HPLC analysis was performed on an Agilent 1260 series HPLC system. The analytes were isolated on an Agilent Eclipse plus C18 column (250 mm×4.6 mm i.d, 5 μm). The separation process followed a gradient elution procedure and used mobile phase A (0.4‰ ammonium acetate aqueous, pH 6.0 adjusted by glacial acetic acid) and B (acetonitrile) whose ratios changed linearly as follows: 0–25 min, 17–19% B; 25–55 min, 19% B; 55–70 min, 19–25% B; 70–80 min, 25–28% B; 80–95 min, 28–34% B; 95–120 min, 34–35% B; 120–140 min, 35–42% B; 140–160 min, 42–50% B. The flow rate was 1.0 mL/min. The injection volume was 5 μL and the column temperature was 30 °C. Quantitative detection wavelength was set, respectively, at 254 nm (xanthotoxin, bergapten, imperatorin and isoimperatorin), 270 nm (berberine), 280 nm (protopine and tetrahydropalmatine) or 345 nm (jatrorrhizine, coptisine and palmatine), while the wavelength of FA was set at 280 nm.
The above HPLC system was interfaced with an Agilent 6460 Triple Quadrupole mass spectrometer (Agilent Technologies, MA, USA) in a post-column splitting ratio of 4:1. The conditions of ESI source were as follows: source voltage, 3000 V; drying gas (N2) flow rate, 10.0 L/min; drying gas temperature, 320 °C; nebulizer, 25 psi. The MS data were acquired from m/z 100 to 1000 in positive ion modes.
วิเคราะห์ HPLC ที่ดำเนินการชุด Agilent 1260 ระบบ HPLC Analytes ถูกแยกต่างหากบนคอลัมน์ที่มีคราส Agilent บวก C18 (250 มม. × 4. i.d 6 mm, 5 μm) กระบวนการแยกที่ไปมาแล้วตอนไล่ระดับ elution และโทรศัพท์มือถือใช้ระยะ (0.4‰ แอมโมเนีย acetate อควี pH 6.0 ปรับกรดอะซิติกน้ำแข็ง) และ B (acetonitrile) มีอัตราส่วนการเปลี่ยนแปลงเชิงเส้นดัง: 0 – 25 นาที 17-19% B 25 – 55 นาที 19% B 55 – 70 นาที 19 – 25% B นาที 70 – 80, 25 – 28% B นาที 80 – 95, 28 – 34% B 95 – 120 นาที 34 – 35% B 120 – 140 นาที 35 – 42% B 140-160 นาที 42 – 50% เกิด 1.0 mL/min อัตราการไหลได้ ปริมาณฉีดได้ 5 μL และคอลัมน์อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส ความยาวคลื่นในการตรวจสอบเชิงปริมาณมีการตั้งค่า ตามลำดับ ที่ 254 nm (xanthotoxin, bergapten, imperatorin และ isoimperatorin), 270 nm (berberine), 280 nm (protopine และ tetrahydropalmatine) หรือ 345 nm (jatrorrhizine, coptisine และ palmatine), ในขณะที่ความยาวคลื่นของ FA ตั้งที่ 280 nm
ระบบ HPLC ข้างถูก interfaced กับการ Agilent 6460 ทริ Quadrupole โดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ (Agilent เทคโนโลยี MA, USA) ในอัตราส่วนแยกคอลัมน์หลัง 4:1 เงื่อนไขของ ESI แหล่งมีดังนี้: แหล่งแรงดัน 3000 V แห้งอัตราการไหลก๊าซ (N2) 10.0 L/min การอบแก๊สอุณหภูมิ 320 ° C ฝอยละออง 25 psi ข้อมูล MS ได้รับมาจาก m/z 100 ถึง 1000 ในโหมดไอออนบวก
การแปล กรุณารอสักครู่..

การวิเคราะห์ HPLC ได้รับการดำเนินการในระบบชุด HPLC Agilent 1260 วิเคราะห์ถูกแยกในคอลัมน์ Agilent คราสบวก C18 (250 มิลลิเมตร× 4.6 มม id, 5 ไมครอน) กระบวนการแยกตามขั้นตอนชะลาดและใช้เฟสเคลื่อนที่ (0.4 ‰แอมโมเนียมอะซิเตทในน้ำมีค่า pH 6.0 ปรับด้วยกรดอะซิติกน้ำแข็ง) และ B (acetonitrile) ที่มีอัตราส่วนการเปลี่ยนเส้นตรงดังนี้ 0-25 นาที, 17-19% B ; 25-55 นาที, 19% B; 55-70 นาที, 19-25% B; 70-80 นาที, 25-28% B; 80-95 นาที, 28-34% B; 95-120 นาที, 34-35% B; 120-140 นาที, 35-42% B; 140-160 นาที, 42-50% B. อัตราการไหลเป็น 1.0 มิลลิลิตร / นาที ปริมาณการฉีดที่ 5 ไมโครลิตรและอุณหภูมิคอลัมน์เป็น 30 องศาเซลเซียส ความยาวคลื่นการตรวจสอบเชิงปริมาณเป็นที่ตั้งตามลำดับที่ 254 นาโนเมตร (xanthotoxin, bergapten imperatorin และ isoimperatorin), 270 นาโนเมตร (berberine), 280 นาโนเมตร (protopine และ tetrahydropalmatine) หรือ 345 นาโนเมตร (jatrorrhizine coptisine และ palmatine) ในขณะที่ความยาวคลื่นของเอฟเอ ตั้งอยู่ที่ 280 นาโนเมตรระบบ HPLC ดังกล่าวข้างต้นได้รับการเชื่อมต่อกับ Agilent 6460 Triple Quadrupole สเปกโตรมิเตอร์มวล (Agilent Technologies, MA, USA) ในอัตราส่วนที่แยกการโพสต์คอลัมน์ของ 4: 1 เงื่อนไขของแหล่งที่มาของ ESI มีดังนี้แรงดันไฟฟ้าที่มา, 3000 V; ก๊าซแห้ง (N2) อัตราการไหล 10.0 ลิตร / นาที; อุณหภูมิก๊าซแห้ง 320 ° C; nebulizer, 25 psi ข้อมูล MS ได้มาจากม / ซี 100-1000 ในโหมดไอออนบวก
การแปล กรุณารอสักครู่..

การวิเคราะห์ HPLC มีการปฏิบัติในด้าน HPLC 1260 ชุดระบบ การแยกสารในด้านคราสพลัสคอลัมน์ C18 250 มม. × 4.6 มม. i.d 5 μ M ) กระบวนการแยกตามชนิดการขั้นตอนและใช้เฟสเคลื่อนที่ ( 0.4 ‰แอมโมเนียมอะซิเตทโดยปรับพีเอช 6.0 โดยกรดแอซีติก ) และ B ( ไน ) ที่มีอัตราส่วนการเปลี่ยนค่าความต้านทาน ดังนี้ 0 - 25 นาที17 – 19 % B ; 25 – 55 นาที 19 % B ; 55 – 70 นาทีที่ 19 – 25 % B ; 70 – 80 นาทีที่ 25 - 28 % B ; 80 - 95 นาที , 28 และ 34 % B ; 95 – 120 นาที , 34 และ 35 % B ; 120 - 140 นาที 35 - 42 % B ; 140 - 160 นาที 42 – 50 % B . อัตราการไหลเท่ากับ 1.0 มล. / นาที ฉีดปริมาณ 5 μ L และคอลัมน์มีอุณหภูมิ 30 องศา ปริมาณการกำหนดความยาวคลื่น 254 nm ( ตามลำดับที่ xanthotoxin เบอแกบเทิน , มะตูม , และ isoimperatorin )270 nm ( โปรแกรม ) , 280 nm ( protopine และ tetrahydropalmatine ) หรือ 345 nm ( jatrorrhizine coptisine , และ palmatine ) ในขณะที่ความยาวคลื่นของฟ้าไว้ที่ 280 nm .
ระบบ HPLC เหนือติดต่อกับเลนต์ 6460 สามสี่ขั้วแมสสเปกโตรมิเตอร์ ( Agilent Technologies , MA , USA ) ในคอลัมน์แยก โพสต์ อัตราส่วน 4 : 1 . เงื่อนไขของแหล่งของ ESI ดังนี้แหล่งจ่ายแรงดัน 3000 v ;การอบแห้ง ( 2 ) อัตราการไหลของแก๊ส , 10.0 ลิตร / นาที อุณหภูมิก๊าซแห้ง , 320 องศา C ; nebulizer 25 psi . MS ข้อมูลได้มาจาก M / Z 100 , 000 ในโหมดอิออนบวก
การแปล กรุณารอสักครู่..
