All oligonucleotides were synthesiz

All oligonucleotides were synthesized and purified by Sangon (Shanghai, China) and the sequences were showed in Table 1. All DNA oligonucleotides were diluted by TE buffer (10 mM Tris–HCl and 1.0 mM Na2EDTA, pH 8.0). They were denatured at 95 °C for 5 min naturally cooled down to room temperature before use. The polymerase Klenow fragment exo was purchased from New England Biolabs, Inc. The deoxynucleotide solution mixture (dNTPs) was purchased from TaKaRa Bio Inc. (Dalian, China) and the DMSO was obtained from Sigma. Streptavidin-MNBs (350 nm in diameter, the aqueous suspension containing 0.05% Tween-20, 0.1% bovine serum albumin (BSA) and 10 mM EDTA at a concentration of 3.324 1011 beads mL 1) were obtained from Bangs La- boratories Inc. (Fishers, IN). Grade VII invertase was obtained from baker's yeast (Saccharomyces cerevisiae), Tween-20, sulfosuccini- midyl-4-(N-maleimidomethyl) cyclohexane-1-carboxylate (sulfo- SMCC), Tris (2-carboxyethyl) phosphine hydrochloride (TCEP) and bovine serum albumin (BSA) were purchase from Sigma (St. Louis, MO). Other chemicals were in analytical grade obtained from standard reagent suppliers and used directly. All solutions were prepared with Milli-Q water (resistivity 1⁄4 18 MΩ cm) from a Milli- pore system.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สังเคราะห์ และบริสุทธิ์ โดย Sangon (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) oligonucleotides ทั้งหมด และลำดับที่ได้แสดงในตารางที่ 1 Oligonucleotides ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกทำให้เจือจาง โดยบัฟเฟอร์ TE (ตรี – HCl 10 มม.และ 1.0 mM Na2EDTA ค่า pH 8.0) พวกเขาถูก denatured ที่ 95 ° C สำหรับ 5 นาทีธรรมชาติระบายความร้อนด้วยลงกับอุณหภูมิห้องก่อนใช้ เอกโซพอลิเมอเรส Klenow ส่วนที่ซื้อจาก Biolabs, Inc. ของนิวอิงแลนด์ ผสมโซลูชั่น deoxynucleotide (dNTPs) ถูกซื้อจาก TaKaRa ไบ อิงค์ (ต้าเหลียน จีน) และ DMSO ได้รับจากซิกมา Streptavidin MNBs (350 nm เส้นผ่านศูนย์กลาง การระงับประกอบด้วย% Tween-20 0.05, 0.1% วัว serum albumin (บีเอสเอ) และ 10 mM EDTA ที่ความเข้มข้นของ 3.324 1011 ประคำ mL 1) ได้รับมาจาก Inc. ลา boratories เรียบ (สฟิช IN) Invertase VII เกรดได้รับจากเบเกอร์ของยีสต์ (Saccharomyces cerevisiae), Tween-20, sulfosuccini-midyl-4-(N-maleimidomethyl) cyclohexane-1-carboxylate (sulfo-SMCC), ตรี (2 carboxyethyl) phosphine ไฮโดรคลอไรด์ (TCEP) และวัว serum albumin (บีเอสเอ) ได้ซื้อจากซิก (St. Louis, MO) สารเคมีอื่น ๆ ในเกรดวิเคราะห์ได้จากซัพพลายเออร์รีเอเจนต์มาตรฐาน และใช้โดยตรงได้ โซลูชั่นทั้งหมดได้เตรียมน้ำ Q (ความต้านทาน 1⁄4 18 MΩ เซนติเมตร) จากระบบรูขุมขน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

oligonucleotides ทั้งหมดถูกสังเคราะห์และบริสุทธิ์โดย Sangon (Shanghai, จีน) และลำดับที่ได้แสดงให้เห็นในตารางที่ 1 oligonucleotides ดีเอ็นเอทั้งหมดถูกเจือจางลงด้วยบัฟเฟอร์ TE (10 mM Tris-HCl 1.0 มิลลิเมตร Na2EDTA ค่า pH 8.0) พวกเขาถูกเอทิลแอลกอฮอล์ที่ 95 ° C เป็นเวลา 5 นาทีตามธรรมชาติเย็นลงที่อุณหภูมิห้องก่อนการใช้งาน โพลิเมอร์ Klenow ส่วนนอกซื้อมาจากนิวอิงแลนด์ Biolabs อิงค์ส่วนผสมแก้ปัญหา deoxynucleotide (dNTPs) ซื้อมาจาก TaKaRa ไบโออิงค์ (ต้าเหลียน, จีน) และ DMSO ที่ได้รับจากซิกม่า Streptavidin-MNBs (350 นาโนเมตรในเส้นผ่าศูนย์กลางสารแขวนลอยในน้ำที่มี 0.05% Tween-20, 0.1% ในซีรั่มอัลบูมิวัว (BSA) และ 10 มม EDTA ที่ความเข้มข้น 3.324 1,011 มิลลิลิตรลูกปัด? 1) ที่ได้รับจากผมม้า La- boratories Inc . (ฟิชเชอร์, IN) ชั้นประถมศึกษาปีที่เจ็ดอินเวอร์ที่ได้รับจากยีสต์ขนมปัง (Saccharomyces cerevisiae) Tween-20, sulfosuccini- midyl-4- (N-maleimidomethyl) cyclohexane-1-carboxylate (sulfo- SMCC) Tris (2-carboxyethyl) ไฮโดรคลอไรฟอสฟีน (TCEP) และซีรั่มอัลบูมิวัว (BSA) มีการซื้อจาก Sigma (เซนต์หลุยส์) สารเคมีอื่น ๆ ที่อยู่ในชั้นประถมศึกษาปีที่ได้รับการวิเคราะห์จากผู้ผลิตสารมาตรฐานและใช้โดยตรง โซลูชั่นทั้งหมดถูกจัดทำขึ้นด้วยน้ำพัน-Q (1/4 ความต้านทาน 18 MΩซม.) จากระบบหนึ่งในพันรูขุมขน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทั้งหมดโอลิโกนิวคลีโอไทด์สังเคราะห์บริสุทธิ์โดยแสงอ่อน ( เซี่ยงไฮ้ , จีน ) และลำดับที่ถูกแสดงในตารางที่ 1 โอลิโกนิวคลีโอไทด์ DNA ทั้งหมดถูกเจือจางโดย TE buffer ( 10 มม. ) และบริษัทไอ na2edta 1.0 มม. pH 8.0 ) พวกเขาใช้ที่ 95 องศา C เป็นเวลา 5 นาทีเย็นลงถึงอุณหภูมิปกติก่อนใช้ การใช้เศษ klenow exo ซื้อมาจากอังกฤษ biolabs , Incการขอขมาลาโทษสารละลายผสม ( dntps ) ซื้อมาจากทาคาระ ไบโอ อิงค์ ( Dalian , จีน ) และ DMSO ที่ได้รับจาก Sigma streptavidin mnbs ( 350 nm ในเส้นผ่าศูนย์กลาง , สารละลายแขวนลอยที่มี tween-20 0.05% , 0.1% bovine serum albumin ( BSA ) และ 10 mM EDTA ที่ความเข้มข้น 3.324 คุณลูกปัดมล  1 ) ที่ได้รับจากหน้าม้าลา - boratories อิงค์ ( Fishers ใน )7 . เปรียบเทียบเกรดได้จากเบเกอร์ยีสต์ ( Saccharomyces cerevisiae ) tween-20 sulfosuccini - , midyl-4 - ( n-maleimidomethyl ) cyclohexane-1-carboxylate ( sulfo - smcc ) , ทริส ( 2-carboxyethyl ) ฟอสฟีน ไฮโดรคลอไรด์ ( เกี่ยวกับ ) และอัลบูมิน ( BSA ) ซื้อจาก ซิกม่า ( St . Louis , MO )สารเคมีอื่น ๆอยู่ในเกรดที่ได้จากซัพพลายเออร์ที่ใช้วิเคราะห์มาตรฐานและใช้โดยตรง โซลูชั่นทั้งหมดถูกเตรียม milli-q น้ำ ( ค่าความต้านทาน 1 ⁄ 4 18 M Ωซม. ) จากพัน -
รูขุมขนระบบ