2.7. Immunohistochemistry (IHC)Afte

2.7. Immunohistochemistry (IHC)
After deparaffinization in prostate tissues, immune histochem- istry (IHC) was performed on 10-lm-thick sections. Antigen retrieval was performed using citrate buffer, pH 6.0, for 10 min prior to peroxide quenching with 3% H2O2 in phos- phate buffered saline (PBS) for 15 min. The prostate tissues were then washed in PBS and preblocked with normal goat or rabbit serum for 10 min. For reaction with primary anti- body, slides were incubated with anti-transforming growth fac- tor – b1 (TGF-B1) (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA) in a 1:200 dilution and then anti-vascular endothe- lial growth factor (VEGF) (Santa Cruz Biotechnology) in a 1:500 dilution overnight at 4 C. The sections were then incu- bated with biotinylated secondary antibodies (1:1000) for 1 h. Following a washing step with PBS, streptavidin–horseradish peroxidase was applied. Finally, the sections were rinsed in PBS and developed with diaminobenzidine tetrahydrochloride substrate for 10 min. At least three random fields of each sec- tion were examined at 100 (Kim et al., 2014).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7. Immunohistochemistry (IHC)หลังจาก deparaffinization ในเนื้อเยื่อต่อมลูกหมาก ภูมิคุ้มกัน histochem-istry (IHC) ทำในส่วนที่ 10 lm หนา เรียก antigen ดำเนินใช้ซิเตรตบัฟเฟอร์ ค่า pH 6.0 สำหรับ 10 นาทีก่อนชุบเปอร์ออกไซด์ 3% H2O2 ใน phos phate บัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS) 15 นาที เนื้อเยื่อต่อมลูกหมากแล้วล้างใน PBS และ preblocked กับซีรั่มของแพะหรือกระต่ายปกติสำหรับ 10 นาที ปฏิกิริยากับหลักป้องกันตัว การภาพนิ่งถูกมบ่มเลี้ยงกับเปลี่ยนกันเติบโตラทอร์ – b1 (TGF-B1) (เทคโนโลยีชีวภาพซานตาครูซ ซานตาครูซ CA สหรัฐอเมริกา) ในการเจือจาง 1: 200 และหลอดเลือดป้องกันแล้ว endothe lial เติบโตปัจจัย (VEGF) (ซานตาครูซเทคโนโลยีชีวภาพ) ในการเจือจาง 1: 500 ค้างคืนที่ 4 c ส่วนได้แล้ว incu - bated กับ biotinylated แอนตี้รอง (1: 1000) สำหรับ 1 ชั่วโมง ต่อไปนี้เป็นขั้นตอนล้างด้วย PBS ฮอส streptavidin – ฮอร์สถูกนำไปใช้ ในที่สุด ส่วนที่ล้างใน PBS และพัฒนา ด้วยพื้นผิว tetrahydrochloride diaminobenzidine 10 นาที น้อยสามเขตข้อมูลแบบสุ่มของแต่ละวินาทีทางการค้าได้ตรวจสอบที่ 100 (Kim et al. 2014)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 immunohistochemistry (IHC)
หลังจาก deparaffinization ในเนื้อเยื่อต่อมลูกหมากภูมิคุ้มกัน istry histochem- (IHC) ได้ดำเนินการในส่วนที่ 10 LM-หนา Antigen ดึงถูกดำเนินการโดยใช้บัฟเฟอร์ซิเตรตมีค่า pH 6.0 เป็นเวลา 10 นาทีก่อนที่จะดับเปอร์ออกไซด์ H2O2 กับ 3% ใน phate phos- บัฟเฟอร์น้ำเกลือ (พีบีเอส) เป็นเวลา 15 นาที เนื้อเยื่อต่อมลูกหมากถูกล้างแล้วในพีบีเอสและ preblocked กับแพะปกติหรือเซรั่มกระต่ายเป็นเวลา 10 นาที สำหรับการเกิดปฏิกิริยากับร่างกายต่อต้านหลักภาพนิ่งถูกบ่มกับการต่อต้านการเปลี่ยนการเจริญเติบโต Tor fac- - B1 (TGF-B1) (Santa Cruz เทคโนโลยีชีวภาพ, ซานตาครูซ, CA, USA) ใน 1: 200 เจือจางแล้ว endothe ป้องกันหลอดเลือด - ปัจจัยการเจริญเติบโต lial (VEGF) (Santa Cruz เทคโนโลยีชีวภาพ) ใน 1: 500 เจือจางค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียสส่วนที่ถูกแล้ว incu- ซึ้งน้อยลงด้วยแอนติบอดีรอง biotinylated (1: 1000) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ต่อไปนี้เป็นขั้นตอนการล้างด้วยพีบีเอส, สเต-มะรุม peroxidase ถูกนำมาใช้ สุดท้ายส่วนที่ถูกล้างในพีบีเอสและการพัฒนาที่มีพื้นผิว diaminobenzidine tetrahydrochloride เป็นเวลา 10 นาที อย่างน้อยสามสาขาสุ่มของแต่ละการชั่วมีการตรวจสอบที่ 100 (Kim et al., 2014)