University, Khon Kaen, Thailand. Th

University, Khon Kaen, Thailand. The identity of each bacterial strain was confirmed
using the API 20 Strep test kit (bioMérieux Industry, Hazelwood, MO, USA). The
bacterial culture was grown in brain heart infusion (BHI) medium at 25 °C, and a stock
of the organism was stored at −80 °C in BHI broth supplemented with 15% glycerol.
Plant materials and preparation of herb extracts The herbs used were: Allium
sativum L. (garlic), A. paniculata (Burm. f.) Wall. ex Nees (Acanthaceae) (The
Creat), Cassia alata L. (Leguminosae) (candlebrush), Garcinia mangostana (Linn.)
(mangosteen), P. guajava L. (Myrtaceae) (guava), and Streblus asper Lour. (Moraceae)
(tooth brush tree). All were purchased from herb shops in Bangkok, Thailand. Bulbs of
A. sativum, peels of G. mangostana, and leaves of the other herbs were used for
preparation of herb extracts. Three different solvents, distilled water, 95% ethanol, and
methanol (99.8% purity), were used to prepare extracts from each herb. In each case,
the herb was oven-dried at 80 °C for 72 h, finely ground in a mortar, and extracted with
solvent in a ratio of 1:10 (w/v) for 24 h at room temperature. The mixture was then
centrifuged at 13,000 rpm for 10 min at room temperature and the supernatant
collected for filtration. For aqueous extracts, the filtrates were frozen at −80 °C for 48 h
before being freeze-dried. For the other extracts, the filtrates were evaporated to
dryness in a rotary evaporator before being frozen at −80 °C for 48 h prior to being
freeze-dried. All extracts were stored at −20 °C in glass vials until use. For antimicrobial
activity testing and determination of minimal inhibitory concentration (MIC), the
concentration of each herb extract was adjusted to 10 mg (dry weight)/mL.
Antimicrobial activity testing Antimicrobial activities of the herb extracts
against S. agalactiae were examined using a swab paper disc method with some
modifications. Forty microliters of each herb extract were spotted on a sterile paper disc
(Schleicher and Schuell BioScience, Keene, NH, USA), placed onto a BHI agar plate,
spread with a swab of overnight culture containing colony forming units (CFU) of S.
agalactiae (approximately 108
/mL). Each extract was tested in triplicate. Negative
controls were prepared in the same way except that 40 μl of pure solvents were used
instead of the herb extracts. Oxytetracycline (5 μg on sterile paper disc), a common
antibiotic used in tilapia aquaculture in Thailand, served as the positive control. The
prepared agar plates were then incubated at 25 °C for 18 h, and their growth inhibition
zones were same as the total diameter of the growth-free zones around the discs. The
diameter of the growth inhibition zone in the negative control treatment was
subtracted (in case of no growth inhibition in the negative control treatment, only
the diameter of the disc was subtracted) giving the zones of growth inhibition beyond
the paper disc.
Determination of MIC To determine the MIC of the herb extracts against S.
agalactiae, two-fold serial dilution of each extract was prepared using sterile distilled
water as the diluent. Five hundred microliters of each dilution was then added to 4.5 mL
of S. agalactiae culture (approximately 103 CFU/mL). As a control, sterile distilled water
was used instead of the herb extract. After incubation at 25 °C for 18 h the growth of the
bacteria was examined. The MIC was calculated as the lowest concentration of the herb
extract that resulted in the absence of visually detectable growth. Each MIC was
determined from three experiments. The herb extracts with the MIC values of 500 μg/
mL or more, 250 μg/mL and 125 μg/mL or less were declared to have weak, moderate
and strong antimicrobial activities, respectively.
Fish preparation Nile tilapia (O. niloticus) of mixed sexes were obtained from
the Nong Khon Farm (Ubon Ratchatnai, Thailand). To reduce stress induced by
environmental changes on fish, they were maintained in 150 L [Remark 6] plastic
tanks at 25 °C, under a 12 h light:12 h dark photoperiod, and fed commercial fish
feed (C. P. Classic; S. W. T. Co., Ltd., Bangkok, Thailand) for 2 weeks prior to the
experiments. Just before the experiments, fish were randomly selected and tested for
presence of bacteria in their livers and kidneys on BHI agar.
All experiments were conducted in 45 L aquaria. Fish weighing 10± 1 g were placed
in the aquaria (10 fish per aquarium) 24 h prior to the experiments. Feed was supplied
twice daily at a rate of 5% of fish body weight per day. On the day of stocking, the fish
were fed the aforementioned commercial fish feed. Subsequently, the fish were fed
prepared supplemented feeds (see Preparation of fish feeds). Aquaria were cleaned
daily by siphoning off two-thirds of the water and replacing it with fresh water.
Water quality parameters were monitored daily. Dissolved oxygen levels and
temperatures were measured using a YSI 85 oxygen, conductivity, salinity, and
temperature meter (Yellow Spr

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มหาวิทยาลัย ขอนแก่น ไทย ได้รับการยืนยันตัวตนของแต่ละสายพันธุ์เชื้อแบคทีเรียใช้ชุดทดสอบ API 20 Strep (bioMérieux อุตสาหกรรม Hazelwood, MO สหรัฐอเมริกา) การวัฒนธรรมจากแบคทีเรียถูกปลูกในสมองหัวใจคอนกรีต (BHI) ที่ 25 ° C และหุ้นของสิ่งมีชีวิตที่ถูกเก็บไว้ที่ −80 ° C ใน BHI ซุปเสริม ด้วยกลีเซอรอล 15%พืชวัตถุดิบและการเตรียมสารสกัดจากสมุนไพรซึ่งมีสมุนไพรที่ใช้: Alliumsativum L. (กระเทียม), A. โจร (Burm. f) ผนัง เช่น Nees (วงศ์เหงือกปลาหมอ) (Creat), ใบหม่อน L. (Leguminosae) (candlebrush), (มังคุด)(มังคุด), P. guajava L. วงศ์ (ชมพู่) (ฝรั่ง), และ Streblus asper ร้าน (Moraceae)(ต้นไม้แปรงฟัน) ทั้งหมดซื้อมาจากร้านค้าสมุนไพรในกรุงเทพฯ ประเทศไทย หลอดไฟก. sativum เปลือกของ G. mangostana และใบของสมุนไพรอื่น ๆ ใช้สำหรับการเตรียมสารสกัดจากสมุนไพร 3 แตกตัวทำละลาย น้ำกลั่น เอทานอล 95% และเมทานอล (ความบริสุทธิ์ 99.8%), ถูกใช้ในการเตรียมสารสกัดจากสมุนไพรแต่ละ ในแต่ละกรณีสมุนไพรถูกเตาอบแห้งที่อุณหภูมิ 80 ° C สำหรับ 72 ชั่วโมง ละเอียดบดในครก และสกัดด้วยตัวทำละลายในอัตราส่วน 1:10 (w/v) สำหรับ 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ส่วนผสมได้แล้วเหวี่ยงที่ 13,000 รอบต่อนาที 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องและ supernatantรวบรวมสำหรับกรอง สำหรับสารละลายสารสกัด filtrates ถูกแช่แข็งที่ −80 ° C สำหรับ 48hก่อนเป็นชนิดแห้ง สำหรับสารสกัดอื่น ๆ การ filtrates ได้ระเหยไปความแห้งกร้านในระเหยโรตารี่ก่อนการแช่แข็งที่ −80 ° C สำหรับ 48 ชั่วโมงก่อนการชนิดแห้ง สารสกัดจากทั้งหมดถูกเก็บไว้ที่ −20 ° C ในขวดแก้วจนถึงใช้ สำหรับสารต้านจุลชีพกิจกรรมการทดสอบและการกำหนดความเข้มข้น inhibitory น้อยที่สุด (ไมโครโฟน), การปรับปรุงความเข้มข้นของสารสกัดจากสมุนไพรแต่ละถึง 10 มิลลิกรัม (น้ำหนักแห้ง) / mLต้านจุลชีพกิจกรรมทดสอบกิจกรรมต้านจุลชีพของสมุนไพรสารสกัดจากกับ S. agalactiae ถูกตรวจสอบโดยใช้วิธีการดิสก์กระดาษเช็ดล้างบางการปรับเปลี่ยน Microliters สี่สิบของสารสกัดสมุนไพรแต่ละถูกพบบนแผ่นกระดาษที่ผ่านการฆ่าเชื้อ(Schleicher และวิทยาศาสตร์ชีวภาพ Schuell เคนน์ NH สหรัฐอเมริกา), วางลงบนจานอาหาร BHIแพร่กระจาย ด้วยสำลีก้านของคืนที่ประกอบด้วยอาณานิคมสร้างหน่วย (อาหรับ) ของเอสagalactiae (ประมาณ 108/ มิลลิลิตร) ทดสอบสารสกัดแต่ละลข้อ ค่าลบมีเตรียมการควบคุมเหมือนกันยกเว้นว่าใช้ μl 40 ของตัวทำละลายบริสุทธิ์แทนสารสกัดสมุนไพร ออกซิเตตราไซคลีน (5 ไมโครกรัมในแผ่นดิสก์กระดาษปลอดเชื้อ) ส่วนยาปฏิชีวนะที่ใช้ในการเลี้ยงปลานิลในประเทศไทย เป็นการควบคุมเชิงบวก การเตรียมอาหารจานแล้วได้รับการกกที่ 25 ° C สำหรับ 18 h และยับยั้งการเจริญเติบโตโซนได้เหมือนเส้นผ่าศูนย์กลางรวมของโซนฟรีเติบโตรอบ ๆ แผ่น การเส้นผ่าศูนย์กลางของโซนยับยั้งการเจริญเติบโตในการรักษาควบคุมค่าลบได้ลบ (กรณีไม่ยับยั้งการเจริญเติบโตในการลบควบคุมรักษา เท่านั้นเส้นผ่าศูนย์กลางของแผ่นดิสก์ถูกลบ) การให้โซนของการยับยั้งการเจริญเติบโตเกินกว่าแผ่นดิสก์กระดาษเรื่อง MIC เพื่อตรวจสอบไมโครโฟนของสมุนไพรสารสกัดกับเอสagalactiae ทวีผสมอนุกรมของสารสกัดแต่ละถูกเตรียมการใช้กลั่นเป็นหมันน้ำเป็นการจ่าย Microliters ห้าร้อยของผสมแต่ละถูกแล้วเพิ่ม 4.5 mLS. agalactiae วัฒนธรรม (ประมาณ 103 โยงมิลลิลิตร) เป็นตัวควบคุม น้ำกลั่นปลอดเชื้อใช้แทนสารสกัดสมุนไพร หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 25 ° C สำหรับ 18 ชั่วโมงการเจริญเติบโตของการแบคทีเรียถูกตรวจสอบ ไมโครโฟนถูกคำนวณเป็นความเข้มข้นต่ำสุดของสมุนไพรสารสกัดที่ทำให้เกิดการเติบโตที่ตรวจสายตา มี MIC แต่ละกำหนดจากการทดลอง 3 สมุนไพรสารสกัด มีค่า MIC ของ 500 ไมโครกรัม /มล.หรือมากกว่า 250 ไมโครกรัม/มล.และ 125 ไมโครกรัม/มล. หรือน้อยกว่าถูกประกาศให้อ่อนแอ ปานกลางและแรงต้านจุลชีพ ตามลำดับปลาเตรียมนิล (o. niloticus) ของเพศผสมได้รับมาจากหนองขอนแก่นฟาร์ม (Ratchatnai อุบลราชธานี ประเทศไทย) ช่วยลดความเครียดที่เกิดจากเปลี่ยนแปลงสิ่งแวดล้อมปลา พวกเขายังคงไว้ในพลาสติก 150 L [หมายเหตุ 6]ถังที่ 25 ° C ภายใต้การ 12 ชม.แสง: 12 ชั่วโมงมืด h และปลาพาณิชย์รับฟีด (C. P. คลาสสิก S. W. T. Co., Ltd. กรุงเทพ ประเทศไทย) สำหรับ 2 สัปดาห์ก่อนการการทดลอง ก่อนการทดลอง ปลาสุ่มเลือก และผ่านทดสอบการปรากฏตัวของแบคทีเรียในตับและไตในอาหาร BHIดำเนินการทดลองทั้งหมดในอควาเรีย 45 L ปลา 10± 1 กรัมชั่งน้ำหนักวางอยู่ในล่วงหน้า 24 ชมอควาเรีย (10 ปลาต่อตู้ปลา) เพื่อการทดลอง รับจัดอาหารวันละสองครั้งในอัตรา 5% ของน้ำหนักตัวปลาต่อวัน วันของถุง ปลาถูกเลี้ยงพาณิชย์แพทย์อาหารปลา ต่อมา ได้เลี้ยงปลาเตรียมข้อมูลเสริม (ดูเตรียมตัวดึงข้อมูลของปลา) อควาเรียถูกทำความสะอาดโดยสูบออกสองในสามของน้ำ และเปลี่ยนน้ำทุกวันพารามิเตอร์คุณภาพน้ำได้ตรวจสอบทุกวัน ระดับออกซิเจนที่ละลายน้ำ และอุณหภูมิที่วัดโดยใช้ออกซิเจน YSI 85 a นำ ความ เค็ม และเครื่องวัดอุณหภูมิ (เหลืองคอฟฟี่ช็อป

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มหาวิทยาลัยขอนแก่น, ประเทศไทย ตัวตนของแต่ละสายพันธุ์ของเชื้อแบคทีเรียได้รับการยืนยัน
โดยใช้ API 20 Strep ชุดทดสอบ (bioM? rieux อุตสาหกรรมเฮเซลวูด, MO, USA)
วัฒนธรรมแบคทีเรียเติบโตเป็นผู้ใหญ่ในการแช่หัวใจสมอง (BHI) กลางที่ 25 ° C และหุ้น
ของสิ่งมีชีวิตที่ถูกเก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียสในน้ำซุป BHI เสริมด้วย 15% กลีเซอรอล.
วัสดุพืชและการเตรียมสารสกัดจากสมุนไพรสมุนไพรที่ใช้ คือ: Allium
sativum L. (กระเทียม), ฟ้าทะลายโจร (Burm f..) กระดาน อดีตโจร (ACANTHACEAE) (ใน
ฟ้าทะลายโจร) ชุมเห็ดเทศลิตร (Leguminosae) (candlebrush) Garcinia mangostana (Linn.)
(มังคุด), P. guajava L. (Myrtaceae) (ฝรั่ง) และข่อย Lour (Moraceae)
(ฟันต้นไม้แปรง) ทั้งหมดที่ซื้อมาจากร้านค้าสมุนไพรในกรุงเทพฯ
หลอดไฟของเอ sativum, เปลือกของ G. mangostana และใบของสมุนไพรอื่น ๆ ถูกนำมาใช้สำหรับ
การเตรียมความพร้อมของสารสกัดจากสมุนไพร สามตัวทำละลายที่แตกต่างกันน้ำกลั่นเอทานอล 95% และ
เมทานอล (99.8% บริสุทธิ์) ถูกนำมาใช้ในการเตรียมสารสกัดจากสมุนไพรแต่ละชนิด ในแต่ละกรณี
สมุนไพรที่ถูกเตาอบแห้งที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง, บดละเอียดในครกและสกัดด้วย
ตัวทำละลายในอัตราส่วน 1:10 (w / v) เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ส่วนผสมที่ถูกแล้ว
หมุนเหวี่ยงที่ 13,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องและสารละลาย
ที่เก็บไว้สำหรับการกรอง สารสกัดจากน้ำกรองที่ถูกแช่แข็งที่ -80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง
ก่อนที่จะถูกแห้ง สำหรับสารสกัดอื่น ๆ ที่กรองได้ระเหยไปใน
ความแห้งกร้านในเครื่องระเหยแบบหมุนก่อนที่จะถูกแช่แข็งที่ -80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงก่อนที่จะถูก
แห้ง สารสกัดจากทั้งหมดถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสในขวดแก้วจนการใช้งาน สำหรับยาต้านจุลชีพ
ทดสอบกิจกรรมและความมุ่งมั่นของความเข้มข้นของการยับยั้งน้อยที่สุด (MIC) ที่
ความเข้มข้นของสารสกัดจากสมุนไพรแต่ละปรับถึง 10 มก. (น้ำหนักแห้ง) / มล.
ฤทธิ์ต้านจุลชีพทดสอบฤทธิ์ต้านจุลินทรีย์ของสารสกัดจากสมุนไพร
กับ S. agalactiae ถูกตรวจสอบโดยใช้ไม้กวาด วิธีดิสก์กระดาษที่มีบางส่วน
ปรับเปลี่ยน สี่สิบไมโครลิตรของแต่ละสารสกัดจากสมุนไพรที่เป็นด่างบนแผ่นกระดาษปลอดเชื้อ
(Schleicher และ Schuell ไบ, คีน, NH, USA) วางลงบนแผ่น BHI วุ้น
แพร่กระจายด้วยไม้กวาดของวัฒนธรรมในชั่วข้ามคืนที่มีอดีตอาณานิคมหน่วย (CFU) เอส
agalactiae (ประมาณ 108
/ มิลลิลิตร) แต่ละคนได้รับการทดสอบสารสกัดในเพิ่มขึ้นสามเท่า เชิงลบ
ควบคุมได้จัดทำในลักษณะเดียวกันยกเว้นว่า 40 ไมโครลิตรของตัวทำละลายบริสุทธิ์ถูกนำมาใช้
แทนของสารสกัดจากสมุนไพร Oxytetracycline (5 ไมโครกรัมบนแผ่นดิสก์กระดาษหมัน), ทั่วไป
ยาปฏิชีวนะที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำปลานิลในประเทศไทยทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุมบวก
แผ่นวุ้นที่เตรียมไว้แล้วถูกบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18 ชั่วโมงและการเจริญเติบโตของพวกเขายับยั้ง
โซนเป็นเช่นเดียวกับขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางรวมของการเจริญเติบโตของโซนฟรีทั่วแผ่น
เส้นผ่าศูนย์กลางของเขตการยับยั้งการเจริญเติบโตในการควบคุมการรักษาเชิงลบถูก
หักออก (ในกรณีที่ไม่มีการยับยั้งการเจริญเติบโตในการควบคุมการรักษาเชิงลบเพียง
เส้นผ่าศูนย์กลางของแผ่นดิสก์ที่ถูกหักออก) ให้โซนการยับยั้งการเจริญเติบโตเกินกว่า
แผ่นดิสก์กระดาษ.
การกำหนด MIC เพื่อตรวจสอบ MIC ของสารสกัดจากสมุนไพรกับที่ S
agalactiae สองเท่าเจือจางอนุกรมของแต่ละสารสกัดถูกจัดทำขึ้นโดยใช้กลั่นผ่านการฆ่าเชื้อ
น้ำเจือจาง ห้าร้อยไมโครลิตรของแต่ละเจือจางถูกเพิ่มเข้ามาแล้ว 4.5 มล
เอส agalactiae วัฒนธรรม (ประมาณ 103 CFU / มิลลิลิตร) เป็นตัวควบคุม, น้ำกลั่นปลอดเชื้อ
ถูกนำมาใช้แทนของสารสกัดจากสมุนไพร หลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18 ชั่วโมงการเจริญเติบโตของ
เชื้อแบคทีเรียที่ถูกตรวจสอบ ไมค์ถูกคำนวณเป็นค่าความเข้มข้นต่ำสุดของสมุนไพร
สารสกัดที่ส่งผลให้ในกรณีที่ไม่มีการเจริญเติบโตที่ตรวจพบสายตา แต่ละไมค์ถูก
กำหนดจากการทดลองสาม สารสกัดสมุนไพรที่มีค่า MIC 500 ไมโครกรัม /
มิลลิลิตรหรือมากกว่า 250 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรและ 125 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรหรือน้อยได้รับการประกาศให้มีอ่อนแอปานกลาง
และแข็งแรงกิจกรรมต้านจุลชีพตามลำดับ.
เตรียมปลาปลานิล ( O. niloticus) ของ เพศผสมที่ได้รับจาก
หนองขอนฟาร์ม (อุบลราชธานี Ratchatnai ประเทศไทย) เพื่อลดความเครียดที่เกิดจาก
การเปลี่ยนแปลงสิ่งแวดล้อมปลาได้รับการดูแลใน 150 L [หมายเหตุ 6] พลาสติก
ถังที่ 25 ° C ภายใต้แสง 12 ชั่วโมง: 12 ชั่วโมงต่อช่วงแสงที่มืดและปลาเชิงพาณิชย์เฟด
ฟีด (CP คลาสสิก; SWT จำกัด จำกัด , Bangkok, Thailand) เป็นเวลา 2 สัปดาห์ก่อนที่จะมี
การทดลอง เพียงก่อนที่การทดลองปลาถูกสุ่มเลือกและทดสอบสำหรับ
การปรากฏตัวของแบคทีเรียในตับและไตของพวกเขาใน BHI วุ้น.
การทดสอบทั้งหมดได้ดำเนินการในตู้ 45 L ปลาหนัก 10 ± 1 กรัมถูกวางไว้
ในตู้กระจก (10 ปลาพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำต่อ) 24 ชั่วโมงก่อนที่จะมีการทดลอง อาหารจะให้มา
วันละสองครั้งในอัตรา 5% ของน้ำหนักตัวปลาต่อวัน ในวันที่ของการปล่อยปลา
ถูกเลี้ยงอาหารปลาดังกล่าวในเชิงพาณิชย์ ต่อมาปลาได้รับการเลี้ยงดู
เตรียมฟีดเสริม (ดูการเตรียมการของปลาฟีด) ตู้ทำความสะอาด
ทุกวันโดยดูดออกสองในสามของน้ำและแทนที่ด้วยน้ำจืด.
พารามิเตอร์ที่มีคุณภาพน้ำถูกตรวจสอบทุกวัน ระดับออกซิเจนที่ละลายในน้ำและ
อุณหภูมิที่ถูกวัดโดยใช้ YSI 85 ออกซิเจนการนำความเค็มและ
วัดอุณหภูมิ (สีเหลือง Spr

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มหาวิทยาลัย , ขอนแก่น , ไทย เอกลักษณ์ของแต่ละสายพันธุ์แบคทีเรียที่ได้รับการยืนยันโดยใช้ชุดทดสอบ API 20 Strep ( biom é rieux อุตสาหกรรม ฮาเซิลวูด โม สหรัฐอเมริกา ) ที่แบคทีเรียที่ใช้ปลูกใน สมอง หัวใจ ( BHI ) กลางที่ 25 ° C และหุ้นของสิ่งมีชีวิตที่ถูกเก็บไว้ที่ 80 ° C ใน BHI broth −เสริม 15 % กลีเซอรอล .วัสดุพืชและการเตรียมสมุนไพรสารสกัดจากสมุนไพรที่ใช้ ได้แก่ เลียมsativum ลิตร ( กระเทียม ) , A . paniculata ( Burm . F . ) ผนัง ฟ้าทะลายโจร ( Acanthaceae ) ( อดีตสร้าง , ชุมเห็ดเทศ Cassia ) L ( Leguminosae ) ( candlebrush ) เปลือกมังคุด ( Linn . )( มังคุด ) , หน้าอาจลิตร ( Myrtaceae ) ( ฝรั่ง ) และข่อย ) ( Moraceae )( ต้นไม้แปรงฟัน ) ทั้งหมดซื้อจากร้านสมุนไพรในกรุงเทพมหานคร หลอดของA . G . เกิด sativum , เปลือกและใบของสมุนไพรอื่น ๆที่ใช้สำหรับการเตรียมสารสกัดสมุนไพร ทั้งสามต่างละลายน้ํากลั่น เอทานอล และเมทานอล ( บริสุทธิ์ 99.8% ) เพื่อใช้เตรียมสารสกัดจากสมุนไพรแต่ละชนิด ในแต่ละกรณีสมุนไพรอบแห้งที่อุณหภูมิ 80 องศา C ได้นาน 72 ชั่วโมง บดละเอียดในครก และใช้ตัวทำละลายในอัตราส่วน 1 : 10 ( w / v ) เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ผสมแล้วระดับที่ 10 , 000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 10 นาที ที่อุณหภูมิห้อง และน่านใช้สำหรับกรอง สารสกัดสารละลาย , สารละลายถูกแช่แข็งที่อุณหภูมิ 80 องศา C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง บริษัท เวสเทิร์นก่อนที่จะถูกทำให้แห้งด้วยความเย็น สำหรับสารสกัดอื่น ๆระเหยสารละลายคือระเหยแห้งในเครื่องก่อนที่จะถูกแช่แข็งที่อุณหภูมิ 80 องศา C − 48 ชั่วโมงก่อนที่จะเป็นแห้ง . สารสกัดทั้งหมดเก็บรักษาที่อุณหภูมิ 20 ° C − vials แก้วจนใช้ สำหรับยาต้านจุลชีพทดสอบกิจกรรมและการหาความเข้มข้นน้อยที่สุดยับยั้ง ( MIC )ความเข้มข้นของแต่ละสารสกัดสมุนไพรปรับถึง 10 มิลลิกรัม ( น้ำหนักแห้ง ) ตามลำดับการทดสอบฤทธิ์การต้านเชื้อของสมุนไพรสารสกัดจากกิจกรรมกับ S . แลคเตียเป็นตรวจสอบการใช้ไม้กวาด กระดาษแผ่นบางวิธีด้วยการปรับเปลี่ยน จำนวนตัวเลขของสมุนไพรแต่ละชนิด แยกเป็นด่างบนแผ่นกระดาษปลอดเชื้อ( ไชลเคอร์ และ schuell วิทยาศาสตร์ชีวภาพ คีน , NH , USA ) , วุ้น BHI วางลงบนจานกระจายกับไม้กวาดของคืนวัฒนธรรมที่มีอาณานิคม ( CFU ) เป็นหน่วยของวินาที( ประมาณ 108 แลคเตีย/ ml ) แต่ละแยกถูกทดสอบทั้งสามใบ ลบการควบคุมที่ถูกเตรียมไว้ในลักษณะเดียวกันยกเว้นว่า 40 μชั้นของตัวทำละลายบริสุทธิ์ถูกใช้แทนของสมุนไพรสารสกัด ออกซิเตตราไซคลีน ( 5 μ g บนแผ่นกระดาษปลอดเชื้อ ) , ทั่วไปยาปฏิชีวนะที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงปลานิลในประเทศไทย ทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมบวก ที่เตรียมวุ้นแผ่นแล้วอุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 18 ชั่วโมง และการยับยั้งการเจริญเติบโตของพวกเขาโซนมีเหมือน เส้นผ่าศูนย์กลางรวมของการเจริญเติบโตฟรีโซนรอบๆ แผ่น ที่เส้นผ่าศูนย์กลางของการเจริญเติบโตบริเวณยับยั้งในการรักษาควบคุมเชิงลบ คือหักออก ( กรณีไม่ยับยั้งการเจริญเติบโตในการรักษาควบคุมเชิงลบเพียงเส้นผ่าศูนย์กลางของแผ่นดิสก์ที่ถูกหักออก ) ให้โซนของการยับยั้งการเจริญเติบโตเกินกว่าแผ่นกระดาษความมุ่งมั่นของไมค์ว่าไมค์ของสมุนไพรสารสกัดจาก .แลคเตียก , อุทิศถวายของแต่ละสารสกัดที่เตรียมไว้ใช้งานกลั่นน้ำเป็นตัวเจือจาง . ห้าร้อยตัวเลขของแต่ละระดับก็เพิ่ม 4.5 มล.วัฒนธรรมของ S . แลคเตีย ( ประมาณ 103 CFU / ml ) เป็นควบคุมน้ำกลั่นปลอดเชื้อถูกนำมาใช้แทนของสมุนไพรสารสกัด หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 25 ° C 18 H การเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ถูกตรวจสอบ ไมค์เป็นคํานวณความเข้มข้นต่ำสุดของสมุนไพรสารสกัดที่ส่งผลให้เกิดการเติบโตที่สามารถมองเห็น ไมค์แต่ละคือพิจารณาจาก 3 การทดลอง สมุนไพรสกัดด้วยค่า MIC ของμ 500 กรัมต่อลิตรมล. หรือมากกว่า 250 μ g / ml และ 125 μ g / ml หรือน้อยกว่า ประกาศให้มี อ่อน ปานกลางแข็งแรงและฤทธิ์ต้านจุลินทรีย์ ตามลำดับการเตรียมปลาปลานิล ( O . niloticus ) ของเพศผสมได้จากฟาร์มขอนแก่นหนอง ( อุบล ratchatnai ประเทศไทย ) เพื่อลดความเครียดที่เกิดจากการเปลี่ยนแปลงของสิ่งแวดล้อมในปลาที่พวกเขาถูกเก็บรักษาไว้ใน 150 ลิตร [ หมายเหตุ ] พลาสติกรถถังที่ 25 ° C ภายใต้แสง 12 H : 12 ชั่วโมงแสงมืด และเลี้ยงปลาเชิงพาณิชย์อาหาร ( C . P . S . W . คลาสสิก ; T . Co . , Ltd . , กรุงเทพมหานคร , ประเทศไทย ) เป็นเวลา 2 สัปดาห์ก่อนที่จะมีการการทดลอง ก่อนการทดลองสุ่มและทดสอบสำหรับปลาการแสดงตนของแบคทีเรียในตับและไตใน BHI วุ้นทุกการทดลองใน aquaria 45 L . ปลาหนัก 1 ± 1 G อยู่ในวาเรีย ( 10 ตัว ต่อตู้ 24 ชั่วโมงก่อนการทดลอง อาหารที่ให้มาวันละสองครั้งในอัตรา 5% ของน้ำหนักตัวปลาต่อวัน ในวันของถุงน่อง , ปลาเลี้ยงให้อาหารปลาเชิงพาณิชย์ดังกล่าว ต่อมา ปลาเป็นอาหารเตรียมเสริมอาหาร ( ดูการเตรียมปลาอาหาร ) สัตว์น้ำสะอาดทุกวัน โดยการดูดออกสองในสามของน้ำและแทนที่ด้วยน้ำบริสุทธิ์พารามิเตอร์คุณภาพน้ำ ถูกทุกวัน ปริมาณออกซิเจนที่ละลายในน้ำระดับอุณหภูมิวัดได้โดยใช้ ysi 85 ออกซิเจน ค่าการนำไฟฟ้า ความเค็ม และอุณหภูมิ