2.4. Antibiofilm assay2.4.1. Inhibi

2.4. Antibiofilm assay
2.4.1. Inhibition of biofilm formation
The effect of P. betle extract on biofilm formation of each representative
strain, S. mutans ATCC 25175 and A. actinomycetemcomitans
ATCC 33384, was examined by using the modified microdilution
method.16 Briefly, two-fold serial dilutions of P. betle extract were
prepared, with final concentration ranged from 0.02 to 25 mg/mL. A
cell suspension of the tested strainswas prepared as described in the
MIC assay, and 100 mL (1  106 CFU/mL) were inoculated in each of a
96-wellplate.A0.1%CHX, phosphate bufferedsaline (PBS) and extractfree medium were used as the positive controls, non-treated and
blank controls, respectively. After incubation at 37
C for 24 h, supernatants
were discarded and washed 3 times with PBS. Biofilm
formation was quantified by using a 3-[4,5-dimethyl-2-thiazolyl]-2,
5-diphenyl-2H-tetrazolium-bromide (MTT) assay. The numbers of
surviving bacteria were determined by measuring their ability to
reduce the yellow tetrazolium salt to a purple formazan product at
570 nm. Higher OD values indicate an increased number of surviving
microorganisms in the biofilm. Percentage inhibition was calculated
by using the equation [1  (A570 of the test/A570 of non-treated
control)]  100. The minimum biofilm inhibition concentration
(MBIC)was defined as the lowest concentration that showed 50% and
90% inhibition of biofilm formation (MBIC50 and MBIC90).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. Antibiofilm assay2.4.1. ยับยั้งการก่อตัวของฟิล์มสารสกัดจากผลของ P. betle ในฟิล์มของตัวแทนแต่ละสายพันธุ์ S. แลง ATCC 25175 และ A. actinomycetemcomitansATCC 33384 ตรวจสอบ โดยใช้ microdilution แก้ไขmethod.16 สั้น ๆ P. betle สารสกัดเจือจาง serial สองเท่าได้เตรียม เข้มข้นสุดท้ายอยู่ในช่วงจาก 0.02 ถึง 25 mg/mL Aระงับการ strainswas ผ่านการทดสอบที่เตรียมไว้ตามที่อธิบายไว้ในเซลล์ทดสอบไมค์ และ 100 มล. (1 106 CFU/มิลลิลิตร) ถูก inoculated ในแต่ละแบบ96-wellplate A0.1%CHX, bufferedsaline ฟอสเฟต (PBS) และ extractfree สื่อถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก ไม่ได้รับการรักษา และว่างเปล่าควบคุม ตามลำดับ หลังจากบ่มที่ 37 C ใน 24 h, supernatantsทิ้ง และล้าง 3 ครั้ง ด้วย PBS ไบโอฟิล์มก่อตัวเป็นวัด โดยใช้ 3-[4,5-dimethyl-2-thiazolyl]-25-นไดฟีนิลได 2H-tetrazolium-โบรไมด์ (MTT) assay หมายเลขของเชื้อแบคทีเรียที่รอดตายถูกกำหนด โดยการวัดความสามารถในการลดเกลือ tetrazolium สีเหลืองกับสีม่วง formazan ผลิตภัณฑ์ที่570 nm ค่า OD สูงขึ้นบ่งชี้อยู่รอดจุลินทรีย์ในฟิล์ม คำนวณเปอร์เซ็นต์การยับยั้งโดยใช้สมการ [1 (A570 ของทดสอบเทียบ A570 ของถือว่าไม่ใช่ควบคุม)] 100 ความเข้มข้นต่ำสุดฟิล์มยับยั้ง(MBIC) ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต่ำสุดที่แสดงให้เห็นว่า 50% และ90% ที่การยับยั้งการก่อตัวของฟิล์ม (MBIC50 และ MBIC90)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 Antibiofilm ทดสอบ
2.4.1 ยับยั้งการก่อตัวของไบโอฟิล์ม
ผลของสารสกัดพลูพีเกี่ยวกับการก่อฟิล์มตัวแทนของแต่ละ
สายพันธุ์เอส mutans ATCC 25175 และ A. actinomycetemcomitans
ATCC 33384 ได้รับการตรวจสอบโดยใช้การแก้ไข microdilution
method.16 สั้น ๆ สองเท่าเจือจางอนุกรมของ P . สารสกัดพลูถูก
จัดทำขึ้นด้วยความเข้มข้นสุดท้ายตั้งแต่ 0.02-25 mg / ml
เซลล์แขวนลอยของ strainswas ทดสอบที่จัดทำขึ้นตามที่อธิบายไว้ใน
การทดสอบ MIC และ 100 มล (1? 106 CFU / มิลลิลิตร) ถูกเชื้อในแต่ละของ
96% wellplate.A0.1 CHX, bufferedsaline ฟอสเฟต (PBS) และขนาดกลาง extractfree ถูกนำมาใช้เป็นระบบควบคุมการบวกที่ไม่ได้รับการรักษาและ
ควบคุมว่างเปล่าตามลำดับ หลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง, supernatants
ถูกโยนทิ้งและล้าง 3 ครั้งด้วยพีบีเอส ไบโอฟิล์ม
ก่อถูกวัดโดยใช้ 3- [4,5-dimethyl-2-thiazolyl] -2,
5-diphenyl-2H-tetrazolium-โบรไมด์ (MTT) การทดสอบ ตัวเลขของ
เชื้อแบคทีเรียที่มีชีวิตรอดถูกกำหนดโดยการวัดความสามารถในการ
ลดเกลือ tetrazolium สีเหลืองกับผลิตภัณฑ์ formazan สีม่วงที่
570 นาโนเมตร ค่า OD ที่สูงขึ้นบ่งบอกถึงจำนวนที่เพิ่มขึ้นในการอยู่รอด
จุลินทรีย์ในฟิล์ม ยับยั้งอัตราร้อยละที่คำนวณได้
โดยใช้สมการ [1? (A570 ของการทดสอบ / A570 ของการไม่ได้รับการรักษา
ควบคุม)] 100 ความเข้มข้นของไบโอฟิล์มยับยั้งขั้นต่ำ
(MBIC) ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต่ำสุดที่แสดงให้เห็นว่า 50% และ
90% ยับยั้งการก่อตัวของไบโอฟิล์ม (MBIC50 และ MBIC90)