2.4. Analytical methodsFermentation

2.4. Analytical methods
Fermentation dynamics was assessed gravimetrically measuring
the weight loss of fermentation medium due to CO2 release as
described earlier [12]. The samples for physico-chemical analysis
(ca. 20 mL aliquots) were taken every 24 h of fermentation. The
non dissolved solids concentration was determined as follows: ca.
10 g of fermentation media (with an accuracy of 0.001 g) were filtered
through pre-dried (105 C, 4 h) and pre-weighted filter paper,
the residual dissolved solids were washed with ca. 250 mL of distilled
water. The filters with remaining non-dissolved solids were
dried in an oven at 60 C for 12 h next at 105 C for 4 h. Afterwards
the filters were cooled to room temperature in a desiccator and
weighted with an accuracy of 0.001 g. The difference in the weight
of the filter with and without of non-dissolved particles gave the
concentration of them in the fermentation medium which was
expressed as grams of non-dissolved solids per kilogram. For HPLC,
reducing sugar and dissolved solids analysis the samples of fermentation
media were centrifuged at 6000 rpm (5243g) at 4 C using
MPW-351R centrifuge (MPW Med. Instruments, Poland) and clear
supernatants were taken for analyses. The reducing sugars concentration
(as glucose) was determined using the DNS method [26].
The dissolved solids content (apparent extract) was determined
by the density measurement of the clarified fermentation medium
as described previously [29]. The concentration of sugars (glucose,
maltotriose and dextrins (DP4+)), fermentation by-products (glycerol,
lactic acid) and ethanol was determined using high performance
liquid chromatography (HPLC). Prior to analysis clear
supernatant after centrifugation of fermentation media was diluted
with bidistilled water in a 1:3 v/v ratio and filtered through nylon
syringe filter (0.2 lm). The analysis was performed using Prominence
chromatograph (Shimadzu, Japan)equipped with Rezex
ROA-Organic Acid H + column (300  7.8 mm) (Phenomenex,
USA). Following parameters of HPLC analysis were applied: injection
volume-20 lL, elution temperature-60 C, mobile phase-
0.005 mol L1 H2SO4, mobile phase flow rate-0.6 mL min1. The
analytes were detected using refractive index detector (RID-10A,Shimadzu) at 50 C. Obtained chromatograms were integrated
using external standard method with CHROMAX 10 software
(Pol-Lab, Poland).
On the basis of obtained results following process parameters
were calculated at 24 h time intervals: ethanol production rate
(rp [g L1 h1]) and practical ethanol yield (Yp [%; g kg1 of sugars;
g kg1 of raw material dry matter] on the basis of stoichiometric
reaction where 1 kg of sugars (as glucose) is converted to 511.1 g
of ethanol [30].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การวิเคราะห์วิธีDynamics หมักถูกประเมินวัด gravimetricallyน้ำหนักของกลางหมักเนื่องจาก CO2 ปล่อยเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [12] ตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมีและฟิสิกส์(ca. 20 mL aliquots) ได้นำทุก 24 ชมของหมักดอง ที่กำหนดความเข้มข้นของของแข็งไม่ละลายดัง: caถูกกรอง 10 กรัมหมักสื่อ (มีความถูกต้องของ 0.001 g)ผ่านก่อนแห้ง (105 C, 4 h) และถ่วงน้ำหนักกระดาษกรอง ล่วงหน้าของแข็งละลายที่เหลือถูกล้าง ด้วย ca 250 mL ของกลั่นน้ำ กรอง ด้วยของแข็งไม่ใช่ส่วนยุบที่เหลือได้อบแห้งในเตาอบที่ 60 C สำหรับ h 12 ถัดไปที่ 105 C สำหรับ 4 h. ภายหลังตัวกรองที่ได้ระบายความร้อนด้วยอุณหภูมิห้องใน desiccator เป็น และถ่วงน้ำหนักแม่นยำ 0.001 g ความแตกต่างของน้ำหนักของตัวกรองที่มี และไม่มีของอนุภาคที่ไม่ใช่ส่วนยุบให้การความเข้มข้นของพวกเขาในการหมักซึ่งแสดงเป็นกรัมของแข็งที่ไม่ใช่ส่วนยุบต่อกิโลกรัม สำหรับ HPLCลดน้ำตาลและการวิเคราะห์ของแข็งที่ละลายตัวอย่างของหมักดองสื่อถูก centrifuged ที่ 6000 rpm (5243g) ที่ใช้ 4 Cเครื่องหมุนเหวี่ยง MPW 351R (เครื่องมือประ MPW โปแลนด์) และล้างsupernatants ถูกใช้สำหรับวิเคราะห์ ความเข้มข้นของน้ำตาลลดลง(เป็นน้ำตาลกลูโคส) ที่ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการ DNS [26]กำหนดเนื้อหาของแข็งละลาย (แยกชัดเจน)โดยวัดความหนาแน่นปานกลางใสหมักตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [29] ความเข้มข้นของน้ำตาล (กลูโคสmaltotriose และ dextrins (DP4 +)), หมักสินค้าพลอย (กลีเซอรกรดแลกติก) และเอทานอลที่กำหนดใช้ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) ก่อนการวิเคราะห์ชัดเจนsupernatant หลัง centrifugation หมักสื่อถูกทำให้เจือจางน้ำ bidistilled ในอัตราส่วนเป็น 1:3 v/v และกรองผ่านผ้าไนล่อนเข็มตัวกรอง (0.2 lm) ทำการวิเคราะห์โดยใช้ความโดดเด่นchromatograph (Shimadzu ญี่ปุ่น) พร้อม Rezexราวอินทรีย์กรด H + (300 7.8 mm) คอลัมน์ (Phenomenexสหรัฐอเมริกา) ใช้พารามิเตอร์ต่อไปนี้วิเคราะห์ HPLC: ฉีดปริมาตร 20 lL, elution อุณหภูมิ 60 C ระยะเคลื่อนที่ -0.005 โมล L 1 กำมะถัน ระยะเคลื่อนไหลอัตรา 0.6 mL นาที 1 ที่ใช้เครื่องตรวจจับดรรชนี (RID-10A, Shimadzu) ที่ 50 C. Obtained chromatograms ได้รวม analytes พบใช้วิธีการมาตรฐานภายนอกกับซอฟต์แวร์ CHROMAX 10(Pol แล็บ โปแลนด์)บนพื้นฐานของการได้รับผลลัพธ์ต่อพารามิเตอร์กระบวนการช่วงเวลา 24 ชม: อัตราการผลิตเอทานอล(rp [g h L 1 1]) และผลผลิตเอทานอลปฏิบัติ (Yp [% g กก. 1 น้ำตาลกิโลกรัม g 1 วัตถุดิบแห้งเรื่อง] ตาม stoichiometricปฏิกิริยาที่ 1 กิโลกรัมของน้ำตาล (เป็นน้ำตาลกลูโคส) จะถูกแปลงเป็น 511.1 gของเอทานอล [30]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 วิธีการวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงการหมักได้รับการประเมิน gravimetrically วัดการสูญเสียน้ำหนักของกลางหมักเนื่องจากการปล่อยCO2 เป็นอธิบายไว้ก่อนหน้า[12] กลุ่มตัวอย่างที่ใช้ในการวิเคราะห์ทางเคมีกายภาพ(แคลิฟอร์เนีย 20 มล aliquots) ถูกนำตัวทุก 24 ชั่วโมงของการหมัก ของแข็งที่ละลายความเข้มข้นที่ไม่ถูกกำหนดดังนี้แคลิฟอร์เนีย10 กรัมของสื่อการหมัก (กับความถูกต้องของ 0.001 กรัม) ได้รับการกรองผ่านก่อนแห้ง(105 ซี 4 ชั่วโมง?) และกระดาษกรอง Pre-weighted, ของแข็งที่ละลายในน้ำที่เหลือ ถูกล้างด้วยแคลิฟอร์เนีย 250 มิลลิลิตรกลั่นน้ำ กรองด้วยของแข็งที่เหลือที่ไม่ละลายในน้ำได้แห้งในเตาอบที่ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 12 ชั่วโมงถัดไปที่ 105 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 4 ชั่วโมง หลังจากนั้นตัวกรองที่ถูกระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องในเดซิและน้ำหนักกับความถูกต้องของ0.001 กรัม ความแตกต่างในน้ำหนักของตัวกรองที่มีและไม่มีของอนุภาคที่ไม่ละลายให้ความเข้มข้นของพวกเขาในสื่อหมักซึ่งแสดงเป็นกรัมของของแข็งที่ไม่ละลายต่อกิโลกรัม สำหรับ HPLC, ลดน้ำตาลและการวิเคราะห์ของแข็งที่ละลายตัวอย่างของการหมักสื่อถูกหมุนเหวี่ยงที่ 6000 รอบต่อนาที (5243g) ที่ 4 องศาเซลเซียสโดยใช้เครื่องหมุนเหวี่ยงMPW-351R (MPW Med. เครื่องดนตรี, โปแลนด์) และชัดเจนsupernatants ถูกดำเนินการสำหรับการวิเคราะห์ น้ำตาลความเข้มข้นลด(กลูโคส) ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการของ DNS [26]. ละลายปริมาณของแข็ง (สารสกัดที่เห็นได้ชัด) ถูกกำหนดโดยการวัดความหนาแน่นของกลางหมักชี้แจงตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้[29] ความเข้มข้นของน้ำตาล (กลูโคสmaltotriose และ dextrins (DP4 +)) การหมักโดยผลิตภัณฑ์ (กลีเซอรอลกรดแลคติค) และเอทานอลได้รับการพิจารณาโดยใช้ที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) ก่อนที่จะมีการวิเคราะห์ที่ชัดเจนใสหลังจากการหมุนเหวี่ยงสื่อหมักถูกเจือจางด้วยน้ำbidistilled ใน 1: 3 v / โวลต์และอัตราการกรองผ่านไนลอนกรองเข็มฉีดยา(0.2 ไมครอน) การวิเคราะห์ที่ได้รับการดำเนินการโดยใช้รุ่งเรืองchromatograph (Shimadzu, ญี่ปุ่น) พร้อมกับ Rezex ROA-กรดอินทรีย์ H + คอลัมน์ (300? 7.8 มิลลิเมตร) (Phenomenex, สหรัฐอเมริกา) ต่อไปนี้พารามิเตอร์ของการวิเคราะห์ HPLC ถูกนำไปใช้ฉีดปริมาณ20 LL อุณหภูมิ 60 C ชะมือถือ phase-? 0.005 mol L 1 H2SO4 ไหลเฟสเคลื่อนที่อัตรา 0.6 มิลลิลิตรต่ำสุด 1? วิเคราะห์ตรวจพบโดยใช้เครื่องตรวจจับดัชนีหักเห (RID-10A, Shimadzu) ที่ 50 องศาเซลเซียส โครมาโตที่ได้มาบูรณาการโดยใช้วิธีการมาตรฐานภายนอกที่มี Chromax 10 ซอฟแวร์ (Pol-แล็บ, โปแลนด์). บนพื้นฐานของผลที่ได้ดังต่อไปนี้พารามิเตอร์กระบวนการนี้จะถูกคำนวณเวลา 24 ชั่วโมงช่วงเวลา: อัตราการผลิตเอทานอล (RP [กรัม L 1 ชั่วโมง 1? ]) และผลผลิตเอทานอลในทางปฏิบัติ (Yp [%; กรัมต่อกิโลกรัม 1 ของน้ำตาล; กรัมต่อกิโลกรัม 1 วัตถุดิบแห้ง] บนพื้นฐานของทฤษฎี? ปฏิกิริยาที่ 1 กิโลกรัมน้ำตาล (กลูโคส) จะถูกแปลงเป็น 511.1 กรัมเอทานอล[30]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . วิธีการวิเคราะห์และประเมินการวัดพลวัต

gravimetrically การสูญเสียน้ำหนักเนื่องจากการปล่อย CO2 เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อชนิด
อธิบายไปก่อนหน้านี้ [ 12 ] ตัวอย่างการวิเคราะห์ทางกายภาพและเคมี
( ประมาณ 20 ml เฉยๆ ) ถ่ายทุกชั่วโมงที่ 24 ของการหมัก
ไม่ใช่ของแข็งละลายน้ำความเข้มข้นตั้งใจดังนี้ : .
10 กรัมของสื่อการหมัก ( ด้วยความถูกต้องของ 0001 G )
ผ่านกรองก่อนแห้ง ( 105  C 4 H ) และก่อนน้ำหนักกระดาษกรอง
ที่เหลือละลายได้ถูกล้างด้วยประมาณ 250 มิลลิลิตร
กลั่นน้ำ ตัวกรองกับส่วนที่เหลือไม่ใช่ของแข็งละลายได้
แห้งเตาอบที่ 60  C เป็นเวลา 12 ชั่วโมงถัดไปที่ 105  C เป็นเวลา 4 ชั่วโมง หลังจากนั้น
ตัวกรองเป็นเย็นที่อุณหภูมิห้องในเดซิกเคเตอร์และ
ถ่วงน้ำหนักด้วยความถูกต้องของ 0.001 กรัมความแตกต่างในน้ำหนัก
ของตัวกรองที่มีและไม่มีที่ไม่ละลายอนุภาคให้
ความเข้มข้นของพวกเขาในอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดที่
แสดงเป็นกรัมไม่ละลายต่อกิโลกรัม สำหรับ HPLC
ลดน้ำตาลและของแข็งละลายน้ำวิเคราะห์ตัวอย่างของสื่อและเป็นระดับที่ 6000 รอบต่อนาที (
5243g ) ที่ 4  C ใช้
mpw-351r เครื่องหมุนเหวี่ยง ( mpw Med . เครื่องมือโปแลนด์ ) และชัดเจน
supernatants นำมาวิเคราะห์ . การลดน้ำตาลความเข้มข้น
( กลูโคส ) ตั้งใจใช้ DNS วิธี [ 26 ] .
ละลายของแข็ง ( แยกชัดเจน ) ถูกกำหนดโดยการวัดความหนาแน่นของ

ชี้แจงในอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 29 ] ความเข้มข้นของน้ำตาล ( กลูโคส ,
มอลโตไทรโอสเดกซ์ตริน ( และ dp4 ) )ผลพลอยได้จากการหมัก ( กลีเซอรอล
กรด ) และเอทานอลก็ตัดสินใจใช้วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC )
. ก่อนการวิเคราะห์ชัดเจน
น่านหลังการปั่นเหวี่ยงสื่อการหมักเจือจางกับน้ำในอัตราส่วน 1 : 3 bidistilled
v / v ) และกรองผ่านตัวกรองเข็มไนลอน
( 0.2 ไมโครเมตร ) ผลจากการวิเคราะห์โดยใช้โครมาโตกราฟ ( Shimadzu โดด
,ญี่ปุ่น ) พร้อมกับคอลัมน์ rezex
ที่กรดอินทรีย์ H ( 300  7.8 มิลลิเมตร ) ( phenomenex
, USA ) พารามิเตอร์ต่อไปนี้การวิเคราะห์ HPLC ใช้ฉีด
volume-20 จะใช้เฟสเคลื่อนที่ temperature-60  C -
0.005 โมล L  1 กรดซัลฟิวริก , มือถือระยะไหล rate-0.6 มิลลิลิตรต่อนาที  1
สารพบใช้ตรวจจับค่าดัชนีหักเห ( rid-10a Shimadzu , ) ที่ 50  ได้ถูกบูรณาการ
กลิ่น Cใช้วิธีมาตรฐานภายนอกกับ chromax 10 ซอฟต์แวร์
( Pol Lab , โปแลนด์ ) .
บนพื้นฐานของผลพารามิเตอร์ต่อไปนี้
คำนวณเวลา 24 ชั่วโมงช่วงเวลาที่อัตราการผลิตเอทานอล
( RP [ g l  1 H  1 ] ) และผลผลิตเอทานอล ปฏิบัติ ( YP [ % ; G  1 กิโลกรัม น้ำตาล ;
 1 กรัมต่อกิโลกรัมของวัตถุดิบแห้ง บนพื้นฐานของอัตราส่วน
]ปฏิกิริยาที่ 1 กิโลกรัมของน้ำตาล ( กลูโคส ) จะถูกแปลงเป็น 511.1 g
เอทานอล [ 30 ]