2.10. Cell proliferation testFor in

2.10. Cell proliferation test
For in vitro assay, Caco-2 cells were seeded into 96-well plate at
a density of 8  104 cells per well to avoid confluence of the culture
during the treatments. The treatments started 24 h after seeding to
improve environment adaptation of the cells (Yanez et al., 2004),
and lasted 72 h with medium changed every 24 h. After 72 h, the
medium was replaced and the cultures were maintained for
another 24 h in fresh medium before the cell viability quantification.
MTT test (microculture tetrazolium test) was used to measure
the cell proliferation rate. The cells were incubated in 0.5 mg/mL
MTT (Merck) for 2 h at 37 C. Metabolically active mitochondrial
dehydrogenases convert the tetrazolium salt to insoluble purple
formazan crystals at a rate that is proportional to cell viability
(Tada, Shiho, Kuroshima, Koyama, & Tsukamoto, 1986). After
removal of the MTT, 100 lL of DMSO (Sigma) was added to each
well, to lyses the cells and solubilize the formed formazan crystals.
Absorbance was measured at 620 nm using a plate reader.
Untreated cells were used as negative control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.10 ทดสอบการงอกเซลล์สำหรับเครื่องมือวิเคราะห์ Caco 2 เซลล์ถูก seeded เป็นแผ่น 96 ดีที่ความหนาแน่นของเซลล์ 8 104 ต่อดีเพื่อหลีกเลี่ยงการบรรจบของวัฒนธรรมในระหว่างการรักษา การรักษาเริ่มต้น 24 ชมหลังจากปลูกไปปรับปรุงสภาพแวดล้อมการปรับตัวของเซลล์ (Yanez et al., 2004),และกินเวลา 72 h กับกลางเปลี่ยนทุก 24 ชม หลังจาก 72 h,กลางถูกแทน และวัฒนธรรมได้รับการรักษาh 24 อีกในกลางสดก่อนนับชีวิตเซลล์MTT ทดสอบ (ทดสอบ tetrazolium microculture) ใช้ในการวัดอัตราการงอกเซลล์ เซลล์ถูก incubated ใน 0.5 mg/mLMTT (บริษัทเมอร์ค) สำหรับ h 2 ที่ 37 C. Metabolically ใช้งาน mitochondrialdehydrogenases แปลงเกลือ tetrazolium ละลายสีม่วงผลึก formazan ที่อัตราที่เป็นสัดส่วนกับชีวิตเซลล์(อาหาร ชิโฮะ Kuroshima โคะยะมะ และวซึกาโม โต 1986) หลังจากเอาของ MTT, 100 lL ของ DMSO (ซิกมา) ถูกเพิ่มไปยังแต่ละดี การ lyses เซลล์ และ solubilize ผลึก formazan รูปแบบมีวัด absorbance ที่ 620 nm โดยใช้เครื่องอ่านแผ่นเซลล์ไม่ถูกรักษาถูกใช้เป็นตัวควบคุมค่าลบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.10 การทดสอบการเพิ่มจำนวนเซลล์
ในหลอดทดลองสำหรับการทดสอบ, Caco-2 เซลล์เป็นเมล็ดลงในจาน 96 หลุมที่
มีความหนาแน่นของ 8? 104 เซลล์ต่อดีเพื่อหลีกเลี่ยงการบรรจบกันของวัฒนธรรม
ในระหว่างการรักษา การรักษาเริ่มต้น 24 ชั่วโมงหลังจากการเพาะเพื่อ
ปรับปรุงสภาพแวดล้อมในการปรับตัวของเซลล์ (Yanez et al., 2004)
และกินเวลานาน 72 ชั่วโมงที่มีการเปลี่ยนแปลงขนาดกลางทุก 24 ชั่วโมง หลังจาก 72 ชั่วโมง,
กลางถูกแทนที่และวัฒนธรรมที่ได้รับการรักษา
อีก 24 ชั่วโมงในสื่อสดก่อนที่ปริมาณการมีชีวิตเซลล์.
ทดสอบ MTT (microculture ทดสอบ tetrazolium) ถูกนำมาใช้ในการวัด
อัตราการแพร่กระจายของเซลล์ เซลล์ถูกบ่มใน 0.5 mg / ml
MTT (เมอร์) เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ยลที่ใช้งานเมตาบอลิ
dehydrogenases แปลงเกลือ tetrazolium จะไม่ละลายน้ำสีม่วง
คริสตัล formazan ในอัตราที่เป็นสัดส่วนกับการมีชีวิตเซลล์
(Tada, ชีโฮ, Kuroshima โคยามะและ Tsukamoto, 1986) หลังจากที่
การกำจัดของ MTT 100 lL ของ DMSO (Sigma) ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละ
อย่างดีเพื่อ lyses เซลล์และละลายผลึกที่เกิดขึ้น formazan.
วัดการดูดกลืนแสงที่ 620 นาโนเมตรโดยใช้เครื่องอ่านแผ่น.
เซลล์บำบัดถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมเชิงลบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.10 . เซลล์ทดสอบ
ในการตรวจสอบ caco-2 เซลล์ถูก seeded ใน 96 ดีจาน
ความหนาแน่น 8  104 เซลล์ต่อดีเพื่อหลีกเลี่ยงการบรรจบกันของวัฒนธรรม
ในระหว่างการรักษา การรักษาเริ่มต้น 24 ชั่วโมงหลังจากการปรับปรุงสิ่งแวดล้อม

การปรับตัวของเซลล์ ( yanez et al . , 2004 ) ,
และนาน 72 ชั่วโมงกับกลางเปลี่ยนทุก 24 ชั่วโมง หลัง 72 H ,
ขนาดกลางถูกแทนที่และวัฒนธรรมที่ถูกเก็บรักษาไว้สำหรับ
อีก 24 ชั่วโมงในสื่อสดก่อนเซลล์ปริมาณ .
MTT การทดสอบ tetrazolium microculture ) เป็นเครื่องมือวัด
เซลล์ขยายตัวในอัตรา เซลล์ที่ถูกบ่มใน 0.5 มก. / มล. MTT ( Merck )
2 H ที่ 37  C metabolically ปราดเปรียวยล
เอนไซม์ดีไฮโดรจีเนสแปลง tetrazolium เกลือ
สีม่วงที่ไม่ละลายน้ำคริสตัลสีน้ำเงินที่ไม่ละลายน้ำในอัตราที่เป็นสัดส่วนกับเซลล์
( ทาดะ ชิโฮะ kuroshima , โคยาม่า , &ทสึกาโมโตะ , 1986 ) หลังจาก
การกำจัดของ MTT , 100 จะของ DMSO ( Sigma ) คือการเพิ่มแต่ละ
ดี lyses เซลล์ และ solubilize ที่เกิดขึ้นเหลือเชื่อ .
ค่าวัดที่ 620 นาโนเมตรโดยใช้เครื่องอ่านแผ่น .
ดิบเซลล์ที่ใช้ควบคุมลบ