2.3.6. Sugar determination by gas chromatography
Sugars in the hot water extract which contained native fructose,
glucose and sucrose and FOS (GF
2
, GF3
, GF4
) and in the
corresponding standard solutions were determined by high
temperature GC (Agilent
1
7890, USA), equipped with a capillary
aluminum-clad column (length 6 m, ID 0.53 mm, coated with 5%-phenyl-polycarboranesiloxane, HT-5, Restek
1
, USA). The temper-ature of FID detector was set at 447 8 C. Helium gas was used as
carrier gas, set at a flow rate of 9 mL/min. Nitrogen gas was used as
a make up gas, set at flow rate of 25 mL/min. Air and hydrogen gas
for FID detector were set at 400 mL/min and 40 mL/min,
respectively. For sugars in the solution of inulinase hydrolysed
extract which contain native sugars, sugars fractions from inulin
and FOS (fructose and glucose) were determined using another GC
(Agilent
1
6850, USA) which equipped with capillary fused silica
column (length 30 m, ID 0.32 mm, coated with 100% dimethylpo-lysiloxane, HP-1, Agilent
1
J&W, USA). The temperature of FID
detector was set at 350 8 C. The same carrier and make up gases
were used; they were set at flow rate of 2 mL/min and 30 mL/min,
respectively. Air and hydrogen gas for FID detector were set at
350 mL/min and 35 mL/min, respectively.
2.4. Analytical quality control
A commercial mixture of oligofructose (Orafti
1
P95) was used as
a quality control sample for FOS and sugars determination. Milk
powder, fortified with inulin (Protection 1+, Nestle
1
), was used for
inulin-type fructans and some sugars (fructose, glucose and
sucrose). Assigned value of FOS in the commercial oligofructose,
provided by Orafti, Co., Ltd, Belgium, was 93.2 g/100 g whereas the
developed assigned value, as mean SD, by Orafti and by the Institute
of Nutrition, Mahidol University (INMU) laboratories, with n = 10, was
89.1 1.72 g/100 g. Assigned values of inulin and sugars (sum of
fructose, glucose and sucrose) in the fortified milk powder, developed
by the same laboratories, were 2.79 0.20 and 2.17 0.22 g/100 g,
respectively. For daily quality control system, both materials were
analysed in each set along with unknown samples. The accepted values
of the results must fall into the mean 2SD of the assigned value of
each component which indicates a good performance of the analyst.
Precision of each analysis, which indicates by the percent difference
between duplicate determinations, must be less than 10. Percent
recovery of FOS was also conducted using the commercial mixture of
oligofructose from Orafti. The accepted value was within 100 5%.
2.5. Calculation and expression of results
Amount of inulin-type fructans was calculated from the
difference of the amounts of each sugar – fructose, glucose and
sucrose – before and after enzyme hydrolysis as given in AOAC
(2005, 997.08). Individual fructo-oligosacharides (FOS) in the hot
water extract were determined and quantified from each calibra-tion curve of GF2
, GF3
and GF4
2.3.6 การน้ำตาลกำหนด โดย chromatography ก๊าซสารสกัดจากน้ำตาลในน้ำอุ่นที่ประกอบด้วยฟรักโทสพื้นเมืองกลูโคส และซูโครส และ FOS (GF2, GF3, GF4) และในการโซลูชั่นมาตรฐานที่เกี่ยวข้องได้ตามที่สูงอุณหภูมิ GC (Agilent17890 สหรัฐอเมริกา), พร้อมกับมีหลอดเลือดฝอยคอลัมน์ห่มอลูมิเนียมยาว 6 เมตร รหัส 0.53 มม. เคลือบ ด้วย 5%-phenyl-polycarboranesiloxane เอชที-5, Restek1สหรัฐอเมริกา) ตั้ง 8 447 ใช้ก๊าซฮีเลียม C. เป็น ature อารมณ์ของเครื่องตรวจจับสลักผู้ขนส่งก๊าซ ใช้เป็นชุดที่อัตราการไหลของ 9 mL/นาที ก๊าซไนโตรเจนตั้งแต่งแก๊ส อัตราการไหลของอากาศ 25 mL/นาที และก๊าซไฮโดรเจนจับสลักได้ตั้ง 400 mL/min และ 40 mL/minตามลำดับ สำหรับน้ำตาลในโซลูชันของ inulinase hydrolysedแยกซึ่งประกอบด้วยพื้นเมืองน้ำตาล น้ำตาลเศษจาก inulinและ FOS (ฟรักโทสและกลูโคส) ได้กำหนดใช้ GC อื่น(Agilent16850 สหรัฐอเมริกา) ซึ่งเพียบพร้อมไป ด้วยรูพรุน fused ซิลิก้าคอลัมน์ (ความยาว 30 เมตร รหัส 0.32 มม. เคลือบ ด้วย 100% dimethylpo-lysiloxane, HP-1, Agilent1J และ W สหรัฐอเมริกา) อุณหภูมิของสลักมีตั้งเครื่องตรวจจับที่ 350 8 C. บริษัทขนส่งเดียวกันและให้ค่าก๊าซใช้ ตั้งที่อัตราการไหล 2 mL/min และ 30 mL/minตามลำดับ สร้างก๊าซไฮโดรเจนและอากาศสำหรับจับสลักที่350 mL/min และ 35 mL/min ตามลำดับ2.4 การวิเคราะห์ควบคุมคุณภาพส่วนผสมทางการค้าของ oligofructose (Orafti1P95) ถูกใช้เป็นตัวอย่างการควบคุมคุณภาพสำหรับการกำหนด FOS และน้ำตาล นมผง ธาตุกับ inulin (ป้องกัน 1 + Nestle1), ใช้สำหรับfructans inulin ชนิดและน้ำตาลบางส่วน (ฟรักโทส กลูโคส และซูโครส) ค่ากำหนดของ FOS ใน oligofructose พาณิชย์จัด โดย Orafti, Co., Ltd เบลเยี่ยม ถูก 93.2 g/100 g ขณะพัฒนาเป็น SD โดย Orafti และสถาบันหมายถึง ค่าที่กำหนดไว้โภชนาการ มหาวิทยาลัยมหิดล (INMU) ห้องปฏิบัติการ มี n = 10 ถูก89.1 1.72 กรัม/100 กรัมกำหนดค่า inulin และน้ำตาล (ผลรวมของฟรักโทส กลูโคส และซูโครส) ในนมผงธาตุ พัฒนาโดยห้องปฏิบัติการเดียวกัน ถูก 2.79 0.20 และ 2.17 0.22 g/100 gตามลำดับ สำหรับระบบการควบคุมคุณภาพประจำวัน มีวัสดุทั้งสองanalysed ในแต่ละชุดพร้อมกับตัวอย่างที่ไม่รู้จัก ค่ายอมรับผลต้องตก 2SD หมายถึงค่ากำหนดของแต่ละคอมโพเนนต์ที่แสดงประสิทธิภาพที่ดีของนักวิเคราะห์ความแม่นยำของการวิเคราะห์แต่ละ ซึ่งบ่งชี้ โดยเปอร์เซ็นต์ความแตกต่างระหว่าง determinations ซ้ำ ต้องได้น้อยกว่า 10 เปอร์เซ็นต์กู้คืนของ FOS ยังดำเนินการโดยใช้ส่วนผสมทางการค้าของoligofructose จาก Orafti ค่าที่ยอมรับได้ภายใน 5 100%2.5 การคำนวณและนิพจน์ผลลัพธ์คำนวณจำนวน fructans inulin ชนิดความแตกต่างของยอดเงินแต่ละน้ำตาลฟรักโทส กลูโคส และซูโครสก่อน และ หลังไฮโตรไลซ์เอนไซม์ที่กำหนดใน AOAC(2005, 997.08) แต่ละ fructo-oligosacharides (FOS) ในร้อนกำหนด และ quantified จากเส้นโค้งแต่ละสเตรชัน calibra ของ GF2 สารสกัดน้ำ, GF3และ GF4
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3.6 ความมุ่งมั่นของน้ำตาลโดยแก๊ส chromatography
น้ำตาลในสารสกัดจากน้ำร้อนที่มีฟรุกโตสพื้นเมือง
กลูโคสและซูโครสและ FOS (GF
2
, GF3
, GF4
) และ
โซลูชั่นมาตรฐานที่สอดคล้องกันได้รับการพิจารณาโดยสูง
อุณหภูมิ GC (Agilent
1
7890, USA) มีอุปกรณ์ครบครัน มีเส้นเลือดฝอย
คอลัมน์อลูมิเนียมหุ้ม (ความยาว 6 เมตร ID 0.53 มมเคลือบด้วย 5% -phenyl-polycarboranesiloxane, HT-5 Restek
1
สหรัฐอเมริกา) อารมณ์-ature ของเครื่องตรวจจับ FID ตั้งอยู่ที่ 447 8 ซีก๊าซฮีเลียมที่ใช้เป็น
ก๊าซผู้ให้บริการกำหนดไว้ที่อัตราการไหลของ 9 มิลลิลิตร / นาที ก๊าซไนโตรเจนถูกใช้เป็น
ที่ทำขึ้นก๊าซตั้งไว้ที่อัตราการไหล 25 มิลลิลิตร / นาที อากาศและก๊าซไฮโดรเจน
สำหรับตรวจจับ FID ที่ตั้งอยู่ที่ 400 มิลลิลิตร / นาทีและ 40 มิลลิลิตร / นาที
ตามลำดับ สำหรับน้ำตาลในการแก้ปัญหาของ inulinase ย่อย
ที่มีสารสกัดจากน้ำตาลพื้นเมืองเศษส่วนน้ำตาลจากอินนูลิน
และ FOS (ฟรุกโตสและกลูโคส) ได้รับการพิจารณาโดยใช้อีก GC
(Agilent
1
6850 สหรัฐอเมริกา) ซึ่งมาพร้อมกับซิลิกาหลอมละลายฝอย
คอลัมน์ (ความยาว 30 เมตร, ID 0.32 มมเคลือบด้วย 100% dimethylpo-lysiloxane, HP-1, Agilent
1
J & W, สหรัฐอเมริกา) อุณหภูมิ FID
ตรวจจับตั้งอยู่ที่ 350 8 ซีผู้ให้บริการเดียวกันและทำขึ้นก๊าซ
ถูกนำมาใช้; พวกเขาถูกตั้งไว้ที่อัตราการไหล 2 มิลลิลิตร / นาทีและ 30 มิลลิลิตร / นาที
ตามลำดับ อากาศและก๊าซไฮโดรเจนสำหรับตรวจจับ FID ถูกตั้งไว้ที่
350 มิลลิลิตร / นาทีและ 35 มิลลิลิตร / นาทีตามลำดับ.
2.4 การควบคุมคุณภาพการวิเคราะห์
ส่วนผสมในเชิงพาณิชย์ของ Oligofructose (Orafti
1
P95) ถูกใช้เป็น
ตัวอย่างในการควบคุมคุณภาพสำหรับ FOS และน้ำตาลความมุ่งมั่น นม
ผงเสริมด้วยอินนูลิน (1+ คุ้มครองเนสท์เล่
1
) ที่ใช้สำหรับ
ย่อย fructan ชนิดอินนูลินและน้ำตาลบางคน (ฟรุกโตสกลูโคสและ
ซูโครส) ค่าที่กำหนดของ FOS ใน Oligofructose เชิงพาณิชย์
ให้โดย Orafti, จำกัด , เบลเยียมเป็น 93.2 กรัม / 100 กรัมในขณะที่
ค่าที่กำหนดพัฒนาเป็นหมายถึง SD โดย Orafti และโดยสถาบัน
โภชนาการมหาวิทยาลัยมหิดล (INMU) ห้องปฏิบัติการที่มี n = 10 เป็น
89.1 1.72 กรัม / 100 กรัม ค่าที่ได้รับมอบหมายของอินนูลินและน้ำตาล (ผลรวมของ
ฟรุกโตสกลูโคสและซูโครส) ในนมผงเสริมการพัฒนา
โดยห้องปฏิบัติการเดียวกันเป็น 2.79 0.20 และ 2.17 0.22 กรัม / 100 กรัม
ตามลำดับ สำหรับระบบการควบคุมคุณภาพในชีวิตประจำวัน, วัสดุทั้งสองถูก
วิเคราะห์ในแต่ละชุดพร้อมกับตัวอย่างที่ไม่รู้จัก ค่าที่ยอมรับ
ของผลลัพธ์ที่จะต้องตกอยู่ในความหมาย 2SD ของค่าที่กำหนดของ
แต่ละองค์ประกอบซึ่งแสดงให้เห็นผลการดำเนินงานที่ดีของนักวิเคราะห์.
แม่นยำของแต่ละวิเคราะห์ซึ่งแสดงให้เห็นความแตกต่างร้อยละ
ระหว่างพิจารณาซ้ำกันต้องไม่เกินร้อยละ 10
การฟื้นตัวของ FOS ยังได้รับการดำเนินการโดยใช้ส่วนผสมในเชิงพาณิชย์ของ
Oligofructose จาก Orafti ค่าที่ยอมรับคือภายใน 100 5%.
2.5 การคำนวณและการแสดงออกของผล
จำนวนย่อย fructan อินนูลินชนิดที่คำนวณได้จาก
ความแตกต่างของจำนวนเงินของแต่ละน้ำตาล - น้ำตาลกลูโคสฟรุกโตสและ
ซูโครส - ก่อนและหลังการย่อยของเอนไซม์ตามที่กำหนดใน AOAC
(2005, 997.08) ส่วนบุคคลฟรุกโต oligosacharides (FOS) ในร้อน
สารสกัดจากน้ำได้รับการพิจารณาและวัดจากแต่ละโค้ง Calibra-การของ GF2
, GF3
และ GF4
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.3.6 . น้ำตาลปริมาณโดยวิธีโครมาโทกราฟี
แก๊สน้ำตาลในน้ำร้อนสารสกัดที่มีฟรักโทสพื้นเมือง
กลูโคสและซูโครสและ FOS ( GF
2
, gf3
gf4 ) และสอดคล้องมาตรฐานโซลูชั่นวิเคราะห์โดย GC อุณหภูมิสูง ( Agilent
1
7890 , USA ) พร้อมกับคอลัมน์แคพิลลารี
อลูมิเนียม clad ( ความยาว 6 เมตร รหัส 0.53 มิลลิเมตร เคลือบด้วย 5 - ฟีนิล polycarboranesiloxane ht-5 restek
, ,1
, USA ) อารมณ์ ตูเร ตรวจจับสลักไว้ที่ 447 8 C . ก๊าซฮีเลียมใช้
บริษัทขนส่งก๊าซ , ชุดที่ 9 มล. / นาที อัตราการไหลของแก๊สไนโตรเจนใช้เป็นการแต่งหน้าที่อัตราการไหลของแก๊ส , ชุด 25 มิลลิลิตร / นาที อากาศและไฮโดรเจนก๊าซ
สำหรับเครื่องฟิดถูกตั้งที่ 400 มล. / นาทีและ 40 ml / min
ตามลำดับ สำหรับปริมาณน้ำตาลในสารละลายที่สกัด inulinase
ซึ่งประกอบด้วยน้ำตาลพื้นเมืองเศษส่วนจากอินูลิน
ผสมน้ำตาล ( กลูโคสและฟรุคโตส ) มีการพิจารณาอีก GC
( Agilent
1
6850 , USA ) ซึ่งประกอบด้วยซิลิกาคอลัมน์ capillary
( ความยาว 30 เมตร , ID 0.32 มม. เคลือบด้วย 100% dimethylpo lysiloxane hp-1 Agilent , ,
1
J & W , USA ) อุณหภูมิของเครื่องฟิด
ตั้งไว้ที่ 350 8 C เดียวกัน ผู้ให้บริการและให้ใช้ก๊าซ
;พวกเขาตั้งที่อัตราการไหล 2 มล. / นาทีและ 30 ml / min
ตามลำดับ อากาศและไฮโดรเจนก๊าซ เครื่องฟิตจัดที่
350 มิลลิลิตรต่อนาทีและ 30 มิลลิลิตร / นาที ตามลำดับ
2.4 . การควบคุมคุณภาพวิเคราะห์
ส่วนผสมเชิงพาณิชย์ของโอลิโกฟรุคโตส ( orafti
1
p95 ) ใช้
คุณภาพการควบคุมอย่างน้ำตาล FOS และความมุ่งมั่น นมผง
, เสริมอินูลิน ( คุ้มครอง 1 , Nestle
1
,
) ใช้สำหรับอินนูลินชนิดฟรักแทน และน้ำตาล ( ฟรักโทส กลูโคส และซูโครส
) กำหนดมูลค่าของ FOS ในโอลิโกฟรุคโตส เชิงพาณิชย์ โดย orafti
, Co . , Ltd , เบลเยียม , ต่ำกรัม / 100 กรัม ส่วน
พัฒนากำหนดค่าเป็นหมายถึง SD โดย orafti และสถาบัน
โภชนาการ มหาวิทยาลัยมหิดลห้องปฏิบัติการ , n = 10 ,
89.1 1.72 กรัม / 100 กรัม ให้คุณค่าของอินูลินและน้ำตาล ( ผลรวมของ
ฟรักโทส กลูโคส และซูโครส ) ในการเสริมนมผง พัฒนา
โดยห้องปฏิบัติการเดียวกัน 2.79 0.20 และ 2.17 0.22 กรัม / 100 g ,
) สำหรับระบบการควบคุมคุณภาพทุกวัน ทั้งวัสดุที่ใช้ในแต่ละชุด
พร้อมตัวอย่างที่ไม่รู้จัก ยอมรับค่า
ผลต้องตกอยู่ในความหมายของค่า
2sd ที่ได้รับมอบหมายแต่ละองค์ประกอบที่บ่งชี้ประสิทธิภาพที่ดีของนักวิเคราะห์
ความแม่นยำของแต่ละการวิเคราะห์ซึ่งบ่งชี้โดยเปอร์เซ็นต์ความแตกต่าง
ระหว่างใช้ซ้ำ ต้องน้อยกว่า 10 %
การฟื้นตัวของ FOS ยังดำเนินการโดยใช้ส่วนผสมเชิงพาณิชย์ของ
โอลิโกฟรุคโตสจาก orafti . ยอมรับคุณค่าภายใน 100 % 5 .
2.5 การคำนวณและแสดงผลลัพธ์
ปริมาณอินนูลินชนิดฟรักแทนคำนวณได้จากความแตกต่างของปริมาณของแต่ละคน
และน้ำตาลฟรุคโตส กลูโคส และซูโครส และก่อนและหลังการย่อยด้วยเอนไซม์เป็นโปรตีนที่ได้รับใน
( 2005 997.08 ) บุคคล oligosacharides ฟรุกโต ( FOS ) ในการแยกวิเคราะห์และ quantified
น้ำร้อนจากแต่ละคาลิบร้า tion โค้ง gf2
gf4 gf3 และ
การแปล กรุณารอสักครู่..