mg· L-1BAP, 0.02mg· ราดหน้า L-1 และซูโครส 3% หน่อที่เกิดหลังจากวันที่ 70 ของการนำไปเลี้ยง และถูกโอนย้ายไป LS กลางขาดฮอร์โมนสำหรับการขจัด ห้าถึงหกเดือนหลังจาก protoplast แยกplantlets ได้รับ Plantlets ถูกปรับสภาพ และปลูกในเรือนกระจกในกระถางที่ประกอบด้วยดินและเวอร์มิคูไลท์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
กลีบกระเทียมฟิลด์ปลูก (Allium sativum L. CV. Howaito Roppen)
ถูกนำมาใช้เป็นวัสดุเริ่มต้นสำหรับการแยกปลอดเชื้อของการถ่าย
apices ยิงแต่ละเนื้อเยื่อ (แคลิฟอร์เนียได้ 0.5 มิลลิเมตร) ถูกตัดและเพาะเลี้ยง
ภายใต้แสงไฟต่อเนื่อง (5,000 ลักซ์) ที่ 25 ° C ในสื่อ LS (Linsmaier
และ Skoog 1965) กับการหมุนที่ 2 รอบต่อนาที หลังจากสองเดือนของการเพาะเลี้ยง,
primordia ถูกเหนี่ยวนำให้เกิดตามวิธีการของทานากะอิเคดะและ
(1983) และได้รับการเลี้ยงแล้วทุก 2 สัปดาห์ใน MS กลาง (Murashige
และ Skoog 1962) เสริมด้วย 1mg · L-1 2,4-D 3 % ซูโครส
และวุ้น 0.8%.
ประมาณ 1 กรัมรูปทรงกลมสีเหลืองขนาดเล็ก primordia ที่ได้มาจากแคลลัส
ถูกบ่มกับ 8 มล 0.55 mol วิธีการแก้ปัญหา mannitol / L มี
2% เซลลู Onozuka RS (ยาคูลท์ Pharm. Co. , ญี่ปุ่น) และ 0.2% Pectolyase
y23 (Seishin Pharm. Co. , ญี่ปุ่น) ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4-5 HR ที่ 90 รอบต่อนาที.
protoplasts เพาะเลี้ยงในลูกปัด agarose (Shillito et al. 1983) ซึ่งประกอบด้วย
1/2 สูตร MS เสริมด้วย 1mg · L- 1 BAP, 1mg · L-1
NAA 0.1% ไฮโดรไลเซเคซีนกลูโคส 1% และ 0.55 mol / L mannitol.
หนึ่งเดือนหลังจากการก่ออาณานิคมแคลลัสที่ได้มาจาก microcolonies
ถูกโอนไปยังสูตร MS เสริมด้วย 2mg · L-1
BAP , 0.02mg · L-1 NAA และ 3% ซูโครส ข้าวกล้าถูกเหนี่ยวนำให้เกิดหลังจาก
70 วันของการเพาะเลี้ยงและถูกโอนไปยัง LS กลางขาด
หน่วยงานกำกับดูแลการเจริญเติบโตของราก ห้าถึงหกเดือนหลังจากที่โปรโตพลาแยก
ต้นอ่อนที่ได้รับ ต้นกล้าที่ได้รับการปรับสภาพและ
ปลูกในเรือนกระจกในกระถางที่มีดินและดิน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการกลีบกระเทียมที่ปลูกทุ่ง ( เลี่ยม sativum L . cv . howaito roppen )ที่ใช้เป็นวัตถุดิบตั้งต้นสำหรับการแยกเชื้อของยิงapices . แต่ละยิงเนื้อเยื่อเจริญ ( ประมาณ 0.5 มม. ) ถูกตัดและการเพาะเลี้ยงภายใต้ไฟต่อเนื่อง ( 5 , 000 ลักซ์ ) ที่ 25 ° C ใน LS ( linsmaier ขนาดกลางและ Skoog 1965 ) หมุน 2 รอบ หลังจากสองเดือนของการเพาะเลี้ยง ,ไพรม ์เดียถูกชักนำตามวิธีการของทานากะ และ อิเคดะ( 1983 ) และได้ subcultured ทุก 2 สัปดาห์ในอาหารสังเคราะห์สูตร MS (และ Skoog 1962 ) ที่เติม 2 , 4-D 1mg ด้วยแอล– 1 , 3 และซูโครสและ 0.8 % วุ้นประมาณ 1G ของขนาดเล็ก สีเหลือง เป็นรูปทรงกลม ไพรม ์เดียได้แคลลัสอยู่แยก 8 ml 0.55 mol / L ที่มีแมนนิทอล โซลูชั่น2 % เซล onozuka RS ( ยาคูลท์ Pharm . บริษัท ญี่ปุ่น ) และ 0.2% pectolyasey23 ( เซชิน Pharm . บริษัท ญี่ปุ่น ) ที่อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 4 - 5 ชม. ที่ 90 รอบต่อนาทีพบว่าในการเพาะเลี้ยง , ลูกปัด ( shillito et al . 1983 ) ประกอบด้วย1 ⁄ 2 MS 1mg ด้วยแอล– 1 BAP 1mg ด้วยแอล– 1NAA 0.1 เปอร์เซ็นต์ casein hydrolysate กลูโคส 1% และ 0.55 mol / L 5 .หนึ่งเดือนหลังจากการสร้างแคลลัสที่ได้จาก microcolonies อาณานิคมถูกโอนไปยัง MS Nicotinell ด้วยแอล– 1บับ 0.02mg ด้วยแอล– 1 NAA และซูโครส 3 เปอร์เซ็นต์ . เกิดการหลัง70 วันของการเพาะเลี้ยงและย้ายไปมันกลางขาดสารควบคุมการเจริญเติบโต สำหรับเชียร์ ห้าถึงหกเดือนหลังจากการแยกโปรโตพลาสต์ ,ต้นที่ได้รับ เดือน ได้ปรับสภาพและที่ปลูกในเรือนกระจกในกระถางที่มีดินและ vermiculite .