2.3. Culture maintenance and inocul

2.3. Culture maintenance and inoculum preparation
The stock of C. acetobutylicum was maintained as spores at
20 C in Elliker broth (BD DifcoTM) supplemented with 20% (v/v)
of glycerol. The spores were revived by inoculating one loop of
the spore suspension in the Reinforced Clostridial HiVegTM Broth
(HiMedia Laboratories, India) and anaerobically incubated for
24 h at 36 C. The inoculum was prepared by transferring 1 mL of
actively growing culture into 50 mL of P2 medium supplemented
with 10 g/L of glucose in a 100 mL screw-capped Pyrex bottle
and anaerobically incubated for 24 h. The P2 medium formula
was as follows (g/L): KH2PO4, 0.5; K2HPO4, 0.5; MgSO47H2O, 0.2;
FeSO47H2O, 0.01; MnSO4H2O, 0.01; NaCl, 0.01; ammonium acetate,
2.2; yeast extract, 1.0.
2.4. Enzymatic hydrolysis of paper mill sludge
Enzymatic hydrolysis was performed to estimate the digestibility
of de-ashed paper mill sludge. The experiment was carried out
in batch mode using 125 mL Erlenmeyer flasks for 120 h under
50 C and 150 rpm. Sodium citrate (0.05 M, pH 4.8) was used as
buffer and 0.01% (w/v) of sodium azide was used as biocide to prevent
microbial contamination. To assess the effect of ash content
on enzymatic hydrolysis, the de-ashed paper mill sludge (4% glucan)
was hydrolyzed with cellulases under an enzyme loading of
10 FPU/g glucan.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3. วัฒนธรรมเตรียม inoculum และบำรุงรักษาหุ้นของ C. acetobutylicum ถูกเก็บรักษาเป็นเพาะเฟิร์นที่20 C ในซุป Elliker (BD DifcoTM) เสริม ด้วย 20% (v/v)ของกลีเซอร มีฟื้นฟูการเพาะเฟิร์น โดย inoculating วนหนึ่งของการระงับสปอร์ใน HiVegTM ซุป Clostridial ที่เสริม(ห้องปฏิบัติการ HiMedia อินเดีย) และ incubated anaerobically ใน24 ชมที่ 36 เซลเซียส Inoculum ถูกเตรียม ด้วยการโอนย้าย 1 mL ของกำลังเติบโตวัฒนธรรม 50 mL ของ p 2 สื่อเสริมกับ 10 g/L ของกลูโคสใน 100 mL ปรบมือสกรู Pyrex ขวดและ incubated anaerobically ใน 24 ชม สูตรปานกลาง p 2มีดังนี้ (บัญชี): KH2PO4, 0.5 K2HPO4, 0.5 MgSO4 7H2O, 0.2FeSO4 7H2O, 0.01 H2O MnSO4, 0.01 NaCl, 0.01 acetate แอมโมเนีย2.2 สารสกัดจากยีสต์ 1.02.4. เอนไซม์ในระบบไฮโตรไลซ์ของตะกอนโรงงานผลิตกระดาษดำเนินการประเมิน digestibility ที่ไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบของเด ashed กระดาษสีตะกอน ทดลองดำเนินได้ในโหมดชุดงานใช้น้ำ 125 mL Erlenmeyer 120 h ภายใต้50 C และ 150 รอบต่อนาที โซเดียมซิเตรต (0.05 M, pH 4.8) ถูกใช้เป็นบัฟเฟอร์และ 0.01% (w/v) ของโซเดียม azide ใช้เป็น biocide เพื่อป้องกันปนเปื้อนของจุลินทรีย์ การประเมินผลของเถ้าเนื้อหาในไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบ กระดาษเด ashed โรงสีตะกอน (4% glucan)ถูก hydrolyzed กับ cellulases ภายใต้การโหลดมีเอนไซม์ของGlucan FPU/g 10

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การบำรุงรักษาวัฒนธรรมและการเตรียมหัวเชื้อหุ้นของซี acetobutylicum ที่ได้รับยังคงเป็นสปอร์ที่? 20? C ในน้ำซุป Elliker (BD DifcoTM) เสริมด้วย 20% (v / v) กลีเซอรอล สปอร์ได้รับการฉีดวัคซีนฟื้นขึ้นมาหนึ่งวงของการระงับสปอร์ในเสริม Clostridial HiVegTM น้ำซุป (HIMEDIA ห้องปฏิบัติการ, อินเดีย) และบ่มแบบไม่ใช้อากาศสำหรับ24 ชั่วโมงที่ 36 องศาเซลเซียส เชื้อถูกจัดทำขึ้นโดยการโอน 1 มิลลิลิตรของวัฒนธรรมที่เติบโตอย่างแข็งขันลงใน50 มิลลิลิตร P2 สื่อเสริมที่มี10 กรัม / ลิตรของน้ำตาลกลูโคสในขวด Pyrex กรูปกคลุม 100 มิลลิลิตรและบ่มแบบไม่ใช้อากาศเป็นเวลา24 ชั่วโมง สูตรกลาง P2 มีดังนี้ (g / L): KH2PO4, 0.5; K2HPO4, 0.5; ? MgSO4 7H2O 0.2;? FeSO4 7H2O 0.01; ? MnSO4 H2O, 0.01; โซเดียมคลอไรด์, 0.01; แอมโมเนียมอะซิเตท, 2.2; สารสกัดจากยีสต์ 1.0. 2.4 เอนไซม์ย่อยสลายกากตะกอนของโรงงานกระดาษย่อยโปรตีนได้ดำเนินการในการประเมินการย่อยตะกอนโรงงานกระดาษde-ashed การทดลองดำเนินการในโหมดแบทช์โดยใช้ 125 มิลลิลิตรขวด Erlenmeyer 120 ชั่วโมงภายใต้ 50 องศาเซลเซียสและ 150 รอบต่อนาที โซเดียมซิเตรต (0.05 M ค่า pH 4.8) ถูกใช้เป็นกันชนและ0.01% (w / v) ของโซเดียมเอไซด์ที่ใช้เป็นไบโอไซด์เพื่อป้องกันการปนเปื้อนของเชื้อจุลินทรีย์ เพื่อประเมินผลกระทบของปริมาณเถ้าในย่อยโปรตีนในตะกอนโรงงานกระดาษ de-ashed (กลูแคน 4%) ได้รับการไฮโดรไลซ์ที่มีเซลลูภายใต้การโหลดเอนไซม์10 FPU / g กลูแคน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 รักษาวัฒนธรรม และการเตรียมเชื้อ C .
acetobutylicum หุ้นยังคงเป็นสปอร์ที่
 20  C น้ำ elliker ( BD difcotm ) เสริมด้วย 20 เปอร์เซ็นต์ ( v / v )
รอล . สปอร์ถูก revived โดยการฉีดวัคซีนหนึ่งของห่วง
สปอร์ระงับในเสริม clostridial hivegtm ซุป
( himedia ห้องปฏิบัติการ , อินเดีย ) และพ บ่มให้
24 ชั่วโมง 36  Cเชื้อที่เตรียมโดยการโอน 1 มล.
อย่างแข็งขันเติบโตวัฒนธรรมเป็น 50 มิลลิลิตร P2
กับ MS 10 กรัมต่อลิตรและกลูโคสใน 100 ml ขวดและสกรูฝาครอบ
Pyrex พบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ที่ P2
สูตรเป็นดังนี้ ( กรัม / ลิตร ) kh2po4 k2hpo4 0.5 , 0.5 ; ; MgSO4 ใ  7h2o 0.2 ;
feso4  7h2o 0.01 ; mnso4  H2O , 0.01 ; NaCl 0.01 ; แอมโมเนียมอะซิเตท ,
2 ; สารสกัดจากยีสต์ , 1.0 .
2.4 .เอนไซม์ย่อยสลายของกระดาษกาก
เอนไซม์ได้ประมาณการค่าการย่อยได้ของ Ashed
กากตะกอนโรงงานกระดาษ ทำการทดลอง
ในโหมดแบทช์โดยใช้ 125 มล. เออร์เลนเมเยอร์ขวด 120 ชั่วโมง ภายใต้  C
50 และ 150 รอบต่อนาที โซเดียมซิเตรท ( 0.05 M pH 4.8 ) ใช้
บัฟเฟอร์และ 0.01 % ( w / v ) ของโซเดียมไซด์ถูกใช้เป็น biocide ป้องกัน
การปนเปื้อนของจุลินทรีย์เพื่อศึกษาผลของปริมาณเถ้า
ในเอนไซม์ , de Ashed กากตะกอนโรงงานกระดาษ ( 4% กลูแคน )
ถูกไฮโดรไลซ์ด้วยเอนไซม์ได้ภายใต้โหลด
10 FPU / กรัมกลูแคน .