Isolation of genes related to chlor

Isolation of genes related to chlorophyll synthesis and degradation
Fragments of genes related to chlorophyll synthesis and degradation
were isolated by PCR using degenerate primers. The
sequences of the degenerate primers are described in Supplemental
Table 1. PCR amplification was carried out for 30 cycles in an
automated thermocycler (Bio-Rad iCycler) with the thermocycle
profile (denaturation at 95 ◦C for 30 s, primers annealing at suitable
temperatures as described below for 1 min, and primer extension
at 72 ◦C for 1 min) after a cycle (denaturation at 95 ◦C for 2 min,
primers annealing at suitable temperatures as described below for
5 min, and primer extension at 72 ◦C for 5 min), and subsequently
a post-PCR incubation was carried out at 72 ◦C for 5 min. The temperatures
of primers annealing were 49 ◦C, 52 ◦C, 44 ◦C, 46 ◦C, 47 ◦C,
51 ◦C, and 44 ◦C for Mg chelatase D subunit (MgCh-D), chlorophyll
synthase (CS), chlorophyll a oxygenase (CAO), chlorophyll b reductase
(CBR), pheophytinase (PPH), pheophorbide a oxygenase (PAO),
and red chlorophyll catabolite reductase (RCCR), respectively. The
accession numbers of isolated genes are given in Supplemental
Table 2, the sequence comparison of isolated genes with equivalent
genes in other plants is shown in Supplemental Fig. 1, and the
top 10 hit proteins of the Blast results of isolated genes are listed
in Supplemental Table 3.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกยีนที่เกี่ยวข้องกับคลอโรฟิลล์
การสังเคราะห์และการย่อยสลายของชิ้นส่วนยีนที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์คลอโรฟิลล์

และแยกสลายด้วยวิธี PCR โดยใช้ primers ทราม .
ลำดับของดีเอ็นเอการอธิบายไว้ในโต๊ะเสริม
1 การขยาย PCR พบว่า 30 รอบใน
แบบอัตโนมัติ ( icycler เทอร์มอไซเคล ์ชีวภาพราด ) กับ thermocycle
รายละเอียด ( ( 95 ◦ C 30 s , ไพรเมอร์อบที่อุณหภูมิเหมาะสม
ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง 1 นาที และแนวทางส่งเสริม
72 ◦องศาเซลเซียสนาน 1 นาที ) หลังจากรอบ ( ( 95 ◦ C เป็นเวลา 2 นาที ไพรเมอร์ที่เหมาะสมอุณหภูมิการอบ

ตามที่อธิบายไว้ด้านล่างสำหรับ 5 นาทีและ รองพื้น◦ส่วนขยายที่ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที ) และต่อมา
โพสต์โดยการบ่มทำการ◦ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีอุณหภูมิการอบอ่อนจำนวน 49 ◦
ไพรเมอร์ซี , 52 ◦ C C C ◦ 44 ◦ 46 , 47 ◦ C
51 ◦ C , และ 44 ◦ C มิลลิกรัม chelatase D subunit ( mgch-d ) , คลอโรฟิลล์
synthase ( CS ) , คลอโรฟิลล์ , คลอโรฟิลล์บี oxygenase ( โจโฉ )
( รีดักเตส pheophytinase CBR ) , ( ซึ่ง ) , pheophorbide เป็น oxygenase ( เป้า ) และ คลอโรฟิลล์ และ catabolite
สีแดง ( rccr ) ตามลำดับ
ตัวเลขของการแยกยีนยกให้เป็นโต๊ะเสริม
2 , ลำดับการแยกยีนด้วยยีนในพืชอื่น ๆที่เทียบเท่า
แสดงในรูปที่ 1 เสริมและ
ยอดฮิต 10 โปรตีนของระเบิดจากแยกยีนอยู่
ในโต๊ะเสริม 3