Metabolite analysis of KA19Sideroph

Metabolite analysis of KA19
Siderophore production assay
Siderophore production of antagonists was assessed under
iron deprivation, at 30C for 72 h. To achieve iron deprivation,
all media and glassware were treated according to
Cox (1994). Chrome azurol S (CAS) medium was prepared
according to Schwyn and Neilands (1987). The cell free
supernatant (0.5 ll) of each strain was obtained after
centrifugation of exponential phase culture at 10,0009g for
30 min followed by filter sterilization (0.22 l, Millipore).
This supernatant was inoculated on overlay chrome azurol
S (O-CAS) medium plates and incubated for 48 h to
observe the colour change (from blue green media colour
to orange haloes). The overlay medium was as follows:
CAS 60.5 mg, hexadecyltrimethyl ammonium bromide
(HDTMA) 72.9 mg, Piperazine-1, 4-bis (2-ethanesulfonic
acid) (PIPES) 30.24 g, and 1 mM FeCl3.6H2O in 10 ml
HCl of 10 mM. Agarose (0.9%, w/v) was used as gelling
agent. The 30 ml overlay of this medium was applied over
the plates containing cultivated microorganisms to be tested
for siderophore production. After a maximum period of
15 min, a change in colour was observed in the overlaid
medium. The amount of siderophores excreted into the
culture medium was determined from the bacteria-free
supernatant. Concentration was calculated using absorption
maximum and the molar absorption coefficient (kmax =
400 nm and e = 20,000 M-1 cm-1
) according to the
method of Meyer and Abdallah (1978). The M9 minimal
salts (minimal media, Sigma) containing 1% different
carbon sources and varying concentration of Fe (III) were
used to optimize siderophore production.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิเคราะห์ metabolite ของ KA19
siderophore การผลิตการทดสอบ
การผลิต siderophore คู่อริได้รับการประเมินภายใต้
การกีดกันเหล็กที่ 30C เป็นเวลา 72 ชั่วโมง เพื่อให้เกิดการกีดกันเหล็ก
ทุกสื่อและแก้วได้รับการรักษาตาม
ค็อกซ์ (1994) โครเมี่ยม azurol S (CAS) กลางถูกจัดทำขึ้น
ตาม Schwyn และ Neilands (1987) เซลล์ฟรี
ใส (0.5 LL) ของแต่ละสายพันธุ์ที่ได้รับหลังจาก
การหมุนเหวี่ยงของวัฒนธรรมเฟสชี้แจงที่ 10,0009g สำหรับ
30 นาทีตามด้วยการกรองฆ่าเชื้อ (0.22 ลิตรร์ค).
สารละลายเชื้อนี้ถูกซ้อนทับบนโครเมี่ยม azurol
S (O-CAS ) แผ่นขนาดกลางและบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงในการ
สังเกตการเปลี่ยนสี (จากสีเขียวสีน้ำเงินสีสื่อ
เพื่อชมพูสีส้ม) สื่อซ้อนทับได้ดังนี้
CAS 60.5 มิลลิกรัม hexadecyltrimethyl แอมโมเนียมโบรไมด์
(HDTMA) 72.9 มิลลิกรัม Piperazine-1, 4-Bis (2-ethanesulfonic
Acid) (ท่อ) 30.24 กรัมและ 1 มิลลิ FeCl3.6H2O ใน 10 มล.
HCl ของ 10 มิลลิ Agarose (0.9% w / v) ถูกใช้เป็น gelling
ตัวแทน ซ้อนทับ 30 มล. ของกลางนี้ได้ถูกนำมาใช้
แผ่นที่มีจุลินทรีย์ที่เพาะปลูกได้รับการทดสอบ
สำหรับการผลิต siderophore หลังจากระยะเวลาสูงสุด
15 นาทีการเปลี่ยนแปลงในสีพบว่าในบุ
กลาง ปริมาณของ siderophores ขับออกมาลงใน
อาหารเลี้ยงเชื้อถูกกำหนดจากแบคทีเรียฟรี
ใส ความเข้มข้นที่คำนวณโดยใช้การดูดซึม
สูงสุดและค่าสัมประสิทธิ์การดูดซึมกราม (kmax =
400 นาโนเมตรและ e = 20,000 M-1 ซม-1
) เป็นไปตาม
วิธีการของเมเยอร์และ Abdallah (1978) M9 น้อยที่สุด
เกลือ (Media น้อยซิกม่า) ที่มี 1% ที่แตกต่างกัน
แหล่งที่มาที่แตกต่างกันคาร์บอนไดออกไซด์และความเข้มข้นของ Fe (III) ถูก
นำมาใช้เพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการผลิต siderophore

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ต้นตอของ ka19ทดสอบการผลิตไซเดอโรฟอร์ผลิตไซเดอโรฟอร์ปฏิปักษ์และภายใต้การขาดเหล็ก ใน 72 ชั่วโมง เพื่อให้บรรลุการ 30C สำหรับเหล็กสื่อไทยได้รับการรักษาตามค็อกซ์ ( 1994 ) โครเมี่ยม azurol S ( CAS ) กลางเตรียมตาม schwyn และ neilands ( 1987 ) เซลล์ฟรีน่าน ( 0.5 จะ ) ของแต่ละสายพันธุ์ได้ หลังจาก3 เฟสใน 100009g สำหรับวัฒนธรรมของเลขชี้กำลัง30 นาที ตามด้วยน้ำกรอง ( 0.22 มิลลิลิตร )สูงนี้เป็นเชื้อที่ซ้อนทับ azurol โครเมี่ยม( o-cas ) จานขนาดกลาง และบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อสังเกตการเปลี่ยนสีจากสีฟ้าสีเขียวสีสื่อเพื่อ haloes สีส้ม ) การซ้อนทับกลางนั้นมีดังนี้CAS 60.5 มิลลิกรัม hexadecyltrimethyl แอมโมเนียมโบรไมด์( hdtma ) ส่วนใหญ่ piperazine-1 4-bis ( 2-ethanesulfonic , มิลลิกรัมกรด ) ( ท่อ ) 30.24 กรัมและ 1 มม. fecl3.6h2o 10 มล.HCl 10 มิลลิเมตร โรส ( 0.9% w / v ) ที่ถูกใช้เป็น gellingตัวแทน 30 ml ซ้อนทับของสื่อนี้คือใช้มากกว่าจานที่มีการปลูกเชื้อจุลินทรีย์ที่จะทดสอบเพื่อผลิตไซเดอโรฟอร์ . หลังจากระยะเวลาสูงสุด15 นาที ในการเปลี่ยนสีที่พบในบุปานกลาง ปริมาณของไซขับเข้าไปสื่อวัฒนธรรมถูกกำหนดจากแบคทีเรียฟรีน่าน . สมาธิคือคำนวณโดยใช้การดูดซึมสูงสุด และสัมประสิทธิ์การดูดกลืนโมลาร์ ( kmax =400 nm และ E = 20 , 000 M - 1 cm-1) ไปตามวิธีของเมเยอร์และ Abdallah ( 1978 ) แปลง M9 น้อยที่สุดเกลือ ( สื่อ , Sigma น้อยที่สุด ) ที่ประกอบด้วย 1% ที่แตกต่างกันแหล่งคาร์บอนและแปรปริมาณ Fe ( III ) คือใช้ในการเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตไซเดอโรฟอร์ .