2. Methods2.1. MaterialsThe ผักแขยง

2. Methods
2.1. Materials
The ผักแขยง plant used in this study was bought at a Vietnamese store in Taiwan. FolineCiocalteu (FC) reagent,
sodium carbonate anhydrous, gallic acid, sodium nitrite, sodium hydroxide, aluminum chloride anhydrous, 2,2-
diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), trichloroacetic acid, ferric chloride anhydrous, ascorbic acid, and catechin were purchased from Sigma-Aldrich GmbH (Sternheim, Germany). Sulfuric acid and potassium-hexacyanoferrate were obtained from Merck (Darmstadt, Germany). Anhydrous monobasic potassium phosphate was purchased from Fisher Chemicals (Fair Lawn, NJ, USA),whereas HPLC-grade methanol, ethanol, and acetone were supplied by Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).

2.2. Sample preparation
After the roots were removed, a fresh ผักแขยง plant (2 kg) was washed and freeze-dried. The freeze-dried sample was ground into powder using a kitchen milling machine and passed through a 60-mesh sieve. The powder (100 g) was then defatted using n-hexane as the solvent. The solideliquid mixture was filtered with ADVANTEC qualitative filter paper number 2, and the residue was dried in an oven at 50
C for 6 hours. The dried defatted L. aromatica (DFLA) was stored at 4
C prior to extraction.

2.3. Extraction of DFLA
DFLA (30 mg) was mixed with the solvent (1.6 mL), and the mixture was vigorously stirred for 5 minutes. The mixture was then centrifuged (13,000g, 25
C) for 20 minutes. The supernatant obtained was concentrated under vacuum at 45
C and freeze-dried for 24 hours. The freeze-dried extract was weighed to determine the extraction yield. All freeze-dried extracts were kept at 4
C prior to analyses.

2.4. Determination of polyphenol content

2.4.1. Total phenol content
Total phenol content (TPC) in each extract was determined using the FC method described by McDonald et al [13], with minor modifications. The freeze-dried extract was dissolved in distilled water to a concentration of 50 mg/mL. The calibration curve was established using gallic acid (0e60 mg/mL). The diluted extract or gallic acid (1.6 mL) was added to 0.2 mL FC reagent (5-fold diluted with distilled water) and mixed thoroughly for 3 minutes. Sodium carbonate (0.2 mL, 10% w/v) was added to the mixture and the mixture was allowed to stand for 30 minutes at room temperature. The absorbance of the mixture was measured at 760 nm using a UVeVIS spectrophotometer
V-550 model (Jasco, Tokyo, Japan). TPC was expressed as milligram gallic acid equivalent per gram defattedผักแขยง (mg GAE/g DFLA).

2.4.2. Total flavonoid content
The total flavonoid content (TFC) of each extract was investigated using the aluminum chloride colorimetry method
described by Chang et al [14] with slight modifications. In brief, the extract sample was diluted with methanol until 100 mg/mL. The calibration curve was prepared by diluting quercetin in methanol (0e100 mg/mL). The diluted extract or quercetin (2.0 mL) was mixed with 0.1 mL of 10% (w/v) aluminum chloride solution and 0.1 mL of 0.1 mM potassium acetate solution. The mixture was kept at room temperature for 30 minutes. Then the maximum absorbance of the mixture was measured at 415 nm using a UVeVIS spectrophotometer. TFC was expressed as milligram quercetin equivalent per gram defatted L. aromatica (mg QCE/g DFLA).

2.5. Antioxidant activity
2.5.1. Total antioxidant activity
The total antioxidant activity (TAA) of the freeze-dried extract was determined by adapting the method used by Govindarajan et al [15] and Subhasree et al [16] with slight modifications. In brief, the freeze-dried extract was diluted with distilled water (60e220 mg/mL). The diluted extract (0.2 mL) was then mixed with 1.8 mL of reagent (0.6 M sulfuric acid, 28 mM sodium phosphate and 4 mM ammonium molybdate) in a capped plastic tube. The tube was incubated in a water bath at 90
C for 90 minutes, then cooled down to room temperature. The absorbance of this solution was measured at 695 nm using a UVeVIS spectrophotometer against a blank. Ascorbic acid (5e60 mg/mL) was used as the standard. TAA is expressed as equivalent of ascorbic acid.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วิธี2.1. วัสดุโรงงานผักแขยงที่ใช้ในการศึกษานี้ถูกซื้อมาที่ร้านเวียดนามไต้หวัน รีเอเจนต์ FolineCiocalteu (FC)โซเดียมคาร์บอเนตโซเดียมไฮดรอกไซด์ กรดได กอลที่ โซเดียมไนไตรต์ อลูมิเนียมคลอไรด์ได 2.2-นไดฟีนิลได-1-picrylhydrazyl (DPPH), กรด trichloroacetic ไดคคลอไรด์ วิตามิน และสารสกัดจากถูกสั่งซื้อจาก Sigma Aldrich GmbH (Sternheim เยอรมนี) กรดกำมะถันและโพแทสเซียม hexacyanoferrate ได้รับจากเมอร์ค (ดาร์มสตัดท์ เยอรมัน) ฟอสเฟตโพแทสเซียม monobasic ไดถูกซื้อจากเคมีฟิชเชอร์ (งานสนามหญ้า NJ, USA), ในขณะที่เกรด HPLC เมทานอล เอทานอล และอะซิโตนได้มาจาก Sigma Aldrich (เซนต์หลุยส์ MO สหรัฐอเมริกา)2.2. ตัวอย่างหลังจากออกราก พืชสดผักแขยง (2 กก.) ถูกล้าง และอบแห้ง ตัวอย่างแห้งบดเป็นผงโดยใช้เครื่องมิลลิ่งครัว และผ่านตะแกรงตาข่าย 60 ผง (100 กรัม) เป็นแล้วสกัดน้ำมันโดยใช้เอ็นเฮกเซนเป็นตัวทำละลาย ส่วนผสม solideliquid ถูกกรอง ด้วย ADVANTEC กระดาษกรองคุณภาพจำนวน 2 และสารตกค้างถูกอบแห้งในเตาอบที่ 50 C 6 ชั่วโมง Aromatica L. สกัดน้ำมันแห้ง (DFLA) ถูกเก็บไว้ที่ 4 C ก่อนสกัด 2.3. สกัด DFLADFLA (30 มิลลิกรัม) ถูกผสม ด้วยตัวทำละลาย (1.6 mL), และส่วนผสมแรง ๆ กวน 5 นาที ส่วนผสมก็เหวี่ยง (13, 000g, 25 C) 20 นาที Supernatant ที่ได้เข้มข้นภายใต้สุญญากาศที่อุณหภูมิ 45 และชนิดแห้ง 24 ชั่วโมง สารสกัดแห้งถูกชั่งน้ำหนักเพื่อตรวจสอบผลผลิตสกัด สารสกัดแห้งทั้งหมดถูกเก็บไว้ที่ 4 C ก่อนวิเคราะห์ 2.4. การกำหนดเนื้อหา polyphenol2.4.1. ฟีนอลรวมเนื้อหา ฟีนอลรวมเนื้อหา (TPC) ในแต่ละแยกพิจารณาใช้วิธี FC ที่อธิบายโดย McDonald et al [13], การแก้ไขเล็กน้อย สารสกัดแห้งที่ละลายในน้ำกลั่นเพื่อความเข้มข้น 50 mg/mL สอบเทียบโค้งก่อใช้กรด gallic (0e60 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) เจือจางสารสกัดหรือกรด gallic (1.6 mL) ถูกเพิ่ม 0.2 mL FC เอเจนต์ (5-fold เจือจาง ด้วยน้ำกลั่น) และผสมอย่างละเอียดเวลา 3 นาที โซเดียมคาร์บอเนต (0.2 มล. 10% w/v) ถูกเพิ่มลงในส่วนผสม และส่วนผสมที่ได้รับอนุญาตให้ยืนสำหรับ 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง โดยวัดค่าของส่วนผสมที่ 760 nm ใช้เป็นสเปค UVeVISรุ่น V-550 (Jasco โตเกียว ญี่ปุ่น) TPC ถูกแสดงเป็นกรด gallic มิลลิกรัมเทียบเท่าต่อออนซ์ defattedผักแขยง (mg อยู่/g DFLA)2.4.2. flavonoid รวมเนื้อหาเนื้อหา flavonoid ที่รวม (TFC) ของสารสกัดแต่ละถูกตรวจสอบโดยใช้วิธีอลูมิเนียมคลอไรด์ colorimetryอธิบายโดยช้าง et al [14] การแก้ไขเล็กน้อย สังเขป สารสกัดตัวอย่างถูกเจือจาง ด้วยเมทานอลจนกว่า 100 mg/mL สอบเทียบโค้งได้จัดทำขึ้นเจือจางโลหิตในเมทานอล (0e100 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) เจือจางสารสกัดหรือโลหิต (2.0 mL) ถูกผสมกับ 0.1 มล. ของสารละลายคลอไรด์อลูมิเนียม 10% (w/v) และ 0.1 มล.ของสารละลาย 0.1 mM โพแทสเซียมอะซิเตท ส่วนผสมถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง 30 นาที แล้วค่าสูงสุดของส่วนผสมโดยวัดที่ 415 nm ใช้สเปค UVeVIS TFC คือแสดงเป็นโลหิตมิลลิกรัมเทียบต่อกรัมสกัดน้ำมัน L. aromatica (mg QCE/g DFLA) 2.5 กิจกรรมสารต้านอนุมูลอิสระ2.5.1. จำนวนอนุมูลมีกำหนดกิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระรวม (แห) ของสารสกัดแห้ง โดยปรับวิธีใช้ Govindarajan et al [15] และ Subhasree et al [16] การแก้ไขเล็กน้อย สังเขป สารสกัดแห้งถูกเจือจาง ด้วยน้ำกลั่น (60e220 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) สารสกัด (0.2 mL) เจือจางถูกแล้วผสมกับ 1.8 mL ของเอเจนต์ (กรด 0.6 เมตร ฟอสเฟตโซเดียม 28 มม. และ 4 มม.แอมโมเนีย molybdate) ในท่อพลาสติกที่ต่อยอด หลอดได้รับการกกในอ่างน้ำที่ 90 C 90 นาที จาก นั้นเย็นลงที่อุณหภูมิห้อง โดยวัดค่าการแก้ปัญหานี้ที่ 695 nm ใช้สเปค UVeVIS กับว่างเปล่า กรดแอสคอร์บิค (5e60 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) ถูกใช้เป็นมาตรฐาน ท่าแสดงเป็นเทียบเท่ากับวิตามินซี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วิธีการ
2.1 วัสดุ
พืชผักแขยงที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ถูกซื้อที่ร้านเวียตนามในไต้หวัน FolineCiocalteu (FC) น้ำยา,
โซเดียมคาร์บอเนตปราศจากกรดแกลลิโซเดียมไนไตรท์โซเดียมไฮดรอกไซอลูมิเนียมคลอไรด์ปราศจาก 2,2-
diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) กรดไตรคลอโร, ปราศจากคลอวิตามินซีและ catechin กำลังซื้อ จาก Sigma-Aldrich GmbH (Sternheim, เยอรมนี) กรดกำมะถันและโพแทสเซียม hexacyanoferrate ที่ได้รับจากเมอร์ค (ดาร์มสตัด, เยอรมนี) ปราศจากโพแทสเซียมฟอสเฟต monobasic ซื้อจากฟิชเชอร์เคมีภัณฑ์ (สนามกลาง, นิวเจอร์ซีย์, สหรัฐอเมริกา) ในขณะที่เมทานอล HPLC เกรดเอทานอลและอะซีโตนถูกจัดทำโดย บริษัท Sigma-Aldrich ( St. Louis, มิสซูรี, สหรัฐอเมริกา).

2.2 การเตรียมตัว
หลังจากรากถูกถอดออกเป็นผักสดแขยงพืช (2 กก.) คือการล้างและแห้ง ตัวอย่างแห้งบดเป็นผงใช้เครื่องโม่และห้องครัวผ่านตะแกรง 60 ตาข่าย ผง (100 กรัม) ได้แล้วโดยใช้โปรตีนจาก N-เฮกเซนเป็นตัวทำละลาย ส่วนผสม solideliquid ถูกกรองด้วยหมายเลข ADVANTEC คุณภาพกระดาษกรอง 2 และสารตกค้างแห้งในเตาอบที่อุณหภูมิ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 6 ชั่วโมง แห้งสกัดลิตร aromatica (DFLA) ถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสก่อนที่จะมีการสกัด.

2.3 การสกัด DFLA
DFLA (30 mg) ผสมกับตัวทำละลาย (1.6 มิลลิลิตร) และส่วนผสมที่ถูกกวนอย่างจริงจังเป็นเวลา 5 นาที ส่วนผสมที่ถูกปั่นแล้ว (13,000g 25? C) เป็นเวลา 20 นาที สารละลายที่ได้รับเป็นความเข้มข้นภายใต้สุญญากาศที่ 45 องศาเซลเซียสและแห้งเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สารสกัดแห้งได้รับการชั่งน้ำหนักในการกำหนดอัตราผลตอบแทนการสกัด สารสกัดแห้งทั้งหมดถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสก่อนที่จะมีการวิเคราะห์.

2.4 การหาปริมาณสารโพลีฟี

2.4.1 เนื้อหาฟีนอลรวม
เนื้อหาฟีนอลรวม (TPC) ในแต่ละสารสกัดถูกกำหนดโดยใช้วิธีการเอฟซีแมคโดนัอธิบายโดย et al, [13] โดยมีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สารสกัดแห้งถูกละลายในน้ำกลั่นกับความเข้มข้น 50 มิลลิกรัม / มล เส้นโค้งการสอบเทียบก่อตั้งขึ้นโดยใช้กรดแกลลิ (0e60 mg / ml) สารสกัดจากกรดเจือจางหรือฝรั่งเศส (1.6 มิลลิลิตร) ถูกเพิ่มเข้ามา 0.2 มลสารเอฟซี (5 เท่าเจือจางด้วยน้ำกลั่น) และผสมให้เข้ากันเป็นเวลา 3 นาที โซเดียมคาร์บอเนต (0.2 มิลลิลิตร 10% w / v) ถูกบันทึกอยู่ในส่วนผสมและส่วนผสมที่ได้รับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ค่าการดูดกลืนของส่วนผสมที่ถูกวัดที่ 760 นาโนเมตรโดยใช้ UVeVIS spectrophotometer
V-550 รุ่น (Jasco โตเกียวประเทศญี่ปุ่น) TPC ถูกแสดงเป็นมิลลิกรัมกรดแกลลิเทียบเท่าต่อกรัมสกัดผักแขยง (MG GAE / g DFLA).

2.4.2 เนื้อหา flavonoid รวม
เนื้อหา flavonoid รวม (TFC) ของแต่ละสารสกัดถูกตรวจสอบโดยใช้วิธีการอลูมิเนียมคลอไรด์ colorimetry
อธิบายโดยช้าง et al, [14] มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ในช่วงสั้น ๆ ตัวอย่างสารสกัดถูกเจือจางด้วยเมทานอลจนถึง 100 mg / ml เส้นโค้งการสอบเทียบที่ถูกจัดทำขึ้นโดยเจือจาง quercetin ในเมทานอล (0e100 mg / ml) สารสกัดเจือจางหรือ quercetin (2.0 มิลลิลิตร) ผสมกับ 0.1 มิลลิลิตร 10% (w / v) การแก้ปัญหาอลูมิเนียมคลอไรด์และ 0.1 มิลลิลิตร 0.1 มิลลิแก้ปัญหาโพแทสเซียมอะซิเตท ส่วนผสมที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที จากนั้นดูดกลืนแสงสูงสุดของส่วนผสมที่ถูกวัดที่ 415 นาโนเมตรโดยใช้ spectrophotometer UVeVIS TFC ถูกแสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่า quercetin ต่อกรัมโปรตีนแอล aromatica (MG QCE / g DFLA).

2.5 ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ
2.5.1 ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระรวม
กิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระรวม (TAA) ของสารสกัดแห้งถูกกำหนดโดยการปรับวิธีการที่ใช้โดย Govindarajan et al, [15] และ Subhasree et al, [16] มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ในช่วงสั้น ๆ สารสกัดแห้งถูกเจือจางด้วยน้ำกลั่น (60e220 mg / ml) สารสกัดเจือจาง (0.2 มิลลิลิตร) ผสมแล้วกับ 1.8 มลสาร (0.6 เมตรกรดกำมะถัน 28 มิลลิโซเดียมฟอสเฟตและ 4 มิลลิแอมโมเนียมโมลิบ) ในหลอดพลาสติกปกคลุม หลอดถูกบ่มในอ่างน้ำที่ 90 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 90 นาทีจากนั้นเย็นลงที่อุณหภูมิห้อง ค่าการดูดกลืนของการแก้ปัญหานี้ได้รับการวัดที่ 695 นาโนเมตรโดยใช้ spectrophotometer UVeVIS กับว่างเปล่า วิตามินซี (5e60 mg / ml) ถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐาน TAA จะแสดงเป็นเทียบเท่ากับวิตามินซี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วิธีการ2.1 . วัสดุการผักแขยงพืชที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ คือ ซื้อที่ร้านเวียดนามในไต้หวัน folineciocalteu ( FC ) รีเอเจนต์โซเดียมคาร์บอเนตแอนไฮดรัส , ฝรั่งเศส กรดโซเดียมไนไตรท์ , โซเดียม ไฮดรอกไซด์ , อลูมิเนียมคลอไรด์รัส , 2 , 2 -diphenyl-1-picrylhydrazyl ( dpph ) , กรดไตรคลอโรอะซิติกเฟอริกคลอไรด์รัส , กรดแอสคอร์บิค และคาเทซิน ซื้อมาจากซิกม่า Aldrich GmbH ( sternheim , เยอรมัน ) กรดซัลฟูริค และโพแทสเซียม hexacyanoferrate ได้รับจากเมอร์ค ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) รัสโพแทสเซียมฟอสเฟต monobasic ซื้อจากชาวประมงสารเคมี ( ยุติธรรมสนามหญ้า , NJ , USA ) ส่วน HPLC เกรดเมทานอล , เอทานอล และอะซิโตนได้จัดโดยซิกม่า Aldrich ( St . Louis , MO , USA )2.2 . ตัวอย่างการเตรียมพอรากออก โรงงาน ผักแขยงสด ( 2 กิโลกรัม ) ซักและทำให้แห้งด้วยความเย็น ตัวอย่างแห้งแช่แข็งพื้นดินเป็นผงใช้ครัวเครื่องมิลลิ่งและผ่านตะแกรง 60 เมช ผง ( 100 กรัม ) แล้วบีบสกัดใช้เป็นตัวทำละลาย ส่วนผสม solideliquid ถูกกรองด้วยกระดาษกรอง ADVANTEC คุณภาพหมายเลข 2 และที่เหลือก็แห้งในเตาอบที่ 50c เป็นเวลา 6 ชั่วโมง สกัดแห้ง . aromatica ( dfla ) คืออุณหภูมิ 4c ก่อนการสกัด2.3 การสกัด dfladfla ( 30 มิลลิกรัม ) ผสมกับตัวทำละลาย ( 1.6 ml ) , และส่วนผสมชะมัดคนเป็นเวลา 5 นาที ผสมแล้ว ( 13000g ระดับ 25 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 20 นาที ที่ได้ถูกนำภายใต้สุญญากาศ และเข้มข้น ที่ข้างถนนแห้งเป็นเวลา 24 ชั่วโมง สารสกัดแห้งแช่แข็งเป็นชั่งน้ำหนักเปรียบเทียบผลผลิตในการสกัด ทั้งหมดแห้งสารสกัดไว้ที่ 4c ก่อนวิเคราะห์ข้อมูล2.4 . การหาปริมาณโพลีฟีนอลเครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . ปริมาณฟีนอลทั้งหมดปริมาณฟีนอลทั้งหมด ( TPC ) ในแต่ละแยกก็ตัดสินใจใช้วิธีการบรรยายโดย ชลบุรี เอฟซี แมคโดนัลด์ et al [ 13 ] , มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สารสกัดแห้งแช่แข็งละลายในน้ำกลั่นให้ความเข้มข้น 50 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ค่าโค้งก่อตั้งขึ้นโดยใช้เพิ่มขึ้น ( 0e60 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) การเจือจางสารสกัดหรือเพิ่มขึ้น ( 1.6 ml ) คือเพิ่ม 0.2 มิลลิลิตร เอฟซี 3 ( ผู้อื่นเจือจางด้วยน้ำกลั่นและผสมอย่างทั่วถึงเป็นเวลา 3 นาที โซเดียม คาร์บอเนต ( 0.2 มิลลิลิตร , 10 % w / v ) คือเพิ่มการผสมและผสมได้รับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง นผสมของวัดที่ 760 nm ใช้ uvevis เตอร์v-550 แบบ ( jasco , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) TPC จะแสดงเป็นมิลลิกรัมเพิ่มขึ้นเท่ากับ 1 กรัม สกัดผักแขยง ( mg / g dfla เก )2.4.2 . ปริมาณฟลาโวนอยด์ทั้งหมดปริมาณฟลาโวนอยด์ ( TFC ) ของแต่ละสารสกัดถูกตรวจสอบโดยใช้วิธีเม็ดอลูมิเนียมคลอไรด์อธิบายโดยชาง et al [ 14 ] กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สรุปได้ว่า สารสกัดด้วยเมทานอลตัวอย่างเจือจางจน 100 มก. / มล. ส่วนรูปโค้งเตรียมโดยเจือจาง เคอร์ซิทินในเมทานอล ( 0e100 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) การเจือจางสารสกัดหรือสารเคอร์ซิทิน ( 2.0 มิลลิลิตร ) ผสมกับ 0.1 มล. 10 % ( w / v ) สารละลายคลอไรด์อลูมิเนียมและ 0.1 มิลลิลิตร 0.1 มิลลิเมตร โปตัสเซียม อะซิเตท โซลูชั่น ส่วนผสมจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 30 นาที แล้วค่าส่วนผสมสูงสุดวัดที่ 415 nm ใช้ uvevis วัสดุ TFC ก็แสดงเป็นมิลลิกรัมสมมูลต่อลิตร aromatica กรัมสกัดเคอร์ ( มิลลิกรัม / กรัม qce dfla )2.5 กิจกรรมของสารต้านอนุมูลอิสระดาวน์โหลด . ต้านอนุมูลอิสระทั้งหมดสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด ( TAA ) ของแห้งสารสกัดถูกกำหนดโดยการปรับใช้วิธี govindarajan et al [ 15 ] และ subhasree et al [ 16 ] กับการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ในบทสรุป , สารสกัดแห้งเจือจางด้วยน้ำกลั่น ( 60e220 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) การเจือจางสารสกัด ( 0.2 มิลลิลิตร ) ผสมกับ 1.8 มิลลิลิตรของรีเอเจนต์ ( 0.6 M กรดซัลฟูริก , 28 มม. และ 4 มม. โซเดียมฟอสเฟตแอมโมเนียมโมลิบเดต ) ในฝาครอบพลาสติกหลอด หลอดมันบ่มในน้ำอาบที่ 90c 90 นาทีแล้วเย็นลงถึงอุณหภูมิห้อง นแนวทางนี้เป็นวัดที่ 695 nm ใช้ uvevis Spectrophotometer กับว่างเปล่า กรดแอสคอร์บิค ( 5e60 mg / ml ) ใช้เป็นมาตรฐาน ถ้าจะแสดงเป็นเทียบเท่าของกรดแอสคอร์บิค