[10]. All culture occurred under sterile
mineral oil (7.5 mL for drop system and 250 mL in a fourwell
system). Dishes containing culture medium were
equilibrated at least 4 hours before adding gametes or
embryos in an incubator at 38.5 C containing 5% CO2, 5%
O2, and approximately 90% N2 in a humidified atmosphere.
For each weekly replicate, 250 (Dairy 1) or 150 (Dairy 2),
Holstein cumulus oocyte complexes (COC) were obtained
from Bomed (Madison, WI, USA). The COC were shipped in
a portable incubator (Minitube, Verona, WI, USA) in oocyte
maturation medium. Upon arrival, the temperature of the
portable incubator was verified to be within 37 C to 39 C.
The vials containing COC were then placed in the laboratory
[10] วัฒนธรรมทั้งหมดที่เกิดขึ้นภายใต้การฆ่าเชื้อ
น้ำมันแร่ (7.5 มิลลิลิตรสำหรับระบบลดลงและ 250 มิลลิลิตรใน fourwell
ระบบ) อาหารที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อถูก
equilibrated อย่างน้อย 4 ชั่วโมงก่อนที่จะเพิ่มเซลล์สืบพันธุ์หรือ
ตัวอ่อนในตู้อบที่ 38.5 องศาเซลเซียสที่มี CO2 5%, 5%
O2 และประมาณ 90% N2 ในบรรยากาศความชื้น.
สำหรับทำซ้ำแต่ละสัปดาห์ 250 (นม 1 ) หรือ 150 (นม 2),
โฮลคอมเพล็กซ์คิวมูลัสเซลล์ (COC) ที่ได้รับ
จาก Bomed (Madison, WI, USA) COC ถูกส่งใน
ศูนย์บ่มเพาะแบบพกพา (Minitube, เวโรนา, WI, สหรัฐอเมริกา) ในเซลล์ไข่
สุกปานกลาง เมื่อมาถึงอุณหภูมิของ
ศูนย์บ่มเพาะแบบพกพาที่ได้รับการตรวจสอบให้อยู่ใน 37? C ถึง 39? C.
ขวดที่มี COC ถูกวางไว้แล้วในห้องปฏิบัติการ
การแปล กรุณารอสักครู่..
[ 10 ] ทั้งหมดเกิดขึ้นภายใต้วัฒนธรรมน้ำมันเป็นหมัน
( 7.5 ml 250 มิลลิลิตร ลงในระบบ และระบบ fourwell
) อาหารที่ประกอบด้วยอาหารเพาะเลี้ยงอยู่
equilibrated อย่างน้อย 4 ชั่วโมงก่อนการเพิ่ม gametes หรือ
ตัวในตู้อบที่ 38.5 C ที่มี CO2 5 % , 5 %
O2 และประมาณ 90 % N2 ใน humidified บรรยากาศ .
สำหรับแต่ละสัปดาห์ทำซ้ำ , 250 ( นม 1 ) หรือ 150 ( นม ) 2
,นอกจากนี้สารประกอบเชิงซ้อนที่มีไข่ ( COC ) ที่ได้รับจาก bomed
( Madison , WI , USA ) ที่ก๊กถูกจัดส่งในการบ่มเพาะแบบพกพา ( minitube , Verona , WI , USA ) ในไข่
สุกปานกลาง เมื่อมาถึง อุณหภูมิของตู้อบแบบพกพา
ยืนยันที่จะภายใน 37 C 39 C .
หลอดที่มีก๊กถูกวางไว้แล้วในห้องปฏิบัติการ
การแปล กรุณารอสักครู่..