2. Materials and experimental metho

2. Materials and experimental methods
2.1. Materials
A commercial polyamide RO membrane was obtained from Nitto
Denko Corporation (ES20; Osaka, Japan). The mean surface roughness
(Ra) of this RO membrane was 97.1 nm from atomic force microscope
(AFM) observation (Fig. S1, details in Supplementary data), and was a
typical value of RO membranes [8]. Fe (III)–EDTA was purchased from
Dojindo Laboratories (Kumamoto, Japan). A LIVE/DEAD BacLight Bacterial
Viability kit was purchased from Thermo Fisher Scientific (Waltham,
MA) and used to stain bacteria. All chemicals, except those
particularly described, were purchased from Wako Pure Chemical Industries
(Osaka, Japan) and used without further purification. Milli-Q
water (18.2 MΩ·cm; Merck Millipore, Billerica, MA, USA) was used to
prepare all aqueous solutions and for rinsing.
2.2. Bacterial species and culture conditions
P. putida (NBRC100650) was used because Pseudomonas species
have been observed in biofilms on water treatment membranes [20].
Modified FAB medium was used for bacterial cultivation because it
was suitable for biofilm formation of P. putida [21,22]. The modified
FAB medium contained the following components: glucose 2.0 g/L,
(NH4)2SO4 2 g/L, Na2HPO4 4.7 g/L, KH2PO4 3.0 g/L, NaCl 3.0 g/L, CaCl2
11.0 mg/L, MgCl2 95.0 mg/L, and Fe(III)–EDTA 4.2 mg/L. P. putida was
firstly precultured in the FAB medium overnight at 150 rpm at 30 °C.
The precultured bacterial suspension was then diluted 5 times with
the FAB medium and cultured at 150 rpm at 30 °C for 4 h. The cultured
bacterial suspension was diluted to a final optical density of 0.05 at
450 nm (106–107 cfu/mL in bacterial concentration) and used for each
experiment. The optical densitywasmeasured by a UV–VIS spectrophotometer
(V-650, JASCO Corporation, Tokyo, Japan).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการทดลอง2.1. วัสดุโพลีอะมายด์พาณิชย์เยื่อได้รับจากบริษัทบริษัทในเครือฯ (ES20 โอซาก้า ญี่ปุ่น) หมายถึงพื้นผิวขรุขระ(Ra) ของนี้ RO เมมเบรนถูก 97.1 nm จากกล้องจุลทรรศน์แบบแรงอะตอมการสังเกต (ด้าน) (มะเดื่อ S1 รายละเอียดข้อมูลเสริม), และการค่าปกติของแผ่นเมมเบรน RO [8] Fe (III) – EDTA ซื้อจากห้อง Dojindo (คุมาโมโตะ ญี่ปุ่น) แบคทีเรียสดตาย BacLightซื้อชุดชีวิตจากเทอร์โม Fisher วิทยาศาสตร์ (นีซMA) และใช้สีย้อมเชื้อแบคทีเรีย สารเคมีทั้งหมด ยกเว้นอธิบาย ซื้อจากวาโกะบริสุทธิ์อุตสาหกรรมเคมีโดยเฉพาะอย่างยิ่ง(โอซาก้า ญี่ปุ่น) และโดยการทำให้บริสุทธิ์ หนึ่ง-Qน้ำ (18.2 MΩ·cm เอาใจใส่ Billerica, MA สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้ในการเตรียมทั้งหมดละลาย และล้าง2.2. แบคทีเรียสายพันธุ์และวัฒนธรรมเงื่อนไขใช้ P. putida (NBRC100650) เนื่องจากสายพันธุ์ Pseudomonasได้รับการปฏิบัติการในไบโอฟิล์มที่บนน้ำรักษาเยื่อ [20]แก้ไข FAB กลางใช้สำหรับเพาะเชื้อแบคทีเรียเนื่องจากมันไม่เหมาะสมเกิด biofilm P. putida [21,22] การแก้ไขFAB ปานกลางประกอบด้วยคอมโพเนนต์ต่อไปนี้: กลูโคส 2.0 g/L(NH4) 2SO4 2 บัญชี Na2HPO4 4.7 บัญชี KH2PO4 3.0 แยก NaCl 3.0 แยก CaCl211.0 mg/L, MgCl2 95.0 mg/L และ Fe (III) -เป็น EDTA 4.2 mg/l. P. putidaตอนแรก precultured ในกลาง FAB ค้างคืนที่ 150 rpm ที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสการระงับเชื้อแบคทีเรีย precultured ถูกแล้วเจือจาง 5 ครั้งด้วยFAB ปานกลาง และอ่างที่ 150 rpm ที่ 30 ° C สำหรับ 4 h การเพาะเลี้ยงระงับแบคทีเรียถูกเจือจางไปความหนาแน่นของ 0.05 ที่แสงสุดท้าย450 nm (106 – 107 อาหรับ/mL ในเชื้อแบคทีเรียความเข้มข้น) และใช้สำหรับแต่ละทดลอง Densitywasmeasured แสง โดย spectrophotometer UV – VIS(V-650, JASCO Corporation โตเกียว ญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการทดลอง
2.1 วัสดุ
เมมเบรน RO ใยสังเคราะห์เชิงพาณิชย์ที่ได้รับจาก Nitto
Denko คอร์ปอเรชั่น (ES20; โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) พื้นผิวที่ขรุขระเฉลี่ย
(Ra) ของเมมเบรน RO นี่เป็น 97.1 นาโนเมตรจากแรงอะตอมกล้องจุลทรรศน์
(AFM) การสังเกต (รูป. S1 รายละเอียดในข้อมูลเสริม) และเป็น
ค่าปกติของเยื่อ RO [8] เฟ (III) -EDTA ซื้อจาก
Dojindo ห้องปฏิบัติการ (คุมาโมโตะ, ญี่ปุ่น) สด / DEAD BacLight แบคทีเรีย
ชุดมีชีวิตซื้อจากเทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ (วอลแทม
MA) และใช้ในการแบคทีเรียคราบ สารเคมีทั้งหมดยกเว้น
โดยเฉพาะอย่างยิ่งการอธิบายที่ซื้อมาจาก Wako เพียวเคมีอุตสาหกรรม
(โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) และใช้โดยไม่บริสุทธิ์ต่อไป Milli-Q
น้ำ (18.2 ซม. MΩ·; เมอร์คบิลเลริกา, MA, USA) ถูกใช้ในการ
เตรียมสารละลายและการชำระล้าง.
2.2 แบคทีเรียชนิดและเงื่อนไขวัฒนธรรม
พี putida (NBRC100650) ถูกนำมาใช้เพราะ Pseudomonas สายพันธุ์
ได้รับการปฏิบัติในแผ่นชีวะเยื่อบำบัดน้ำ [20].
กลาง FAB ดัดแปลงถูกนำมาใช้สำหรับการเพาะปลูกแบคทีเรียเพราะมัน
มีความเหมาะสมสำหรับการสร้างไบโอฟิล์มพี putida [21,22] แก้ไข
กลาง FAB มีองค์ประกอบดังต่อไปนี้: กลูโคส 2.0 กรัม / L
(NH4) 2SO4 2 กรัม / ลิตร, Na2HPO4 4.7 กรัม / ลิตร, KH2PO4 3.0 กรัม / ลิตร, โซเดียมคลอไรด์ 3.0 กรัม / ลิตร, CaCl2
11.0 มิลลิกรัม / ลิตร, MgCl2 95.0 มิลลิกรัม / ลิตรและเฟ (III) -EDTA 4.2 mg / LP putida ถูก
precultured แรกใน FAB กลางค้างคืนที่ 150 รอบต่อนาทีที่ 30 ° C.
ระงับแบคทีเรีย precultured ถูกเจือจางแล้ว 5 ครั้งด้วย
สื่อ FAB และเพาะเลี้ยงที่ 150 รอบต่อนาที ที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมง เพาะเลี้ยง
ระงับแบคทีเรียถูกเจือจางความหนาแน่นของแสงสุดท้ายของ 0.05 ที่
450 นาโนเมตร (106-107 CFU / มิลลิลิตรในความเข้มข้นของแบคทีเรีย) และใช้สำหรับแต่ละ
การทดลอง แสง densitywasmeasured โดย UV-VIS spectrophotometer
(V-650, JASCO คอร์ปอเรชั่นกรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการทดลอง2.1 . วัสดุเป็นใยสังเคราะห์ที่ได้รับจากการค้า RO เมมเบรนนิตDenko Corporation ( es20 ; โอซาก้า , ญี่ปุ่น ) ความหยาบผิวเฉลี่ย( RA ) ของ RO เมมเบรน 97.1 nm จากกล้องจุลทรรศน์แรงอะตอม( AFM ) การสังเกต ( รายละเอียดภาพ : ในข้อมูลเพิ่มเติม และเป็นค่าปกติของ RO เมมเบรน [ 8 ] Fe ( III ) และ EDTA ถูกซื้อจากdojindo ห้องปฏิบัติการ ( Kumamoto , ญี่ปุ่น ) สด / baclight แบคทีเรียตาย1 ชุด ซื้อจากเทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ ( Waltham ,มา ) และใช้คราบแบคทีเรีย เคมีภัณฑ์ทั้งหมดยกเว้นโดยเฉพาะอย่างยิ่งระบุซื้อจาก Wako เพียว เคมีอุตสาหกรรม( โอซาก้า ) และใช้โดยไม่ต้องบำบัดต่อไป milli-qน้ำ ( 18.2 M Ω·ซม. ; เมอร์คมิลลิ , โตเกียว , MA , USA ) ใช้เตรียมสารละลายทั้งหมดและโซลูชั่นสำหรับทําความสะอาด2.2 . ชนิดของแบคทีเรียและสภาพวัฒนธรรมP.putida ( nbrc100650 ) ถูกใช้ เพราะของชนิดได้พบ biofilms ในน้ำเยื่อหุ้ม [ 20 ]แก้ไข FAB ) ใช้เพื่อเพาะเชื้อแบคทีเรีย เพราะเหมาะสมสำหรับฟิล์ม การก่อตัวของ P.putida [ 21,22 ] ดัดแปลงแฟ๊บ ขนาดกลาง มีองค์ประกอบต่อไปนี้ : กลูโคส 2.0 กรัมต่อลิตร( NH4 ) 2so4 2 กรัมต่อลิตร na2hpo4 4.7 กรัม / ลิตร kh2po4 3.0 G / L NaCl 3.0 G / L , CaC11.0 mg / L , MgCl2 95.0 มก. / ล. และ Fe ( III ) และ EDTA 4.2 มก. / ล. P.putida คือประการแรก 1949 ใน fab กลางคืน 150 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 30 องศาที่ 1949 bacterial suspension ก็เจือจาง ครั้งที่ 5 กับกลาง fab และเลี้ยงที่อุณหภูมิ 30 องศา C 150 รอบต่อนาที เป็นเวลา 4 ชั่วโมง เพาะเลี้ยงbacterial suspension เจือจางกับความหนาแน่นของแสงสุดท้ายของระดับที่450 nm ( 106 - 107 CFU / ml ในแบคทีเรียความเข้มข้น ) และใช้สำหรับแต่ละทดลอง แสงยูวีวิสเตอร์– densitywasmeasured โดย( v-650 jasco , บริษัท , โตเกียว , ญี่ปุ่น )