We have used immunoblotting, immuno

We have used immunoblotting, immunocytochemical, and gene fusion methods to examine the differential subcellular
partitioning of tobacco etch potyvirus proteins that are potentially associated with RNA replication. From the
earliest timepoints at which viral proteins could be detected, proteins Nla (49-kilodalton proteinase) and Nlb (58-
kilodalton polymerase) were localized primarily in the nucleus, whereas the 71-kilodalton cylindrical inclusion protein
was identified in the cytoplasm. The Nla and Nlb coding regions were fused to the 8-glucuronidase (GUS) sequence
in a plant expression vector, resulting in synthesis of chimeric proteins in transfected protoplasts and in transgenic
plants. In situ localization of GUS activity revealed nuclear localization of the GUS-Nla and GUS-NIb fusion proteins
and cytoplasmic localization of nonfused GUS. These results indicate that both Nla and Nlb contain nuclear targeting
signals, and that they may serve as useful models for studies of plant cell nuclear transport. A discussion of the
general utility of the nuclear transport system described here, as well as the role of nuclear translocation of potyviral
proteins, is presented.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราใช้ immunoblotting, immunocytochemical และยีนผสมผสานวิธีการตรวจสอบแตกต่างกัน subcellularพาร์ทิชันยาสูบกัด potyvirus โปรตีนที่อาจเกี่ยวข้องกับอาร์เอ็นเอจำลองแบบ จากการสุด timepoints ที่โปรตีนที่ไวรัสไม่สามารถตรวจพบ โปรตีน Nla (49-kilodalton proteinase) และร้อง (58-พอลิเมอเรส kilodalton) มีภาษาท้องถิ่นเป็นหลักในนิวเคลียส ในขณะที่โปรตีนทรงกระบอกรวม 71-kilodaltonมีการระบุไว้ในไซโทพลาซึม Nla และร้องรหัสภูมิภาคถูก fused ลำดับ 8-glucuronidase (GUS)ในเวกเตอร์นิพจน์โรงงาน เกิดการสังเคราะห์โปรตีน chimeric ในโป transfected และในถั่วเหลืองรดน้ำต้นไม้ แปลใน situ ของ GUS กิจกรรมเปิดเผยแปลนิวเคลียร์ของโปรตีนฟิวชั่น GUS Nla และหมึก GUSและแปล cytoplasmic ของ nonfused GUS ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า Nla และร้องประกอบด้วยกำหนดเป้าหมายนิวเคลียร์สัญญาณ และว่า พวกเขาอาจให้บริการเป็นรูปแบบประโยชน์ศึกษาเซลล์พืชนิวเคลียร์ระบบขนส่ง คำอธิบายเกี่ยวกับการโปรแกรมอรรถประโยชน์ทั่วไปของระบบขนส่งนิวเคลียร์ที่อธิบายไว้ที่นี่ และบทบาทของการสับเปลี่ยนนิวเคลียร์ของ potyviralโปรตีน การนำเสนอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราได้ใช้ immunoblotting, immunocytochemical และวิธีการฟิวชั่นของยีนที่จะตรวจสอบความแตกต่าง subcellular
แบ่งพาร์ทิชันของโปรตีนจำหลักยาสูบ potyvirus ที่เกี่ยวข้องที่อาจเกิดขึ้นกับการจำลองอาร์เอ็นเอ จาก
timepoints ที่เก่าแก่ที่สุดที่โปรตีนของไวรัสสามารถตรวจพบโปรตีน Nla (49 kilodalton โปร) และ Nlb (58-
โพลิเมอร์ kilodalton) ได้รับการแปลเป็นภาษาท้องถิ่นเป็นหลักในนิวเคลียสในขณะที่ 71 kilodalton
โปรตีนรวมรูปทรงกระบอกที่ถูกระบุในพลาสซึม ภูมิภาคและการเข้ารหัส Nla Nlb หลอมรวมกับ 8 glucuronidase (กัส)
ตามลำดับในเวกเตอร์แสดงออกพืชผลในการสังเคราะห์โปรตีนลูกผสมในprotoplasts transfected
และพันธุ์พืช ในการแปลแหล่งกำเนิดของกิจกรรม GUS เปิดเผยแปลนิวเคลียร์ของ GUS-Nla และ
GUS-จะงอยโปรตีนฟิวชั่นและท้องถิ่นนิวเคลียสของnonfused GUS ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าทั้งสอง Nla Nlb
และมีการกำหนดเป้าหมายนิวเคลียร์สัญญาณและที่พวกเขาอาจจะทำหน้าที่เป็นรุ่นที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาของเซลล์พืชขนส่งนิวเคลียร์ การอภิปรายของยูทิลิตี้ทั่วไปของระบบขนส่งนิวเคลียร์อธิบายไว้ที่นี่เช่นเดียวกับบทบาทของการโยกย้ายนิวเคลียร์ potyviral โปรตีนจะนำเสนอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราใช้วิธี immunocytochemical , และวิธีการฟิวชั่นยีนเพื่อศึกษาค่าตําแหน่งภายในเซลล์
การยาสูบ etch โพตีไวรัสโปรตีนที่อาจเกี่ยวข้องกับ RNA ซ้ำ จาก timepoints
แรกสุดที่ไวรัสสามารถตรวจพบโปรตีน โปรตีน สนช. ( 49 kilodalton โปรตีน ) และ nlb ( 58 -
ใช้เป็นหลักใน kilodalton ) เป็นนิวเคลียส ส่วน kilodalton ทรงกระบอก 71 รวมโปรตีน
ถูกระบุใน cytoplasm และที่ สนช. nlb รหัสภูมิภาคถูกหลอมรวมกับ 8-glucuronidase ( กัส ) ลำดับ
ในพืชเวกเตอร์แสดงออก เป็นผลในการสังเคราะห์ของโปรตีนในเซลล์ที่ transfected และพืชต้น

ในแหล่งกำเนิดจำกัดเปิดเผยว่ากิจกรรมนิวเคลียร์ของกัส กัสจำกัด สนช. และ กัส มีโปรตีนและฟิวชั่น
พบจำกัด nonfused กัส ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า ทั้งสนช. nlb นิวเคลียร์และมีเป้าหมาย
สัญญาณและที่พวกเขาอาจจะใช้เป็นรุ่นที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาเซลล์พืชการขนส่งนิวเคลียร์ การอภิปรายของ
ประโยชน์ทั่วไปของระบบการขนส่งพลังงานนิวเคลียร์ที่อธิบายไว้ที่นี่ รวมทั้งบทบาทของนิวเคลียร์ การเคลื่อนย้ายของ potyviral
โปรตีน คือแสดง